Генератор ваз разобрать: Разборка и ремонт генератора — Ремонт ВАЗ 2106Ремонт ВАЗ 2106

Перебираем генератор ВАЗ 2107 37.3701 | Клуб любителей классики ВАЗ-2107, ВАЗ 2106

Итак в этой статье я опишу переборку генератора. Речь пойдет о генераторе 37.3701 хотя на генераторе Г-222 все практически идентично и эта статья подойдет и для него с некоторыми корректировками. Я покупал для замены: 1. Диодный мост — 190р 2. Конденсатор генератора — 15р 3. Подшипники — я взял Andycar — 65р 4. четыре гайки на 8. Реле регулятор на генераторе у меня новое поэтому его решил не менять. Так же нам понадобится универсальный съемник (я лично вместо него использовал съемник тяг, не очень удобно оказалось но повозившись снял им подшипник). Очень желательно иметь щетку по металлу я купил набор из трех щеток и шкурку.

Итак сам генератор

Почистим генератор щеточкой от грязи. И откручиваем гайку шкива. Кладем генератор чтоб шкив уперся в пол, надеваем на гайку ключ на 19 и придерживая одной рукой шкив от проворачивая, наносим по ключу сильные и резкие удары молотком. Шкив конечно будет проворачиваться но и гайка в конечном итоге начнет откручиваться, я стучал так минуты 2-3

Ключом на 10 откручиваем четыре болта и вынимаем шпильки стягивающие генератор.

далее к сожалению несколько фоток потерялись 🙁 но на словах объясню. на фото выше на валу видно шпонку которая удерживает шкив от проворачивания. Так вот с помощью зубила надо выбить эту шпонку. Ставим генератор валом в верх. С верху в низ ставим на шпонку зубило и несильными ударами молотка выбиваем ее. Выбив ее снимаем переднюю крышку генератора. Если идти будет туго поднимаем генератор на весу легонько бьем по балу молотком. Крышка снимется легко. Далее снимаем с генератора реле регулятор. И в через отверстие под реле через выколотку выбиваем ротор.

Наносим несколько сильных ударов, проворачиваем ротор, наносим еще несколько ударов и так по кругу пока не выбьем.

Далее головкой на 8 откручиваем три гайки крепления статора и диодного моста. Тут обратите внимание если болты начнут проворачиваться надо придержать их пассатижами с другой стороны крышки.

И снимаем статор. Мне чтобы его снять пришлось немного полить стыки WD-40 и легкими ударами молотка аккуратно выбить его. После снятия статора вынимаем диодный мост, открутив конденсатор, если вы этого еще не сделали. Далее надо выпресовать задний подшипник ротора, лучше делать это универсальным съемником но я выпресовывал съемником рулевых тяг.

Далее берем переднюю крышку и откручиваем стягивающие пластины. Болты там законтрены и гайки могут повредится при откручивании (для этого мы и брали 4 гайки на 8), но у меня они остались целыми. При откручивании опять таки болты выпадают из пазов и начинают прокручиваться, поэтому придерживаем их с другой стороны. Снимаем пластины и через оправку выпресовываем подшипник

Ну вот генератор полностью разобран, чистим все щеткой по металлу, так же мне при чистке кое-где понабился нож и шкурка, просто ими удобней соскоблить большие отложения грязи. Новые запчасти. Конденсатор, два подшипника и диодный мост, у вас тут может быть в добавок реле регулятор но у меня оно итак новое было.

Кстати обратите внимание с 1996г изменено место вывода контакта 61. У меня старый диодный мост был старого образца. Разница видно на фото, на старом контакт на проводе а на новом вшит в диодный мост.

Подшипники запрессовываем обратно через оправку, тут есть один очень важный момент — запрессовывая задний подшипник на ротор оправку надо ставить только на внутреннее кольцо подшипника, а запрессовывая передний только на внешнюю. иначе вы можете просто повредить подшипник при запрессовке. Собираем генератор в обратной последовательности. Если у вас был диодный мост старого образца то вывод 61 будет плохо проходить в отверстие в задней крышке, мне пришлось доработать отверстие напильником

Кстати советую прошкурить посадочную плоскость конденсатора для лучшего контакта(видно на фото выше. Ротор забиваем обратно несильными ударами молотка, для того чтобы не повредить резьбу я надел на вал головку.

При сборе накладок переднего подшипника не забываем законтрить болты зубилом.

Ну и вот генератор опять в сборе

Если будут какие либо вопросы обсуждаем на форуме http://www.semerka.info/forum/viewtopic.php?p=10803#10803 Mr.Ice специально для www.semerka.info

Полная разборка генератора 37.3701 | Twokarburators.ru

Разберем снятый с двигателя генератор 37.3701 учитывая некоторые особенности его разборки. Этот генератор устанавливается на автомобилях ВАЗ 2108, 2109, 21099 ранних годов выпуска. Но вполне взаимозаменяем с более поздним генератором 9402.3701 и аналогичными ему. Его разборка не представляет особой сложности и требует минимум инструментов и минимум навыков в ремонте подобных устройств.

Необходимые инструменты

— Крестовая и шлицевая отвертки

— Накидные ключи (головки, торцевые ключи) на 8 мм, 10 мм, 19 мм

— Молоток

Порядок разборки генератора 37.3701

— Снимаем регулятор напряжения

На генераторе 37.3701 он объединен в единый узел со щетками (правда, до 1996 г. это были две разные детали). Сначала отсоединяем наконечник провода диодного моста от регулятора напряжения. Для снятия регулятора отворачиваем отверткой два винта его крепления и извлекаем из отверстия в задней части (крышке) генератора.

Снятие регулятора напряжения генератора 37.3701

— Снимаем шкив генератора

Для этого стопорим его от проворачивания отверткой и отворачиваем гайку его крепления накидным ключом на 19 мм. Момент затяжки большой, поэтому лучше применять ключ с длинной ручкой.

Снятие шкива генератора 37.3701 автомобилей ВАЗ 2108, 2109, 21099

После чего снимаем следующие детали: гайка, шайба, шкив с крыльчаткой, сегментная шпонка.

Cнятие шкива генератора

— Снимаем конденсатор

Для этого ключом на 10 мм отворачиваем гайку крепления его провода с вывода «30» генератора. Крестовой отверткой отворачиваем винт крепления конденсатора к задней половине генератора и снимаем его.

Cнятие конденсатора с генератора

— Разъединяем половинки корпуса генератора

В начале помечаем их взаимное расположение (нанеся метки на обе части). Ключом на 10 мм (удобнее использовать головку или торцевой ключ) отворачиваем четыре гайки стяжных болтов (под гайками имеются граверные шайбы).

Отворачивание гаек стяжных болтов генератора

Вытягиваем болты. Снимаем переднюю часть генератора. Извлекаем ротор из задней части генератора. Если не извлекается можно постучать по нему выколоткой из мягкого металла через окно под регулятор напряжения или, навернув на резьбу вала гайку, и зажав ее в тисках, резким движением вверх сдернуть заднюю крышку в вала. На валу ротора остается подшипник. При необходимости его демонтируем съемником и напрессовываем новый (См. «Замена подшипников генератора»).

Разъединяем части корпуса генератора

— Извлекаем подшипник из передней части генератора

Эту операцию проводим, если необходима замена переднего подшипника генератора. Ключом на 8 мм отворачиваем четыре гайки крепления передней защитной пластины подшипника. Снимаем ее.

Извлекаем передний подшипник генератора

Легким ударом молотка по торцу вала ротора выбиваем его вместе с передним подшипником из передней крышки генератора. Снимаем заднюю защитную пластину с винтами и дистанционное кольцо с вала.

Снимаем ротор генератора

В другом случае, можно более аккуратно отрезком трубы подходящего диаметра выбить старый подшипник вместе с валом. Подшипник с разных сторон поддеваем монтажкой и резкими движениями сдвигаем с вала ротора (можно использовать съемник).

— Отсоединяем статор

Ключом на 8 мм (удобнее использовать головку или торцевой ключ) отворачиваем три гайки крепления клемм статора к диодному мосту. Извлекаем его из задней крышки генератора поддев шлицевой отверткой или стукнув по ней молотком.

Снимаем статор генератора

— Снимаем диодный мост (выпрямительный мост)

Извлекаем диодный мост из задней крышки генератора. Гайки его крепления мы уже открутили, снимая статор. Теперь вынимаем винты (3 штуки) с изоляторами из задней крышки генератора. Из диодного моста вынимаем контактный болт.

Снимаем диодный мост генератора

Все, генератор 37.3701 автомобилей ВАЗ 2108, 2109, 21099 полностью разобран. Как собрать все обратно см. «Сборка генератора 37.3701 после полной разборки».

Примечания и дополнения

Снятие генератора с двигателя подробно изложено в статье: «Снятие генератора с двигателя автомобилей ВАЗ 2108, 2109, 21099».

Twokarburators VK — Еще информация по теме в нашей группе ВКонтакте, в Одноклассниках —  Twokarburators OK и в Яндекс Дзен — Twokarburators DZ

Еще статьи по генераторам автомобилей ВАЗ 2108, 2109, 21099

— Подшипники генератора ВАЗ 2108, 2109, 21099

— Неисправности генератора автомобилей ВАЗ 2108, 2109, 21099

— Проверка генератора

— Проверка диодного моста генератора без снятия с двигателя

— Отказал регулятор напряжения

— Проверка статора генератора

Разборка и ремонт генератора своими руками

Может для кого-то покажется диким, но очень часто приходится встречать владельцев ВАЗ 2109-2108, которые при первой же неисправности генератора предпочитают не заниматься его ремонтом, а просто заменить устройство на новое. Есть даже и такие, кто не удосуживается проверить износ щеток, а сразу бежит за новым генератором. На самом деле можно выполнить ремонт, то есть заменить заведомо неисправную деталь на новую и все, устройство будет работать еще сто лет!

Для того, чтобы разобрать генератор на ВАЗ 2109-2108, нам понадобится следующий инструмент:

• ключ рожковый или накидной на 17
• головка на 10 и 7 мм
• трещоточная рукоятка
• отвертка крестовая и плоская

Порядок разборки и замены деталей генератора на ВАЗ 2109-2108

Итак, первым делом необходимо отсоединить проводок от интеграла со щетками и открутить два болтика крепления, которые показаны на фото:

Затем щетки вынимаются без каких либо проблем, так как больше их ничего не держит. После этого нужно постараться открутить гайку шкива, при этом необходимо удерживать сам шкив от проворачивания. Так как подручными средствами блокировать его не просто, можно сначала открутить все гайки крепления задней крышки, как показано на фотографии ниже:

После этого болты становятся свободными и значит их можно слегка выдавить в обратную сторону. Это нужно для того, чтобы они заблокировали шкив, так как они попадут между лопастями. Более наглядно это видно на приведенной ниже картинке:

Теперь гайка откручивается без проблем, и после этого можно вынимать ее, и шкив соответственно тоже:

После чего вынимаем 4 болта, которые соединяют две части генератора:

Затем плоской широкой отверткой пробуем разъединить составные части устройства, наглядно это показано на фото:

Но также стоит извлечь шпонку, так как она не даст снять крышку:

Теперь можно снимать крышку:

Она может сняться либо отдельно, либо же сразу вместе с ротором. Хотя, ротор можно вынуть потом также без труда:

Далее нам остается разъединить обмотку (статор генератора) с диодным мостом (выпрямительным блоком). Для этого откручиваем при помощи головки три гайки крепления контактов обмотки к диодному мосту:

После чего можно без проблем снимать обмотку:

Чтобы извлечь диодный мост, необходимо вытащить болты его крепления с обратной стороны задней крышки, как это наглядно продемонстрировано на фотографии внизу:

И вынимаем его:

Получается, что весь генератор ВАЗ 2109-2108 полностью разобран на составные части, каждую их которых можно заменить при ее выходе из строя. Более подробный материал по диагностике деталей генератора читайте в следующих статьях этого раздела. Сборка происходит в обратной последовательности.

 

Ремонт генератора на ВАЗ 2107 своими руками

Сразу хочу сказать, что досконально все процедуры ремонта данного устройства описывать не буду, но приведу основные, которые довольно часто приходится выполнять владельцам ВАЗ 2107. Начну с необходимого инструмента, который понадобится для ремонта и разборки генератора на «классике»:

1. Ключ на 19 — накидной удобнее
2. Торцевые головки на 8 и 10
3. Удлинитель
4. Молоток

Теперь ниже буду описывать более детально о порядке разборки, а также демонтаж каждой детали разберу отдельно.

Замена щеток на генераторе

На самом деле данный вид ремонта настолько прост, что останавливаться именно в этой статье на этом я не буду. Но если кому нужна подробная информация, то можно ознакомиться с деталями здесь.

Полная разборка на детали

Сначала откручиваем 4 гайки, которые находятся на задней крышке устройства, и на нижнем фото они очень хорошо видны:

Затем пытаемся отвернуть гайку крепления шкива ключом на 19. Обычно, она очень сильно закручена и на снятом генераторе сделать это довольно проблематично, если не зажимать его в тиски. Но есть выход из положения — можно с обратной стороны, где мы выкрутили гайки, надавить на болты, чтобы они уперлись в лопасти крыльчатки, тем самым зафиксировав ее в неподвижном состоянии. Далее, можно попытаться открутить эту гайку, зажав генератор в неподвижном состоянии.

Теперь берем молоток и легкими постукиваниями пробуем разъединить генератор на две части, как это наглядно продемонстрировано на фотографии ниже:

В итоге, должно получиться примерно следующее:

Как видите сами, с одной части будет находиться ротор, а в другой — статор (обмотка).

Снятие и Замена ротора

Снимается он очень просто, сначала отводим шкив, извлекая его с вала:

Затем вынимаем шпонку:

И теперь можно без труда снять ротор генератора ВАЗ 2107, так как он легко освобождается от корпуса:

Теперь можно идти дальше.

Снятие обмотки (статора)

Для этого необходимо отвернуть головкой три гаечки с внутренней стороны, как это представлено на картинке:

И после этого статор без проблем вынимается, так как он отсоединен от диодного моста:

Если он нуждается в замене и снимать его вам нужно полностью, то разумеется, что необходимо будет отсоединить штекер с проводком, который виден на верхнем фото.

О замене диодного моста (выпрямительного блока)

Так как после снятия обмотки, диодный мост практически свободен, то о его замене сказать почти что нечего. Единственное, что нужно сделать, так это надавить на болты с внутренней стороны, чтобы они выскочили снаружи:

И все диодный мост снят полностью и можно производить его замену:

После проведения требуемого ремонт вашего генератора, производим его сборку в обратной последовательности и не забываем подсоединить правильно все провода обмотки.

Как собрать и разобрать генератор ВАЗ?

Генератор любой из моделей автомобилей ВАЗ – это деталь, без которой невозможно функционирование автомобиля. Проверка его состояния в идеале должна производиться систематически каждые 15 000 километров. Если при диагностике этого элемента системы питания автомобиля возникли некоторые замечания, их следует безотлагательно устранить. В этой статье мы расскажем вам, как разобрать генератор автомобиля марки ВАЗ. Проинструктируем, как снять генератор своими усилиями, а также извлечь регулятор напряжения, диодный мост и заменить подшипники.

Что понадобится?

Прежде чем начинать ремонт генераторов любой из моделей автомобилей ВАЗ, их нужно сперва снять, после чего извлечь регулятор напряжения и выпрямительный блок.

Интересно знать! Машины с силовыми агрегатами, работающими на бензине, используют разрежение, которое возникает за дроссельной заслонкой. Дизельные двигатели лишены такой заслонки, вместо неё установлена лопастная вакуумная помпа, которая монтируется на задний конец генератора.

Запчасти

Если вы уже конкретно задались вопросом, как починить некорректно работающий генератор, то для полной его переборки вам необходимо приобрести следующие детали:

— передний и задний подшипники;

— регулятор напряжения генератора;

— диодный мост;

— гайки на 8 – несколько штук;

— реле-регулятор, если оно требует замены.

Инструменты

Чтобы при проведении работ не оказалось, что у вас не хватает инструментов, возьмите следующие:

— наиболее полный набор ключей: как гаечных, так и накидных;

— отвёртки: плоскую и крестовую;

— мультиметр или омметр;

— специальный съёмник подшипников;

— молоток;

— трубчатые правки или накидные головки.

Сборка и разборка

В основном, если генератор уже не подзаряжает аккумуляторную батарею автомобиля или сбоит, то проблема заключается в ремне привода. Поэтому сначала проверьте его натяжение. Если же он в порядке, тогда следует снять генератор, разобрать его и отремонтировать. Покупка нового генератора обойдётся значительно дороже замены некоторых дешёвых его изношенных деталей. Эта процедура не отличается большой сложностью, но достаточно кропотлива. Здесь главное – всё правильно обратно собрать. Итак, как самому отремонтировать вызывающий подозрения генератор ВАЗ? Читайте подробную инструкцию далее.

Знаете ли Вы? Мощность питания возбуждающей обмотки равна двадцатой части номинальной мощности на выходе генератора автомобиля. Ещё столько же затрачивается на вращение ротора и выдачу номинального напряжения на выходе ненагруженного генераторного механизма.

Снятие генератора

Перед снятием генератора отсоедините провод аккумуляторной батареи и возьмите ключи на «10» и на «13». Затем:

1. Открутите крепёжную гайку проводов к выводу «В+» ключом на «10».

2. Снимите провода вывода «В+».

3. Отсоедините провод питания генератора.

4. Снимите генераторный ремень.

5. Отверните болт регулировки и фиксирующую гайку.

6. Демонтируйте натяжную планку генератора.

7. Ослабьте нижнее крепление генератора, используя ключ на «13».

8. Снимите крепёжный болт.

9. Вытаскивайте генератор.

Снятие регулятора напряжения генератора

После того как генератор оказался у вас в руках, нужно проверить и, возможно, заменить регулятор напряжения. Для этого:

1. Отожмите три пружинных фиксатора и снимите кожух, защищающий диодный мост генератора.

2. Открутите крепёжные винты реле-регулятора крестовой отвёрткой.

3. Отсоедините колодку от вывода регулятора напряжения и демонтируйте его.

Интересно! Вокруг статорной обмотки образуется собственное магнитное поле, которое взаимодействует с роторным полем. Это приводит к образованию сопротивления вращению на генераторном валу.

Снятие диодного моста с генератора

Для снятия выпрямительного блока, он же диодный мост, вам понадобится накидной ключ на «8», торцевой ключ на «10» и крестовая отвёртка. Далее:

1. Открутите три болта, соединяющие выводы обмоток статора с выпрямительным блоком, накидным ключом на «8» и болт, который держит диодный мост.

Важно! Обязательно запомните расположение изолирующих и упорных шайб.

2. Отогните по сторонам провода выводов статорной обмотки.

3. Открутите крепёжный винт конденсатора, используя крестовую отвёртку.

4. Снимите диодный мост вместе с конденсатором.

5. Отверните пару гаек контактного болта торцевым ключом на «10».

6. Снимите болта втулки: дистанционную и изолирующую.

7. Выньте болт из диодного моста, а наконечник конденсатора вытащить с контактного болта.

Замена переднего и заднего подшипников генератора

Продолжаем далее ремонт генератора на модели автомобилей ВАЗ. Для снятия подшипников генератора вам будет нужен торцевой ключ на «8», плоская отвертка, головка на «27», большой рожковый ключ и глубокая головка на «19».

Важно! Прежде чем приступить к снятию генераторных крышек: передней и задней, необходимо пометить маркером, как они расположены.

1. Отверните болты торцевым ключом на «8».

2. Плоской отвёрткой раздвиньте генераторные крышки.

3. Отсоедините их друг от друга вместе со статорной обмоткой.

4. Приступайте ко снятию старого переднего подшипника и установке нового.

5. Приложите к нему головку подходящего диаметра и лёгкими ударами молотка выбейте его.

6. Смажьте посадочное место подшипника.

7. Новый элемент устанавливается с помощью изношенного. Приложите его сверху и несильно забивайте подшипник по кругу.

8. Новый передний подшипник генератора установлен.

9. Приступайте ко снятию старого заднего подшипника и установке нового.

10. Если у вас нет специального съёмника, не беда. Можно воспользоваться большим рожковым ключом.

11. Подцепите ним задний подшипник.

12. Легко ударяя молотком по ключу, двигая его по кругу, снимите элемент генератора.

13. Снимите подшипник с роторного вала генератора.

14. Установить новый можно при помощи небольшого отрезка трубы с подходящим диаметром. Слегка ударяя по ней молотком, напрессуйте новый подшипник на роторный вал генератора.

Полезно знать! Чтобы проверить работу реле-регулятора, нужно измерить напряжение на аккумуляторе. Перед запуском двигателя оно составляет 12 В, а после несколько повысится.

Сборка генератора

Сборка генератора должна происходить, естественно, в порядке, обратном разборке, но при этом следует учесть несколько нюансов:

• Каждый подшипник запрессовывается молотком и оправкой подходящего диаметра.

• Крышки генератора обязательно осматривайте на предмет дефектов.

• Крышки нужно соединять исключительно по ранее проставленным меткам.

• Если одна из крышек будет повреждена, то уплотнительное кольцо, находящееся между ними, также следует заменить, ибо на нём тоже могут быть незаметные повреждения в виде разрывов или трещин.

Подписывайтесь на наши ленты в таких социальных сетях как, Facebook, Вконтакте, Instagram, Pinterest, Yandex Zen, Twitter и Telegram: все самые интересные автомобильные события собранные в одном месте.

Устройство генератора Ваз 2107, Ваз 2105, Ваз 2104, ремонт своими руками

ВАЗ

/

2104, 2105, 2107

/

ремонт

/

электрооборудование

/

генератор

Устройство генератора Ваз 2107, Ваз 2105, Ваз 2104, ремонт своими руками

. Разборка и сборка генератора лада 2107 своими руками, снятие и установка щеток на генератор ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107. Диагностика электрооборудования лада 2105. Инструкции по ремонту электрооборудования: системы зажигания, стартера лада 2104. Эксплуатация генератора, аккумулятора, очистителя. Схема лада 2107.

Максимальная сила тока отдачи при 14 В и частоте вращения ротора 5000 мин-1, А…….. 55 (45*) Пределы регулируемого напряжения, В…….. 14,1±0,5 Максимальная частота вращения ротора, мин-1…….. 13000 Передаточное отношение двигатель-генератор…….. 1 : 2,04 * Для генератора Г-222. Генератор 37.3701: а — регулятор напряжения и щеточный узел у генераторов выпуска с 1996 г.; 1 — крышка генератора со стороны контактных колец; 2 — болт

Причина неисправности Метод устранения Стрелка вольтметра находится в красной зоне в начале шкалы 1. Проскальзывание ремня привода генератора 1. Отрегулируйте натяжение ремня 2. Обрыв в цепи питания обмотки возбуждения 2. Восстановите соединения 3. Поврежден регулятор напряжения генератора лада классика 3. Замените регулятор ваз 2105 4. Износ или зависание щеток

Схема соединений для проверки генератора 37.3701 на стенде: 1 — генератор; 2 — контрольная лампа 12 В, 3 Вт; 3 — вольтметр; 4 — амперметр; 5 — реостат; 6 — выключатель; 7 — аккумуляторная батарея Проверка на стенде позволяет определить исправность генератора ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107 и соответствие его характеристик номинальным. У проверяемого генератора щетки должны быть хорошо притерты к контактным кольцам

Осциллограф позволяет по форме кривой выпрямленного напряжения генератора точно и быстро проверить его исправность и определить характер повреждения. Схема соединений для проверки генератора 37.3701 на стенде: 1 — генератор; 2 — контрольная лампа 12 В, 3 Вт; 3 — вольтметр; 4 — амперметр; 5 — реостат; 6 — выключатель; 7 — аккумуляторная батарея Для проверки присоедините к выводу «30» генератора амперметр,

Обмотка возбуждения проверяется после разборки генератора ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107. Но можно проверить ее и не снимая генератор с автомобиля, сняв только регулятор напряжения вместе с щеткодержателем. Зачистив при необходимости шлифовальной шкуркой контактные кольца, омметром или контрольной лампой проверяют, нет ли обрыва в обмотке возбуждения и не замыкается ли она с массой.

Статор проверяется отдельно, после разборки генератора ваз 2105. Выводы его обмотки должны быть отсоединены от диодов выпрямителя. В первую очередь проверьте омметром или с помощью контрольной лампы и аккумуляторной батареи, нет ли обрывов в обмотке статора и не замыкаются ли ее витки на массу. Изоляция проводов обмотки должна быть без следов перегрева, который происходит при коротком замыкании в диодах

Исправный диод пропускает ток только в одном направлении. Неисправный — может либо вообще не пропускать ток (обрыв цепи), или пропускать ток в обоих направлениях (короткое замыкание). В случае повреждения одного из диодов выпрямительного блока необходимо заменять целиком выпрямительный блок лада классика. Схемы для проверки диодов выпрямительного блока: а — проверка одновременно «положительных» и

Короткое замыкание дополнительных диодов можно проверить без снятия и разборки генератора. Также как и для проверки диодов выпрямительного блока, при этом необходимо отсоединить провода от аккумуляторной батареи и генератора ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107 провод от вывода «В» регулятора напряжения. «Плюс» батареи через лампу (1–3 Вт, 12 В) присоедините к выводу «61» генератора, а «минус» — к одному из болтов крепления

Работа регулятора напряжения заключается в непрерывном и автоматическом изменении силы тока возбуждения генератора ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107 таким образом, чтобы напряжение генератора поддерживалось в заданных пределах при изменении частоты вращения и тока нагрузки генератора. Проверка на автомобиле. Для проверки необходимо иметь вольтметр постоянного тока со шкалой до 15–30 В, класса точности не хуже 1,0.

Конденсатор служит для защиты электронного оборудования автомобиля ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107 от импульсов напряжения в системе зажигания, а также для снижения помех радиоприему. Повреждение конденсатора или ослабление его крепления на генераторе ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107 (ухудшение контакта с массой) обнаруживается по увеличению помех радиоприему при работающем двигателе. Ориентировочно исправность

Генератор 37.3701. Очистите и продуйте генератор сжатым воздухом. Застопорьте шкив генератора захватом, входящим в комплект приспособления 67.7823.9504, отверните гайку крепления шкива и съемником спрессуйте шкив. Снимите шпонку и коническую шайбу шкива. В комплект приспособления 67.7823.9504 входит обычный съемник и захват. Последний состоит из двух стальных полуколец, которые вкладывают в ручей шкива. Полукольца

Несоосность отверстий в лапах крышек генератора должна быть не более 0,4 мм. Поэтому при сборке необходимо вставлять в эти отверстия специальный калибр. Он представляет собой ступенчатую цилиндрическую оправку, имеющую с одной стороны диаметр 12 мм, а с другой 22 мм. Коническая пружинная шайба шкива выпуклой стороной должна соприкасаться с гайкой. Гайку шкива затягивайте моментом 38,4–88 Н·м (3,9–9,0 кгс·м). При

Если щетки износились и выступают из щеткодержателя генератора ваз 2107 ваз 2105 меньше, чем на 5 мм, то замените щеткодержатель со щетками. У генератора 37.3701 выпуска до 1996 г. для замены выдвиньте щеткодержатель из корпуса регулятора напряжения ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107, нажав на вывод «В». У генераторов выпуска с 1996 г. с неразборным узлом регулятор–щеткодержатель заменяется щеткодержатель в сборе с регулятором

Чтобы извлечь неисправный подшипник из крышки со стороны привода генератора ваз 2107 ваз 2105, отверните гайки винтов, стягивающих шайбы крепления подшипника, снимите шайбы с винтами и на ручном прессе выпрессуйте подшипник. Если гайки винтов не отворачиваются (концы винтов раскернены), то спилите концы винтов. Устанавливать новый подшипник в крышку генератора ваз 2104, ваз 2105, ваз 2107 можно только в том случае,

Для замены отпаяйте выводы поврежденного диода и аккуратно извлеките его из пластмассового держателя, не допуская резких ударов по выпрямительному блоку. Затем очистите место установки диода от остатков эпоксидной смолы, установите и припаяйте новый диод. Вывод диода с цветной меткой припаивайте к общей шине. После припайки приклейте корпус диода к держателю эпоксидной смолой.

Генератор ВАЗ-2105: устройство, подключение, ремонт

При запуске автомобиля значительная часть электрического тока от АКБ теряется. Для возобновления этой зарядки в конструкции любого автомобиля предусмотрен генератор. Им также оснащается ВАЗ-2105. Что это за элемент? Как он действует? Устройство и работа генератора описаны далее в нашей статье.

Характеристика

Этот элемент представляет собой блок, преобразующий механическую энергию в электричество. Основная функция, которую выполняет генератор ВАЗ-2105, — это заряд аккумуляторной батареи.Устройство работает только при включенном двигателе, когда коленчатый вал вращается. На автомобилях от Авто ВАЗ (2105 не исключение) применяется генератор.

Где

Устройство находится перед двигателем.

Генератор приводится в движение коленчатым валом. Чем выше будет предмет, тем лучше. Ведь при попадании воды в него моментально выходит из строя.

Устройство

Генератор ВАЗ-2105 состоит из множества узлов и деталей. Среди них следует отметить:

• Статор.
• Ротор.
• Выпрямительный блок.
• Щетка в сборе.
• Регулятор напряжения (в простонародье «шоколадный»).
• Ролик ремня генератора.

Все вышеперечисленное помещено в металлический футляр.

Элемент довольно тяжелый и весит не менее одного килограмма.

О роторе

Основная функция этого узла — создание магнитного поля. Вал ротора имеет обмотку возбуждения. Последний размещен в двух половинах полюса, каждая из которых имеет по 6 выступов.Также на валу находятся контактные кольца. Благодаря им возбуждающая обмотка запитана. Дополнительно на валу ротора размещены крыльчатки вентилятора и ведомый ведомый шкив. Подшипник и ролик ремня генератора не требуют обслуживания.

Статор

Этот элемент используется для генерации переменного тока. Статор сочетает в себе обмотку и металлический сердечник. Последний представляет собой набор тарелок. В пазах сердечника используется петлевая или волновая прокладка обмотки.

Кузов

Состоит из двух крышек — задней и передней.

Последний находится сбоку от ведущего шкива коленчатого вала. Обе крышки генератора соединяются несколькими длинными болтами. Материал изготовления — алюминий. Он легко рассеивает тепло и не намагничивается, что очень подходит для работы генератора. Также на корпусе предусмотрены вентиляционные отверстия и «лапки» крепления.

Щетки

Они служат для передачи электрического тока на контактные кольца. Щеточный узел состоит из двух графитовых элементов.Они прижимаются к основанию пружиной. Все эти детали закреплены в корпусе — щеткодержателе. В последних поколениях этот элемент конструктивно совмещен с регулятором напряжения и представляет собой единый неразборный блок.

Блок выпрямителя

Необходимо преобразовать синусоидальные напряжения, генерируемые генератором. Этот блок представляет собой металлическую пластину, на которой крепятся диоды. Они также служат радиатором.

В выпрямительном блоке 6 силовых диодов (по два элемента на каждую фазу).Есть положительный и отрицательный вывод.

Обмотка

Двигатель ВАЗ-2105 с ремнем ГРМ имеет особую конструкцию обмотки. Он подключается через отдельную группу, состоящую из двух диодов. Благодаря этим выпрямителям ток разряда не попадает в аккумулятор при неработающем двигателе. Некоторые автомобилисты видоизменяют конструкцию генератора. Если обмотка подключена в виде «звезды», а к выходу подключены два дополнительных диода, можно повысить КПД элемента на 15-20 процентов.

Регулятор напряжения

Этот элемент служит для поддержания нормального уровня напряжения в бортовой сети. Генератор ВАЗ-2105 оснащен полупроводниковым регулятором напряжения. Благодаря этому аккумулятор не страдает скачками напряжения. Обычно генератор выдает заряд в пределах от 13 до 14,5 вольт. При перезарядке пластины аккумулятора могут быстро закипеть.

Привод

Этот узел работает от ременной передачи. Частота вращения ротора в 3 раза выше частоты вращения двигателя.Чем сильнее вы нажимаете на газ, тем выше выходное напряжение. В классических автомобилях используется клиновой ремень.

Подключение

Для подключения генератора необходимо снять минусовую клемму с аккумулятора. Затем накидным ключом накручиваются два крепежных болта на 17. Они крепят корпус к основанию двигателя. Затем устанавливается приводной ремень. Используйте ролик, чтобы установить его натяжение. Далее подключаем клемму генератора вилками. Вывод идет на аккумулятор через пластину предохранителя.Затем клемма аккумулятора снова подключается и двигатель запускается. Устройство должно вырабатывать электричество и заряжать аккумулятор.

Неисправности и ремонт

Прежде всего отметим, что даже при серьезных неисправностях генератора ВАЗ-2105 можно отремонтировать своими руками. Итак, первая возможная поломка — это межвитковые замыкания, или обрыв якорной обмотки. Симптомы — генератор отказывается вырабатывать ток. На панели приборов горит красная лампа с аккумулятором. Такие короткие замыкания можно определить с помощью омметра, измерив текущее сопротивление.Иногда обрыв выявляется при визуальной диагностике.

После разборки генератора необходимо осмотреть место стыка проводов щеток и контактных пластин, а также пайку выводов катушки к контактным кольцам. Как производится ремонт ВАЗ-2105? Если есть обрыв, его можно устранить обычным паяльником. Но если эта схема «до корпуса», здесь поможет только замена статора или якоря в сборе.

Следующая неисправность связана с выпрямительным блоком.Симптомы — прибор не вырабатывает ток при исправном щеточном узле и при отсутствии обрыва обмотки. В этом случае причиной неисправности являются диодные мосты. В случае обрыва они не будут пропускать ток через себя или проходить в обоих направлениях (что сопровождается коротким замыканием). Полностью заменяется выпрямительный блок. Запчасти на ВАЗ-2105 недорогие. Цена нового диодного моста составит порядка 400-500 рублей.

Неисправность регулятора напряжения

Иногда выходит из строя так называемая «шоколадка».

Как определить неисправность регулятора напряжения? Симптомы — генератор дает заряд с избытком или с недостатком. Батарея часто кипит или совсем не заряжается. На панели приборов горит лампа с аккумулятором. Стоит отметить, что это самая частая поломка.

Сколько стоят такие запчасти на ВАЗ-2105? Цена нового интегрального регулятора — 150 руб. Отметим, что он одинаков для всех классических моделей АвтоВАЗа и даже для Запорожской Таврии.

Как определить, что регулятор сломан? Для этого необходимо завести двигатель ВАЗ-2105 с ремнем ГРМ и на средних оборотах включить все электроприборы: фары, печку, освещение салона. Далее с помощью вольтметра измерьте уровень напряжения на самой батарее, а затем между выходной клеммой и массой генератора. Если показания от 12,5 до 14 вольт, значит, элемент в хорошем состоянии. Если значения слишком высокие или низкие, регулятор напряжения необходимо заменить.

Шум при работе

Если есть характерный шум в районе генератора, это может быть износ подшипников якоря. Чаще всего страдает фасадный элемент, так как на него действуют наибольшие нагрузки. После разборки генератора необходимо внимательно осмотреть состояние отверстий под подшипники. Если его износ превышает зазор между статором и якорем, требуется замена передней крышки генератора.

В противном случае якорь будет касаться полюса статора во время работы.Подшипник подбирается не только по внутреннему и внешнему диаметру, но и по ширине. Например, если это генератор Bosch, можно установить подшипник в передней части якоря от опоры входного вала КПП ГАЗ-24-10. В кузове «Классика» использованы элементы от «Таврии» и «Москвича». Стоит отметить, что на генераторе напряжения ВАЗ-2105 обмотка запитана через контрольную лампу панели приборов. Поэтому при разрыве цепи, если устройство перестает генерировать ток, необходимо «проследить» путь от обмотки до этой лампочки.Рекомендуется использовать мультиметр.

Вывод

Итак, мы выяснили устройство и неисправность генератора на ВАЗ-2105. В большинстве случаев ремонт можно сделать своими руками. А стоимость запчастей к генератору редко превышает отметку в тысячу рублей. Одна из самых дорогих деталей — диодный мост. Кстати, он сочетается с другими моделями Classic.

Генератор ВАЗ-2115: неисправности и способы их устранения

Проблемы с генератором ВАЗ-2115 бывают редко, без этого узла машина может работать недолго.Но для этого необходимо снизить мощность потребителей — выключить свет, магнитофон и т. Д. Перед тем, как грешить на генератор, обязательно убедитесь, что система электроснабжения полностью исправна. Ведь причиной того, что не работает приборка или сенсорная система, может быть обрыв провода.

Не горит индикатор на приборке

Независимо от того, какой именно генератор ВАЗ-2115 использует на автомобиле, симптомы поломки будут одинаковыми. Если лампа зажигания не загорается при включении зажигания, возможны следующие неисправности:

1. Лампа перегорела.Снимите приборную панель и замените лампочку на аналогичную.
2. Произошло окисление контактных колец на роторе. Вам потребуется полностью разобрать генератор ВАЗ-2115 и почистить контактные кольца или заменить.
3. Обрыв цепи питания обмотки возбуждения. Прозвонить все провода, заменить предохранитель.
4. Сильный износ щеток или поломка регулятора напряжения.
5. Иногда случаются пробои полупроводниковых диодов. Лучший способ ремонта — замена выпрямительного моста.

Индикатор горит постоянно, если регулятор напряжения неисправен. Если он неисправен, лучше заменить его полностью — его стоимость невысока (около 200-300 рублей).

Шум при работе генератора

Если во время работы двигателя слышны другие звуки со стороны генератора, это может быть вызвано следующими неисправностями:

1. Короткое замыкание полупроводниковых диодов. Вам потребуется полностью заменить выпрямительный блок.
2. Замыкание обмотки статора на корпус.Перематывать бесполезно, дома это утомительно и сложно. А если заказать перемотку в мастерской, то эта услуга будет стоить дороже, чем все затраты на сборку генератора ВАЗ-2115.
3. Выход из строя подшипника — частая поломка генераторов.

Самая распространенная «болезнь» — это разрушение подшипника в передней крышке. Чтобы его сменить, придется полностью разобрать генератор. Для увеличения срока службы подшипника достаточно соблюсти одно требование — не перетягивать ремень.Именно из-за чрезмерного натяжения увеличивается нагрузка на подшипник и переднюю крышку.

Как диагностировать?

Вы можете самостоятельно провести поверку с помощью мультиметра. Для этого проделаем несколько простых манипуляций:

1. Запустите двигатель и дайте ему прогреться до 90 градусов.
2. Включаешь все, что можно — вентилятор печки и радиатор, магнитолу, дальний свет, обогрев заднего стекла, сидений. Другими словами, нужно максимально увеличить нагрузку по электрике.
3. Установить мультиметр в режим измерения напряжения, предел 20 вольт. Лучше всего использовать измерительный прибор с растянутой шкалой.
4. Установить частоту вращения двигателя 3200 об / мин.
5. Проверить напряжение на выводах аккумуляторной батареи. Оно должно быть выше 13 В.
6. Если натяжение слишком мало, то ищите неисправность ремня — увеличивайте его натяжение. Регулятор напряжения может работать некорректно. Проверить его функционирование, при необходимости заменить.

После того, как необходимо отключить питание всех потребителей, повторно измерить напряжение.Он должен быть на уровне 14,2. 14,7 В, не больше и не меньше. Только в этом случае можно судить о нормальной работе генератора ВАЗ-2115.

Демонтаж генератора

Для замены щеток генератора ВАЗ-2115 снимать весь блок не нужно — все можно сделать просто отверткой, обесточив электрику целиком. Но если вы хотите заменить диодный мост или подшипники, генератор необходимо снять. Алгоритм следующий:

1. Отсоедините отрицательную клемму аккумулятора, таким образом обесточив автомобиль.
2. Открутите гайку с болта «30» контакта, снимите с него шнур питания.
3. Откручиваем винт крепления натяжителя ремня.
4. Открутите два винта крепления натяжной рамы.
5. Предварительно обработайте все резьбовые соединения проникающей смазкой типа WD-40.
6. Полностью отвинтите верхнее и нижнее крепление. Снимите шпильку снизу.

После того, как можно будет полностью снять генератор, приступить к его ремонту.

Разборка

Выкрутите болты крепления крышек генератора ВАЗ-2115.После этого аккуратно откручиваем болты крепления фазной обмотки и конденсатора к задней крышке блока. При необходимости конденсатор отключают от выпрямителя. После этого не забываем про четыре болта, снимаем заднюю крышку вместе с ротором и статором.

Ротор зажимается в тисках и полностью разбирается путем откручивания гаек, демонтажа шкива. Обязательно поменять все вышедшие из строя элементы — подшипники, конденсатор, диодный мост генератора ВАЗ-2115, щетки и регулятор напряжения.После замены неисправных комплектующих собирают весь блок в обратном порядке.

Натяжение ремня

Убедитесь, что ремень генератора ВАЗ-2115 установлен правильно. Если при включении света появляется свист, это свидетельствует о недостаточном натяжении.

Чтобы избавиться от этой неисправности, необходимо выполнить следующие действия:

1. Открутите гайку, которая крепит генератор к верхней направляющей, ключом на «17».
2. Проложите установочный нож между корпусом генератора и блоком двигателя.
3. Потяните лезвие к радиатору, увеличивая натяжение.
4. Затяните гайку после натяжения ремня.

Если натяжение ремня недостаточное, то при работающем двигателе контрольная лампа заряда на панели приборов будет светиться слабо. Еще бывает, что лампа загорается, потом гаснет. Проверить проводку, щетки и регулятор напряжения.

Неисправности генератора и их устранение ВАЗ 2114

Довольно часто автомобилисты задаются вопросом, как снять генератор на ВАЗ 2114 и 2115.Ведь это устройство имеет свойство выходить из строя в самый неподходящий момент. Не секрет, что с неработающим генератором далеко не уедешь. Батарея разряжается довольно быстро, что опять же не пойдет ему на пользу. Поэтому следует немедленно удалить этот узел при первых признаках неисправности. Потом можно поставить новую, либо отремонтировать старую. В большинстве случаев лучшим вариантом является ремонт генератора, это можно сделать самостоятельно. Только нужно выявить причину поломки.

Как снять генератор на ВАЗ 2114 и 2115? Обычно спрашивают людей, у которых есть явные проблемы с этой деталью. Обычно на генераторное устройство обращают внимание, если аккумулятор плохо заряжен. Как правило, водитель замечает лампочку на панели. Это позволяет быстро устранить проблему. Но иногда проблема проявляется в неожиданном разряде батареи. При этом лампа совершенно не реагирует на пониженное напряжение в сети. В этом случае обязательно проверьте работоспособность АКБ, возможно с генератором все в порядке.

Для проверки не нужно проводить эксперименты со снятием клемм на работающем генераторе. В этом случае произойдет скачок напряжения, который выведет из строя электронику автомобиля. Поэтому для тестирования вооружитесь обычным мультиметром. Тест проводится в режиме измерения напряжения. Двигатель заводится, затем дает ему прогреться в течение нескольких минут. Это позволит нормализовать напряжение. После этого доводим обороты двигателя до 3000, и включаем все электроприборы: печку, подогрев стекол, дальний свет.

Измерьте напряжение на клеммах аккумулятора в этом состоянии. Прибор не должен показывать ниже 13,2 В. Если показания меньше, то в генераторе однозначно поломка. Хотя иногда причина неисправности в окислении контактов на аккуме. После очистки проверьте еще раз. Проверить реле-регулятор можно следующим образом: сначала измеряется напряжение под нагрузкой. После этого все устройства выключаются. И еще раз сделаем замеры. С обычным регулятором показания не изменятся, или изменятся в пределах 0.1 В. Если прибор показывает повышение напряжения, то скорее всего проблема в реле.

Взлет

Перед работой поставить машину на ручной тормоз, подложить под задние колеса колодки. Изъятие производите в следующем порядке:

• Снимите клемму с АКБ, это нужно делать при всех работах с электронными системами автомобиля;
• Автомобиль приподнят, правое колесо снято;
• Отвинтить брызговик;
• С генератора снимаем соединительную колодку D;
• После этого ключом откручиваем провод от 10 пина В ++.Провода удалены;
• Ослаблен регулировочный винт генератора. Ремень снят. Полностью открутите. Демонтировать натяжную планку;
• Головкой на 17 откручиваем 3 винта крепления кронштейна генератора к блоку цилиндров;
• Генератор снят;
• Снимают скобу, для этого откручивают гайку, это делается ключом на 13. Винт снимается.

Разборка

После снятия можно переходить к ремонту.Для этого необходимо разобрать генератор, это делается следующим образом:

• Отсоедините фиксаторы, фиксирующие крышку, и снимите ее;
• Крестовой отверткой откручиваем 2 винта крепления регулятора напряжения;
• Блок проводов отключается от регулятора и окончательно снимается с генератора;
• Гаечным ключом на 10 скручиваем гайку, фиксирующую провод конденсатора. Далее откручиваем винт крепления самого конденсатора;
• Снимите диодный мост.Для этого отверткой с крестообразным шлицем открутите крепежный винт блока. Далее откручиваем несколько винтов, удерживающих выводы обмотки. На винтах есть изолирующие шайбы;
• Вытаскиваем пины обмотки, и снимаем диодный блок;
• Удерживая головку газовым ключом от проворачивания, открутить шкив шестигранником;
• Крестовой отверткой откручиваем 4 винта крепления крышки;
• Отметьте положение крышек относительно друг друга.Разделите обе половинки;
• Снимите статор;
• Зажмите крышку с ротором в тисках. Выколтокой выбейте его;
• Осталось только снять подшипник съемником.

Современные автомобили имеют много основного и дополнительного оборудования, для работы которого требуется электрический ток. Источником такого тока в автомобиле является аккумулятор, а для его зарядки при работающем двигателе встроена генераторная установка.

Что такое генератор

Может быть представлена ​​как электрическая машина трехфазного переменного тока.Он имеет встроенный выпрямительный блок, преобразующий переменный ток в постоянный. Устройство состоит из следующих частей:

1. Передняя и задняя крышка из алюминиевого сплава. В каждом из них есть гнезда для установки подшипников. На корпусе задней крышки находится клеммный разъем для подачи напряжения на обмотку возбуждения. Также на задней крышке есть конденсатор, подавляющий радиопомехи, есть место для установки и фиксации щеточного узла;
2. Цилиндр сердечника статора, набранный из трансформаторного железа.Внутри него есть пазы для прокладки силовых обмоток генератора. У них есть провода для подключения к выпрямительному блоку. К статору четырьмя болтами притягиваются обе крышки;
3. Обмотка возбуждения на валу ротора. Он соединяет свои выводы с контактными кольцами из меди, которые установлены на этом же валу. На передней части вала имеется шпоночная канавка для крепления ведущего шкива;
4. Щетки генератора представляют собой неразборный блок, совмещенный с электронным релейным контроллером.металлический корпус, приклепанный к щеткодержателю;
5. Блок питания и вспомогательных диодов крепится к задней крышке изнутри. Он состоит из шести силовых и трех дополнительных диодов. Для охлаждения полупроводниковых приборов они устанавливаются на подковообразные пластины из алюминиевого сплава.

Некоторые технические характеристики

Генераторная установка обеспечивает следующие параметры:

• Обмотка возбуждения запитана регулируемым напряжением от 13 В.От 2 В до 14,7 В;
• Ток, создаваемый генератором напряжения, составляет 80 А;
• Прогиб ремня не должен превышать 8 мм при нагрузке 10 кг.

Генератор устанавливается на двигатель с левой стороны по направлению к автомобилю. Вращение ротора правое, которое он получает с помощью приводного ремня от коленчатого вала мотора.

Поломка генератора

Можно разделить на «механический» и «электрический». Давайте рассмотрим их именно в таком порядке.

Неисправность из разряда «механическая»

Косвенным подтверждением наличия такой поломки является повышенный уровень шума генераторной установки во время. В других случаях он может «шуметь», но об этом мы поговорим позже. Источники повышенного шума в большинстве случаев изношены. В первую очередь это касается подшипника в передней крышке генератора. Он испытывает повышенные радиальные нагрузки, поэтому может быстрее выйти из строя. . Избыточное натяжение приводного ремня увеличивает нагрузку на подшипник.

Неисправности из категории «электрические»

Их может быть несколько:

• Нет напряжения заряда аккумулятора;
• Генератор выдает низкое напряжение;
• Повышенное напряжение заряда.

Генераторную установку можно удерживать, не снимая ее с машины. Для этого вам понадобится измерительный прибор, например тестер, мультиметр или вольтметр постоянного тока. Подойдет даже простой китайский тестер. Измерив напряжение на выводах АКБ, можно сделать определенный вывод о работоспособности генератора.

Метод проверки генератора, при котором положительный полюс снимается с аккумуляторной батареи, нельзя использовать, чтобы избежать отказа электронного контроллера реле или другой электроники автомобиля. Более конкретные способы проверить чуть позже. Теперь вспомним, как снять генератор ВАЗ 2114 для его дальнейшей проверки.

Как снять генератор с автомобиля

Устанавливается в специальном кронштейне на блоке цилиндров, также есть планка для натяжения ремня генератора.Найдите генератор в передней части моторного отсека с правой стороны по направлению к машине. Для снятия необходимо подготовить следующие инструменты:

1. Ключ на «10»;
2. Такой же ключ на «13»
3. Рожковый ключ 17х19;
4. Головка на «15»
5. Крепление

Снятие производится несколькими способами, где нужно снять защиту двигателя. Они хорошо описаны в различных источниках. Попробуем снять, не снимая защиты.Порядок действий следующий:

1. Первым делом нужно отсоединить клеммы аккумулятора;
2. Ослабьте натяжение ремня, сначала снимите ремень, а затем весь механизм натяжения;
3. аккумулятор, они закрыты резиновой крышкой, а также разъем для подачи напряжения на обмотку возбуждения;
4. Генератор на кронштейне крепится на длинный болт с гайкой. Добывать его не очень удобно, поэтому головкой на «15» откручиваем два болта крепления кронштейна к агрегату.Они находятся за генератором, один болт длинный, а другой короче. Теперь генератор можно будет повернуть по часовой стрелке и можно будет снять ось его крепления к кронштейну;
5. Поверните ключ на «19» гайки и снимите его вместе с распорной втулкой;

Небольшой пробойник или что-то подобное выбивает ось кронштейна. Генератор включен. Теперь есть возможность провести ремонт или обслуживание генератора.

Как разобрать генераторы ВАЗ 2114

Для выполнения работ вам понадобится рожок для ключей на «10», «19» и крестовая отвертка.

Разборка генератора ВАЗ 2114 проводится в такой последовательности:

1. Нажмите на три защелки и снимите пластиковую защитную крышку на корпусе;
2. Отметьте взаимное расположение крышек и статора, чтобы облегчить последующую сборку;
3. Отверткой отверните винты крепления щеточного блока, снимите его с корпуса;
4. Отсоедините провода от выхода регулятора;
5. Выверните четыре винта крепления выпрямительного блока, отсоедините выводы обмоток и снимите его вместе с помехоподавляющим конденсатором;
6. Выверните четыре зажимных винта, которые затягиваются при сборке с большим усилием, и снимите крышку со стороны контактных колец генератора;
7. Вал ротора зажат в тисках, чтобы он не проворачивался, и гайка крепления шкива откручивается.Теперь вы можете снять шкив генератора и упорную шайбу с вала ротора;
8. Снимите крышку с ротора генератора.

Затем вы можете внимательно осмотреть все детали на предмет износа или повреждений.

Симптомы генераторной установки

Неисправности щеток

На этом сайте могут быть проблемы с электронным регулятором и щетками. Замену щеток генератора можно произвести, не снимая его с двигателя. Проверить этот блок, не снимая с генератора, невозможно, поэтому, если есть такая возможность, можно просто поменять щетки.Проверить его работу можно, есть регулируемый источник питания и контрольная лампочка. Подключите питание к регулятору «+» и «-», а лампочку — к щетке. Он должен светиться, а если увеличить входное напряжение до 15-16 вольт, свет погаснет. Если этого не произошло, то вам нужен планшет на замену. Давайте посмотрим на признаки износа кисти. Это укажет:

• Напряжение на стороне низкого напряжения;
• Отсутствие зарядки аккумулятора;
• Зарядка скачков напряжения.

Кисти в свободном состоянии должны иметь длину не менее 0.5 см. На меньшей длине производится их полная замена. щетки и их свободное движение в пазах. Если есть зависание, его можно убрать каплей масла в слоты. Проверить контактные кольца, их поверхность на наличие выемки. Если он присутствует, необходимо отшлифовать поверхность колец мелкой наждачной бумагой. При замене щеток генератора ВАЗ 2114, то работоспособность восстановится через несколько минут после протирания щеток и контактных колец.

Диодный мост и его проблемы

Признаки неисправности диодного моста генератора могут быть следующими:

1. Полное отсутствие зарядки;
2. Напряжение зарядки намного выше нормального.

Все это может вызвать большие негативные последствия для всей электросистемы автомобиля. руками можно, но при наличии опыта и инструментов для работы с электрооборудованием. Например, выявлены признаки поломки диодного моста, и требуется его ремонт.

Чаще всего в этом случае происходит пробой силовых подковообразных диодов. Заменить их не очень сложно, проблема в том, что их нет в запчастях. Вы можете искать мастеров, занимающихся ремонтом электрооборудования автомобилей.Проще и дешевле будет приобрести новый блок с диодным мостом, а взамен вышедшего из строя установить его. Замена диодного моста производится в такой последовательности:

.

• Вмонтирован в блок контактный болт с изолирующими втулками и гайками его зажима;
• Выпрямить и поставить на место выводы обмоток статора и затянуть гайки в местах их соединения;
• Установите на место болты, которыми крепится выпрямительный блок, и затяните их;
• На его место устанавливают щеточный блок с регулятором, и закрепляют его винтами на корпусе задней крышки;
• Установить защитный кожух из пластика, фиксируемый тремя защелками.

После этого устройство можно установить на место установки, подключить провода, надеть и натянуть приводной ремень, а также проверить его работу.

О замене генераторной установки на автомобиле

Так получилось, что нужна замена генератора ВАЗ. Куплена необходимая запчасть. Кстати, некоторые автолюбители заменяют исправные узлы на более мощные установки. Причины этого могут быть самыми разными.В основном это установка новых, дополнительных потребителей электроэнергии. Мощные аудиосистемы, хорошие фары, подсветка приборной панели и прочие подобные «штуки» требуют увеличения мощности генераторной установки.

В таких случаях обычно приобретают и устанавливают генератор от Приоры или Калины. Его генерируемый ток составляет примерно 115 А, в то время как штатное устройство выдает 80 А. Его установка аналогична стандартной, необходимо только заменить шкив приводного ремня. Дело не очень сложное, с ним справятся даже неопытные водители.

Необходимый инструмент для замены генераторов:

• Ключи на «10», «13»;
• Гаечный ключ 17×19;
• Набор отверток;
• Крепление

Работы по замене начинаются только после отключения АКБ.

Если работы производятся в гараже со смотровой ямой, то можно порекомендовать следующий порядок действий:

1. Отсоединить защиту двигателя. Вы можете освободить его только в районе генераторной установки и оставить в подвешенном состоянии;
2. Ключом на «10» скрутить гайку на выступающем контактном болте генератора и снять с нее провода.Также отсоедините разъем от щеточного блока;
3. Откручиваем болт натяжителя, болт его крепления к блоку цилиндров и снимаем с двигателя;
4. Теперь откручиваем гайку оси кронштейна крепления генератора. Это действие выполняется ключом на «19», снимается гайка с дистанционной шайбой и ось выбивается из кронштейна.

Генератор можно вынуть из моторного отсека и на его место установить новый. Установка производится в обратной последовательности.Подсоедините ранее отсоединенные провода и разъемы, поставьте на место приводной ремень. После этого его можно опробовать в работе. Перед тем как запустить двигатель на тестирование, несколько слов о том, как его правильно. Этот процесс несколько отличается для двигателей разного объема. При объеме 1,5 литра натяжение ремня осуществляется за счет отвода корпуса генератора от блока цилиндров с креплением. При объеме 1,6 литра натяните ремень винтом-натяжителем.

Береги свою машину!

Основными источниками электроэнергии в автомобиле являются аккумуляторная батарея и генераторная установка.В статье рассматривается генератор ВАЗ 2114: устройство, возможные неисправности, методы их устранения, даются инструкции по снятию, прилагаются фото и видео материалы.

Как работает генератор?

Генератор на ВАЗ 2114 — трехфазный аппарат. Его задача — преобразовывать переменный ток в постоянный.

Конструкция агрегата состоит из следующих элементов:

1. Передняя и задняя алюминиевые крышки, на каждой из которых установлены подшипники.Задняя крышка снабжена выводом для подключения питания от аккумулятора и разъемом для подачи тока на обмотку возбуждения. Кроме того, на задней крышке установлен конденсатор для подавления радиопомех, а также прикреплен щеточный узел.
2. Статор Основной цилиндр представляет собой набор пластин, изготовленных из специальной трансформаторной стали. Обмотки генератора устанавливаются в пазы статора, которые имеют выводы для подключения к диодному мосту. Обе крышки крепятся к статору с помощью 4-х болтов.
3. Ротор. Выводы его обмотки возбуждения, расположенной на валу, соединены с контактными кольцами, расположенными на этом же валу. Впереди ротора имеется шпоночная канавка, в которой крепится шкив привода генератора ВАЗ 2114.
4. На ВАЗ 2114 трехступенчатый регулятор напряжения, совмещенный со щеточным узлом, является неразъемным устройством. Реле-регулятор находится в металлическом корпусе. Щетки передают напряжение от регулятора к обмотке ротора.
5. С внутренней стороны задней крышки прикреплен диодный блок с девятью диодами.Из них шесть основных и три дополнительных. Чтобы полупроводники достаточно охлаждались, их кладут на алюминиевую пластину в виде подковы.

Генератор ВАЗ 2114 — устройство

Работа генераторной установки осуществляется за счет того, что в обмотке статора возникает электродвижущая сила, которая создается за счет вращения магнитного поля ротора.

Технические характеристики генераторного аппарата:

• для обмотки возбуждения, требуется регулируемое напряжение, в пределах 13.От 2 до 14,7 В;
генератор
• вырабатывает ток 80 А;
• при нагрузке 10 кг прогиб приводного ремня не должен превышать 8 мм.

Генераторная установка находится с левой стороны двигателя. Установлен ротор с правосторонним вращением, что происходит за счет ременной передачи от коленчатого вала двигателя.

Возможные неисправности: признаки и причины

Генераторная установка является электромеханическим устройством. Следовательно, есть два типа неисправностей: механические и электрические.

Признаком появления механических неисправностей является повышенный шум, слышимый при работе генератора. Причина шума — разрушение запрессованного в крышку подшипника. Он постоянно испытывает большие радиальные нагрузки, поэтому имеет небольшой срок службы.

Чрезмерно натянутый ВАЗ 2114 сокращает срок его службы. Поэтому необходимо следить за его напряжением и состоянием. Генератор не будет работать при обрыве ремня.

Признаками неисправности в электрической цепи являются:

• генератор не заряжает аккумулятор;
• слишком низкое напряжение зарядки;
• слишком высокое напряжение зарядки;
• Агрегат нагревается.

Определить неисправность можно мультиметром. О недостаточном заряде можно судить по слабо горящим фарам и медленно работающим дворникам, а также по контрольной лампе, которая мигает или горит постоянно. Если заряд слишком большой, значит в АКБ закипает электролит, а фары светят слишком ярко.

Диагностика узла

Генерация недостаточного заряда генераторной установкой приводит к тому, что входящего напряжения недостаточно для питания всего электрооборудования.В этом случае на помощь приходит аккумулятор. В результате его можно полностью разрядить. Слишком высокое напряжение еще более опасно для бортовой сети, из-за него могут перегореть предохранители, а компоненты электрической сети — сгореть.

Зная, какое напряжение должен выдавать генератор ВАЗ 2114, можно произвести его диагностику для поиска неисправности (видео Ильдара Латыпова).

Диагностика выполняется с помощью мультиметра, установленного в режим измерения напряжения.

Проверка генератора ВАЗ 2114 состоит из последовательности действий:

1. Для начала необходимо включить зажигание и запустить двигатель.
2. Если есть повреждение в цепи обмотки ротора, то на панели приборов будет постоянно гореть контрольная лампа.
3. Блок питания должен быть нагрет примерно до 90 градусов. Частота вращения коленчатого вала должна быть около 2500-3000 об / мин.
4. Затем следует включить ближний свет и магнитолу.
5. Теперь нужно измерить напряжение, которое поступает на выводы аккумуляторной батареи. Оно должно быть около 13 В.
6. Выключив магнитолу и потушив ближний свет, снова измерить напряжение.Оно должно возрасти до 14,7 В.

Во время диагностики послушайте ротор. Если подшипник в передней крышке разрушен, будет слышен шум.

Падение напряжения возможно по следующим причинам:

• ослабить натяжение ремня генератора;
• износ щетки;
• неисправность реле-регулятора;
• износ всей генераторной установки.

Если генераторная установка полностью изношена, ее необходимо полностью заменить.Перед тем, как менять генератор на ВАЗ 2114, следует провести его диагностику. В противном случае причина может быть в обрыве ремня.

Сборка Руководство по демонтажу

Если подшипник разрушен, это необходимо, а для этого необходимо его демонтировать. Генераторная установка крепится к блоку двигателя на специальном кронштейне. Также есть ремешок для регулировки натяжения ремня.

Для снятия генераторной установки на ВАЗ 2114 необходимо запастись следующими инструментами:

• набор гаечных ключей, желательно как колпачковый, так и рожковый;
• торцовая головка на «15»;
• крепление или кусок металлической трубы.

Возможные варианты демонтажа генераторной установки со снятием защиты силового агрегата и без. Рассмотрим вариант без демонтажа защиты. Перед снятием генераторной установки необходимо отключить отрицательную клемму на аккумуляторной батарее, чтобы избежать короткого замыкания.

Процедура состоит из шагов:

1. Сначала используйте ключ на «17», чтобы ослабить натяжение ремня генератора. Для этого откручиваем сверху крепежную гайку и перемещаем агрегат к блоку цилиндров.
2. Далее на болте шпильки «31» необходимо открутить гайку и отсоединить шнур питания, идущий к обмотке возбуждения ротора.
3. Снизу генератор крепится гайкой и длинным болтом, их нужно открутить.
4. Чтобы легче достать генератор, нужно открутить штангу, с помощью которой узел крепится к блоку двигателя. Для этого откручиваем два болта.
5. Также аккуратно откручиваем гайку крепления планки к стартеру.Если застежка застряла, можно использовать проникающую смазку, позволяющую удалить ржавчину и грязь.
6. Чтобы снять ось генератора с кронштейна, лучше повернуть ее по часовой стрелке.
7. Далее используйте ключ на «19», чтобы отвинтить гайку и снимите его и распорную втулку.
8. Теперь узел генератора можно снять вверх.

В случае демонтажа генератора через днище необходимо снять защиту.

Как устранить неисправность генератора четырнадцатой модели ВАЗ?

Устранение неисправностей зависит от причин, их вызвавших:

1. Если предохранитель перегорел, его необходимо заменить.Все предохранители находятся в монтажном блоке. Перегоревший предохранитель указывает на неисправность в цепи. Его нужно проверить, найти точную причину и устранить.
2. При отсутствии питания проверить надежность минусовых проводов.
3. Если есть проблемы в замке зажигания, нужно проверить контактную группу. Если замок не подлежит восстановлению, его следует полностью заменить.
4. Для определения проблем, возникающих в цепи питания обмотки ротора, предназначена контрольная лампочка.Если он перегорел, его нужно заменить.
5. Замена щеток генератора производится вместе с реле регулятора напряжения. Отдельно регулятор не ремонтируется.
6. Не заряжает генератор из-за обрыва приводного ремня, установлен новый расходник. В то же время размер ремня должен быть достаточным, чтобы натяжение было достаточным. Замена ремня генератора ВАЗ 2114 8 и 16 аналогичен.
7. Если низкое напряжение бортовой сети автомобиля вызвано слабым натяжением ремня, натяжение необходимо отрегулировать.
8. Если вы слышите гул и треск в передней крышке генератора, подшипник заменяется, так как он чаще всего является причиной шума.

Фотогалерея

1. Сборка генераторной установки 2. Разборка сборки 3. Диодный мост 4. Щеточный узел

Заключение

Ремонт генератора ВАЗ 2114 зависит от обнаруженных неисправностей. Зная, как проверить генератор, можно обнаружить его неисправности. Некоторые из них даже не требуют снятия генератора.Например, генератор дает слабый заряд или не дает зарядку — причины слабого натяжения или обрыва приводного ремня.

При разрушении подшипников узел необходимо почти полностью разобрать. При замене диодного моста требуется разборка генератора.

Важно установить точную причину неисправности, чтобы восстановить работоспособность генераторной установки.

В данном видео показано, как демонтировать генераторную установку ВАЗ 2114 без снятия защиты с мотора (видео от fedot580).

Генератор ВАЗ-2107: снятие, установка и ремонт

Для зарядки аккумулятора при работающем двигателе Автомобиль снабжен генератором. Автомобилисты часто сталкиваются с тем, что этот механизм не обеспечивает должного заряда аккумулятора во время движения. Если оставить все как есть, аккумулятор может сесть, и придется вызывать эвакуатор и ехать на СТО. Но этого можно избежать, если вовремя провести проверку и при необходимости заменить элементы этого устройства.

Снятие ремня генератора и проверка натяжения

Иногда причиной слабого заряда во время езды может быть недостаточное натяжение ремня генератора. К счастью, эта проблема легко решается. Для этого достаточно просто подтянуть ремень или при наличии видимых дефектов (трещины, износ поверхности) просто поменять его на новый. Для установки нового необходимо ослабить гайку крепления генератора и попытаться сдвинуть его с помощью крепления или чего-то еще ближе к двигателю.

Если мы имеем дело с карбюраторным двигателем, то на этом наши манипуляции закончены — и можно снять ремешок. Если речь идет о том, как поменять генератор (инжектор) ВАЗ-2107, то нужно снять датчик положения коленвала.

После этого устанавливаем заранее подготовленную ленту. Одевается без напряжения. И после того, как ремень сядет на все шкивы, произведите его натяжение. Для этого необходимо ослабить гайку на монтажной пластине и смонтировать генератор в движении, регулируя тем самым степень натяжения.По окончании работы затяните гайку и произведите проверку.

Генератор ВАЗ-2107: ремонт

Перед тем, как отремонтировать данное устройство, вы должны понять, в чем все-таки причина неисправности. Но сразу хочу отметить, что мало кто знает, сколько стоит генератор для ВАЗ-2107, а его стоимость ни много ни мало 2200-2500 рублей. Поэтому, если он вышел из строя, не стоит сразу бежать в магазин и покупать новый, ведь в большинстве случаев старое устройство можно отремонтировать.К специалистам обратиться проще, но самому сделать вполне реально.

Для снятия устройства нужно поставить каретку на яму, снять защитный щит двигателя, после чего открутить гайки, кронштейны, снять ремень и сам генератор. Для проверки нам понадобится омметр. Плюс омметр подключаем к выводу «30» генератора, а минус — непосредственно к корпусу генератора. Если на дисплее отображается значение «0», то диоды вышли из строя или обмотка замкнута.

Чтобы узнать, какой из диодов вышел из строя, сначала проверяем омметром положительный, затем отрицательный. После этого вы можете их заменить. При отсутствии неисправностей сопротивление должно быть в пределах 4,3-4,8 Ом. Часто виной тому щеткодержатель, у которого щетки в нейтральном положении не выступают на 5 мм.

Несколько советов автомобилистам

Если во время езды свистит генератор ВАЗ-2107, значит, натяжение ремня ниже положенного. Это чревато его проскальзыванием и недостаточным зарядом.Но чрезмерное натяжение может привести к разрыву ремня, что тоже нехорошо.

Если вы обнаружили неисправность одного из диодов, то в этом случае необходимо заменить выпрямительный блок. Неисправный статор или ротор также подлежат немедленной замене.

В случае, если и положительный, и отрицательный диоды в порядке, но генератор не работает, рекомендуется выполнить тест замыкания обмотки. Для этого подключите омметр к корпусу и кольцу ротора. Если значение на циферблате прибора близко к нулю, значит произошло короткое замыкание.

Также при выполнении работ желательно очищать генератор ВАЗ-2107 от пыли и грязи. Вы можете сделать это с помощью сжатого воздуха. Металлические детали необходимо периодически смазывать, можно керосином. Подшипники желательно не смазывать.

изучает влияние высокого гидростатического давления на иммунное распознавание антигенов

Abstract

Парвовирус свиней (PPV) — это ДНК-вирус, который вызывает репродуктивную недостаточность у свинок и свиноматок, что приводит к гибели эмбрионов и плода во всем мире.Картирование эпитопов PPV важно для разработки новых вакцин. В этом исследовании мы использовали анализ точечного синтеза для картирования эпитопов капсидных белков PPV (штамм NADL-2) и коррелировали результаты с прогностическими данными иммуноинформатики. Перед инокуляцией свиней вирус подвергали трем условиям: нативному (необработанному), высокому гидростатическому давлению (350 МПа в течение 1 ч) при комнатной температуре и высокому гидростатическому давлению (350 МПа в течение 1 ч) при -18 ° C, и по сравнению с коммерческой вакциной, произведенной с использованием инактивированной PPV.Скрининг образцов сыворотки выявил 44 положительных пятна, соответствующих 20 антигенным сайтам. Каждый тип инокулированного антигена вызывал отдельный набор эпитопов. In silico предсказание обнаружило линейные и прерывистые эпитопы в В-клетках, которые совпадали с несколькими эпитопами, обнаруженными при точечном синтезе сывороток свиней, получавших различные препараты инокулята. В испытанных условиях вырабатывались антитела против антигена VP1 / VP2, которые различались по времени ответа и профилю структурно доступных областей, которые были распознаны.

Электронные дополнительные материалы

Онлайн-версия этой статьи (10.1186 / s12985-019-1165-1) содержит дополнительные материалы, которые доступны авторизованным пользователям.

Ключевые слова: Картирование эпитопов, прогнозирование эпитопов, парвовирус свиней, точечный синтез

Введение

Парвовирус свиней (PPV) или протопарвовирус 1 копытных животных, предложенный Cotmore et al. [1], представляет собой икосаэдрический вирус диаметром 25 нм без оболочки, который содержит ~ 5 т.п.н. одноцепочечной ДНК с отрицательным смыслом (оцДНК) с двумя большими открытыми рамками считывания (ORF) в его геноме.ORF1 кодирует неструктурные белки NS1, NS2 и NS3, а ORF2 кодирует структурные белки VP1, VP2 и VP3 [2]. Капсидные белки VP1 и VP2 являются результатом альтернативного сплайсинга одного и того же гена, а VP3 образуется в результате протеолитического расщепления VP2. Эти структурные белки ответственны за иммуногенные свойства PPV [3]. PPV заражает беременных свинок и свиноматок, вызывая репродуктивную недостаточность, характеризующуюся гибелью эмбриона и плода, мумификацией и мертворождением, с отсроченным возвращением к течке [4].В результате снижение репродуктивной способности может значительно снизить производство свинины [5].

PPV широко распространена в популяции свиней и очень стабильна в окружающей среде, что затрудняет создание и сохранение племенных популяций, свободных от вируса. По этой причине важно поддерживать коллективный иммунитет против PPV [4]. Самый распространенный подход к поддержанию иммунитета — регулярная вакцинация племенных самок. Два основных штамма PPV, NADL-2 (непатогенный) и Kresse (патогенный), были идентифицированы на основании патогенности, хотя анализ последовательностей недавних изолятов предполагает активную эволюцию PPV [6].Вакцины, коммерчески доступные с 1980-х годов, основаны на химически инактивированном штамме NADL-2.

Разработка вакцин важна для борьбы с такими заболеваниями, как репродуктивная недостаточность, вызванная PPV. В этом контексте основные соображения должны включать в себя вирусное разнообразие, защитный иммунитет и охват населения в качестве ключевых факторов, которые создают особые проблемы для этой постоянно расширяющейся области [7, 8]. Одним из хорошо известных подходов к производству вакцин является использование инактивированных вирусных препаратов [9, 10].В последние годы использование высокого гидростатического давления (ВДД) становится все более популярным нетермическим методом инактивации [11–13]. Этот подход успешно использовался для инактивации нескольких вирусов и представляет собой многообещающую альтернативу разработке вакцины [14]. Основное преимущество вирусной инактивации с помощью HHP состоит в том, что ключевые иммунологические сайты остаются нетронутыми, что повышает полезность инактивированного вируса при разработке вакцины. HHP также вызывает мощный и направленный иммунный ответ без введения новых химикатов в процесс.В этом исследовании мы использовали комбинацию подходов in silico и in vivo для изучения иммунных ответов на различные составы HHP-PPV, которые затем сравнивали с коммерческой вакциной, полученной с использованием химически инактивированного вируса.

Материал и методы

Препарат вируса

Штамм NADL-2 PPV культивировали в клетках SK6, как описано ранее [15]. Супернатанты клеточных культур отделяли и очищали осаждением CaCl ₂ с последующим градиентным ультрацентрифугированием [16].Фракции, обладающие гемагглютинирующей активностью, диализовали в течение 16 ч при 4 ° C против буфера Tris-EDTA, pH 8,0 [17]. Вирус титровали в клетках SK-6 путем серийных разведений в 96-луночных планшетах, а затем клетки проверяли на цитопатический эффект через 72 часа после заражения. Тест считался положительным, когда цитопатические эффекты наблюдались в> 75% клеток. Образцы, содержащие 1 × 10 ^4,5 TCID ₅₀ / мл, разделяли на аликвоты и подвергали HHP. Аликвоты вакцины и вирусные препараты нормализовали, чтобы избежать эффекта концентрации антигена [18].

Вкратце, аликвоты вируса подвергали двум обработкам: одну при 300 МПа в течение 1 ч при 25 ° C и другую при 300 МПа при -18 ° C, обе погружали в 0,1 М трис-HCl, pH 7,4. Оборудование, используемое для обработки образцов, состояло из устройства генератора давления (модель HP ISS), соединенного с камерой давления, как описано ранее [19]. Температура замерзания (т.е. –19 ° C) для этих условий была определена ниже в предыдущих исследованиях нашей группы [20].

Иммунизация свиней и сбор образцов

Это экспериментальное исследование было проведено на станции свиноводства и птицеводства Embrapa (Бразильская сельскохозяйственная исследовательская корпорация), расположенной в южном бразильском штате Санта-Катарина.Все экспериментальные протоколы с участием животных были одобрены институциональным комитетом по уходу за животными и их использованию (Embrapa, протокол № 003/2009).

Десять 21-дневных свиней-самцов, свободных от специфических патогенов (SPF) от терминального скрещивания линий Ландрас и Крупная Белая, были разделены на пять групп по две свиньи в каждой: N (нативный PPV), P (PPV, обработанный 350 МПа при 25 ° C), P-18 (PPV, обработанный 350 МПа при -18 ° C), V (коммерческая инактивированная вакцина PPV, Farrow sure B, Pfizer) и NC (отрицательный контроль).Свиней вакцинировали внутримышечно в день 0 (D0), D14, D28 и D38 в соответствии с каждым протоколом HHP, как описано ранее [21]. Свиньи в группе NC получали только физиологический раствор. На D51 всем свиньям интраназально вводили контрольный штамм PPV NADL-2 [22]. Образцы сыворотки собирали перед каждой вакцинацией или контрольным заражением (D0, D14, D28, D38 и D51), а также на D58, D65 и D72.

Точечный синтез

Пептиды были синтезированы на основе аминокислотной последовательности VP1 из штамма PPV NADL-2 (GenBank, номер доступа.NC 001718) с 12 перекрывающимися пептидами и смещением четырех пептидов. Мембрана, используемая для точечного синтеза, была приготовлена ​​с использованием химии Fmoc (9-фторенилметоксикарбонил) [23, 24] на целлюлозной мембране, полученной из ПЭГ, с добавлением С-концевого якоря остатков β-Ala и гексадекапептидов на N-конце. Все образцы сыворотки от D0, D28, D58 и D72 (представляющие, соответственно, базальное состояние сыворотки до любого вмешательства, ответ антител против вакцины, заражение контрольным штаммом и 21 день после заражения) были проверены на антитела.Вторичное антитело против свиного IgG-Fc, конъюгированное с щелочной фосфатазой (Jackson ImmunoResearch Europe Ltd.), использовали для оценки узнавания эпитопа в пептидных массивах, а последующие процедуры выполняли, как описано ранее [24]. Затем мембрану сканировали при 1200 d.p.i. с копировальным аппаратом со сканированием печати (HP Photosmart) и программным пакетом «Totallab Quant-Array Analysis» использовался для количественной оценки пятен на основе интенсивности реакции относительно интенсивности фона. Сигнал ниже произвольного порога 0.2 были признаны отрицательными.

Предсказание конформационного эпитопа

Полная первичная последовательность капсидного белка эталонного штамма была получена из базы данных UniProt Knowledge Base (UniProtKB) (номер доступа {«type»: «entrez-protein», «attrs»: { «text»: «P18546», «term_id»: «116621», «term_text»: «P18546»}} P18546) и используется для последующих приложений. Физико-химические свойства аминокислот учитывали и оценивали с помощью шкалы гибкости Карплюса и Шульца [25].Антигенность белка определялась с помощью шкалы Коласкара и Тонгаонкара, полуэмпирического метода прогнозирования антигенности по физико-химическим свойствам аминокислот в белковых последовательностях [26, 27]. Гидрофобные свойства последовательности были предсказаны с помощью шкалы гидрофильности Паркера [28]. Белок VP1 полной длины еще не кристаллизовался. Поэтому, чтобы лучше понять результаты картирования эпитопа, мы создали модели для первых 174 аминокислот, охватывающих как домен PLA _{, 2,} и сигнал ядерной локализации, так и оставшиеся остатки, которые, как известно, скрыты в структуре PPV. при физиологическом pH, но подвергается воздействию на ранних стадиях продуктивных инфекций.Фосфолипаза A ₂ (PLA ₂ ), сигнал ядерной локализации и связывающие области белка VP1 были смоделированы с использованием программного обеспечения I-TASSER (v. 5.1) [29], а результат оценивался на веб-сервере MolProbity [30] . Энергия всех моделей была минимизирована в GROMACS, а состояния протонирования были доведены до pH 5,0 (для имитации состояний слияния эндосом и воздействия PLA ₂ ). Предсказание эпитопа В-клеток было сделано с использованием кристаллической структуры (запись PDB: 1K3V) и модели гомологии, созданной для комплекса VP1 с помощью программ Bepro [31], Discotope2 [32] и Epitopia [33].

Молекулярная динамика

Кристаллизованная структура белка VP2 (код PDB 1k3v) была загружена из банка данных белков, и координаты были использованы для создания модели VP1-PPLA в пакете I-TASSER5.1 вместе с координатами для Структура PPLA в качестве входных данных для протокола модели гомологии (вариант 4). Моделирование молекулярной динамики было выполнено с помощью программного обеспечения GROMACS (v. 2016.3) [34] для оценки предполагаемых структурных изменений, вызванных HHP (350 МПа) при 27 ° C и -18 ° C по сравнению с контрольными условиями и физиологическими условиями.Для моделирования были разработаны две системы с использованием ромбического додекаэдра в качестве блока моделирования, ограниченного 10 А от краев белка. Система VP1-PPLA была создана с 138 811 атомами (11 221 атом для белка VP1-PPLA) и 75 857 атомами с 8447 атомами, представляющими сольватированный белок VP2. Было применено силовое поле AMBER99SB, и явная модель воды TIP3P была выбрана для протоколов уравновешивания nvt и npt. Электростатические взаимодействия были рассчитаны с использованием метода сетки частиц Эвальда (PME) для ван-дер-ваальсовых взаимодействий и электростатических взаимодействий в реальном пространстве метода PME.Этапы минимизации энергии проводились в вакууме с использованием интегратора наискорейшего спуска до сходимости, за которой следовали сольватация и ионное уравновешивание систем для подготовки систем к этапам уравновешивания NVT и NPT. Для моделирования условий эксперимента системы уравновешивания были нормализованы до 300 K при атмосферном давлении, после чего были внесены изменения в параметры NVT и NPT mdp для имитации желаемых условий HHP: 350 МПа при 27 ° C и 350 МПа при -18 ° C. После того, как системы были уравновешены, производственные циклы для каждого условия были проведены в течение 20 нс, и выходные данные проанализированы на предмет структурных параметров, таких как среднеквадратичные отклонения (RMSD), среднеквадратичные флуктуации (RMSF), радиус вращения, колебания вторичной структуры, а также полная система, включая изменения давления, температуры и энергии.Графики были созданы с помощью программного пакета Grace (http://plasma-gate.weizmann.ac.il/Grace/), а анализ траектории был выполнен с использованием пакета VMD, а также встроенных пакетов анализа, представленных в GROMACS [35] .

Результаты

Картирование эпитопов

Схематическое изображение мембраны показано на рис. А, с положительными точками, выделенными на рис. B и c, отображающими подробные условия для каждого положительного результата (различные обработки HHP и интервалы отбора проб ).Ни один из образцов сыворотки, собранных в D0, не связывал поликлональные антитела. Свиньи отрицательного контроля (группа NC) показали положительный результат только после инокуляции PPV (D58), что отражает сайты, обычно активируемые при естественной инфекции PPV (сайты 13 и 16, которые соответствуют аминокислотным остаткам 493–512 и 585–608, соответственно) (рис. .c и a).

Результаты картирования эпитопов для различных условий прививки свиней. — массив мембранных пятен с каждым гексадекапептидом, показывающим аминокислотное положение VP1 в каждой клетке.Выделенные точки (пурпурный, n = 44) соответствуют положительности по крайней мере в одном из экспериментальных условий. b Пояснительная рамка для панели c . c Подробные данные для пятен, выделенных в a , демонстрирующие соответствующую положительность для экспериментальных условий и дней сбора образцов (D0, D28, D58 и / или D72). Последовательные положительные пятна были обозначены как «сайты» ( n = 20)

Интенсивность колориметрического выхода реакции связанной с антителами щелочной фосфатазы (панели a (NC), c (N), e ( V), g (P) и i (P-18)) и структурное представление каждой отображенной области на кристаллической структуре VP2 для каждого состояния (панели b (NC), d (N ), f (V), h (P) и j (P-18)).Интенсивность сигнала положительных пятен показана на фиг. C, основанная на днях сбора образцов D0, D28, D58 и D72, и была использована для восстановления карт эпитопов PPV на графиках для всего белка. Ось X соответствует положению пятна (в соответствии с рисунком), и для каждого пятна показаны четыре результата. Ось Y показывает относительную интенсивность для каждого пятна. Данные были нормализованы для каждого экспериментального условия, и порог был установлен на уровне 40% от максимальной интенсивности. Модели справа показывают кристаллографическую структуру белка VP2 (запись PDB 1k3v) с положительными значениями, обозначенными желтым для D28 и / или D58, красным для D72 и оранжевым для положительных значений как для D28, так и / или D58 и D72

Данные для каждого экспериментального условия и момента времени показаны парами графиков на рис.. Интенсивность пятна показана и считалась положительной на рис. A, c, e, f и i; соответствующее местоположение было нанесено на кристаллическую структуру PPV VP2 с цветовой кодировкой в ​​соответствии с моментом времени (рис. b, d, f, h и j). В некоторых условиях преобладали красные и желтые области, что указывает на то, что исходная позитивность в данной области часто не сохранялась после заражения. Кроме того, пятнам, которые были положительными после заражения, не предшествовало положительное картирование эпитопа при первоначальных посевах.

По сравнению с отрицательным контролем картирование эпитопа для домена PLA ₂ в последовательности VP1 было четко выражено при всех обработках (рис. A, c, e, g — пятна: аминокислоты от A5 до A15: от 17 до 72) . Подобный образец иммунного ответа, направленного против этих областей, наблюдался при всех обработках, отличаясь в основном, когда ответ был впервые обнаружен. Домен PLA ₂ вызывал двукратный ответ при использовании обработки P-18, предполагая, что лечение обеспечивало средства для этой области, которые были предпочтительны в отношении продукции антител на более ранних стадиях по сравнению с другими видами лечения и положительным контролем.Область, образованная остатками от 61 до 124, связанная с соединительной областью между доменом PLA ₂ и капсомером VP1, давала более высокое и устойчивое связывание антител в ходе экспериментов только для обработки P-18; последний был обнаружен во всех точках данных после первого заражения, в отличие от обработок N, P и V, для которых область начинала распознаваться только после D72 (Рис. a, c, e, g, пятна: от A17 до B3, аминокислоты: от 65 до 124). В целом, обработка при низкой температуре и высоком давлении вызвала пролонгированную продукцию антител с более ранней доступностью для первых 174 обнаруженных остатков.

Свиньи из группы N не показали значительной реакции на D28, за исключением сайтов 7 и 13, которые соответствуют аминокислотным остаткам 197–216 и 493–516 соответственно. Когда образцы из D58 (представляющие иммунный ответ после заражения PPV) были проанализированы, дополнительная положительность возникла в сайтах 1 (а.о. 1–20) и 19 (а.о. 685–700). Когда антитела, полученные после заражения активным вирусом, были картированы против мембраны (D72), были обнаружены многочисленные дополнительные эпитопы, а именно: 2 (аа 45–60), 3 (аа 57–72), 4 (аа 65–96), 6 (а.о. 125–140; 133–152), 12 (а.о. 453–476), 14 (а.о. 529–544), 17 (а.о. 637–652) и 18 (665–684).Область, первоначально обнаруженная в сайте 7 (а.о. 201–216) на D28 и D58, не была обнаружена в последнем образце (D72).

Для группы V иммунореактивность наблюдалась только на D58. В этом случае антитела к PPV были обнаружены в большем количестве сайтов, чем с нативной формой вируса. Участки 3 (а.о. 57–72), 4 (а.о. 65–80; 73–100), 6 (а.о. 133–152), 12 (а.о. 453–472), 15 (а.о. 565–580), 18 (а.о.665– 684) и 20 (а.о. 713-729) имели связанные антитела, в отличие от группы N, для которой не было обнаружено сигнала в тех же областях на D58.Картирование эпитопа после вирусного заражения (D72) показало более высокое согласие с картой группы N, но отдельные области также были обнаружены для сайтов 1 (а.о. 9–24), 6 (а.о. 121–136; 129–144), 7 (а.о. 205–220), 8 (а.о. 217–232), 9 (а.о. 229–244) и 10 (а.о. 397–412).

В целом, большее количество сайтов было индуцировано и распознано в группе P, чем в группе N, но это число было ниже, чем в группе V. Сайты 1, 4, 6, 13 и 18, представленные в группе P, также были обнаружены на D28 и D58 в группе V, а сайты 1 и 13 также были обнаружены в группе N.В последнем собранном образце (D72) нативная форма (N) показала больше антигенных сайтов по сравнению с группами P и V (таблица 1S и фиг. C). Сайт 1 показал самую высокую частоту положительных пятен на D28, D58 и D72 в группах N, P и V (таблица 1S и рис. C).

В группе Р-18 увеличилось количество положительных точек (рис. В). Эта ситуация была аналогична группе N, но отображаемый ответ был выше, когда P-18 сравнивали с группами P, V и NC. Свиньи группы P-18 показали положительный ответ антител раньше, чем при других обработках, и включали участки 1, 3, 4, 6, 12, 18, 19 и 20 (рис.в). Эта группа была единственной, в которой сайты 5 (а.о. 101–116; 109–124), 7 (а.о. 209–224) и 11 (а.о. 429–444) были активированы на D72.

Биоинформатический анализ

Для понимания молекулярного распознавания капсидных белков VP1-VP2 на основе результатов картирования эпитопа, описанных выше, использовали комбинацию иммуноинформатических инструментов. Используя эталонную последовательность штамма NADL-2, in silico предсказания идентифицировали сайты с высокой вероятностью того, что они являются антигенами. Поскольку этот метод не оценивает третичные структуры и основан на скользящем окне для получения оценок предрасположенности, мы определили шесть регионов из 24 прогнозов, которые совпадают с результатами для группы N.

На основании таких свойств, как площадь поверхности, доступная для растворителя (SASA), и прогнозов гидропатии, эти области были признаны открытыми и гидрофильными, что дает основную информацию для экспериментального обнаружения таких областей в качестве эпитопов в группе N. Используя предсказания эпитопа и консервативные настройки, несколько регионов дали положительные предсказания конформационных эпитопов. Однако благодаря уравновешиванию чувствительности и специфичности алгоритмы смогли обнаружить предполагаемые эпитопы в эталонной структуре 1k3v (общедоступные данные), хотя и в отдельных регионах, по сравнению с нашим картированием эпитопов необработанного вируса.

В настоящее время моделирование молекулярной динамики вирусных белков широко используется в вироинформатике, с другой стороны, использование этого инструмента для исследования эффектов HHP в сочетании со стратегиями картирования эпитопов набирает обороты. Ценные выводы можно извлечь из моделирования молекулярной динамики и корреляции с нашим экспериментальным дизайном и результатами, добавившими ценность результатам in vitro. Этот метод достаточно мощный, чтобы оценить структурные возмущения в данной системе под давлением, и раньше он широко использовался для анализа эффектов HHP в белках.Как и ожидалось из предыдущих отчетов, наши результаты показывают небольшие отклонения в колебаниях RMSD с уменьшением позиционных перемещений в зависимости от условий, применяемых к системе in silico. Молекулярно-динамический анализ проблемы исследовал поведение VP1-PPLA (дополнительный файл 1: рисунок S1 и дополнительный файл 3: рисунок S3) и VP2 (дополнительный файл 2: рисунок S2 и дополнительный файл 4: рисунок S4) в нормальных условиях и в условиях групп П и П-18. Моделирование молекулярной динамики в течение 20 нс позволило сравнить радиус инерции (Rg), индикатор компактности белка, с моделированием группы N и выявить общее уменьшение на 0.42% в Rg для группы P по сравнению с группой N (2,85 нм против 2,838 нм) и снижение на 0,87% для моделирования P-18 по сравнению с группой N (2,85 нм против 2,826 нм) (дополнительный файл 1: Рисунок S1 и Дополнительный файл 2: Рисунок S2), предполагая, что моделирование произвело более ограниченный белок. Общая энергия моделирования HHP увеличилась на 0,83% по сравнению с группой N (- 2,385 × 10 ⁶ кал по сравнению с — 2,405 × 10 ⁶ кал), тогда как для группы P-18 увеличилась на 9,85% (- 2,385 × 10 ⁶ кал против — 2.635 × 10 ⁶ кал) (Дополнительный файл 1: Рисунок S1). И наоборот, заметное уменьшение общего объема было зарегистрировано во время моделирования групп P и P-18 по сравнению с группой N, которая колебалась около 1835 нм ³ по сравнению с 1680 нм ³ (P) и 1655 нм ³ (P -18), предполагая, что моделирование было успешным в создании желаемого давления и температуры для эксперимента (Дополнительный файл 1: Рисунок S1 и Дополнительный файл 2: Рисунок S2).

Среднеквадратичное отклонение после производственного цикла выявило базовые значения для флуктуаций атома природного белка в соответствии с предсказанными гибкими областями белка и предоставило основу для сравнения с моделированием группы P и P-18.В результате P-моделирование сузило изменение амплитуды на атом, тем самым сжав гибкие области и ограничив общее изменение 0,01 нм. Кроме того, моделирование P-18 дало более жесткую конфигурацию без флуктуаций> 0,05 нм на всех атомах, что согласуется с другими параметрами (общим объемом, полной энергией и Rg). Интересно, что площадь на остаток по траектории существенно увеличилась в моделировании групп P и P-18 (дополнительный файл 3: рисунок S3 и дополнительный файл 4: рисунок S4).Более того, количество контактов, поддерживаемых между остатками, существенно уменьшилось, когда группы P и P-18 сравнивали с контрольной группой N (дополнительный файл 3: рисунок S3 и дополнительный файл 4: рисунок S4).

Обсуждение

Стратегии картирования эпитопов широко применялись к ключевым патогенам, и результаты, полученные с помощью этого подхода, нашли важное применение в общественном здравоохранении, а также в безопасности и благополучии животных [36-40]. Продолжаются попытки идентифицировать ключевые эпитопы капсидных белков VP1-VP2 PPV с помощью различных стратегий картирования.Исследование, в котором Pepscan был использован для синтеза 24 различных пептидов, направленных на антигенные сайты, обнаружило девять таких сайтов и предположило, что те, которые обнаружены в N-концевой области, нейтрализуют эпитопы [41]. Xie et al. [3] подтвердили эти данные, используя моноклональное антитело (C4) против VP1 PPV для скрининга библиотеки фаговых пептидов из 12 звеньев. Эти авторы идентифицировали мимотоп, соответствующий N-концевому иммунодоминантному участку, который защищал мышей от вируса. В настоящем исследовании мы нанесли на карту 20 «антигенных сайтов», соответствующих 44 положительным точкам, на основе комбинации экспериментальных условий, которые включали настройки вакцинации / заражения.Наблюдались отчетливые образцы положительности эпитопа в зависимости от экспериментальных условий, которым был подвергнут антиген, и от того, оценивалась ли фаза вакцинации или заражения (фиг. A-j).

Насколько нам известно, методика точечного синтеза ранее не применялась к PPV таким образом, и полученные здесь результаты обеспечивают всестороннюю картину иммунологического профиля комплекса VP1-VP2 путем разрезания белка на перекрывающиеся олигопептиды, связанные с нитроцеллюлозной мембраной. .Результаты пятен поддаются количественной оценке и дают удовлетворительные параллельные сравнения с результатами ELISA, например, для определения концентрации белка [42]; методология воспроизводима и использовалась для контроля качества [43].

Домен PLA ₂ отвечает за важные этапы цикла инфицирования PPV, способствуя высвобождению вируса вблизи ядра после успешного образования эндосомы и до активации передачи сигналов ядерной локализации. В многочисленных исследованиях, начиная с 1980-х годов, последнее событие было изучено после демонстрации того, что микроинъекции антител могут мешать внутриклеточным антигенам [44].Ингибирование функции антигена путем связывания антител с их антигеном внутри эндосом зависит от таких факторов, как воздействие, идентичность и, в первую очередь, pH. Важные успехи были достигнуты с использованием генно-инженерных антител для поддержания связывания при более низком pH [45]. Идентификация IgG, которые успешно связываются с ключевыми вирусными белками или функциональными доменами (как в данном случае), имеет первостепенное значение в борьбе с инфекциями на раннем этапе. Описанные здесь результаты показывают, что нативная конформация вируса вызвала иммунный ответ против мишени PLA ₂ , но только на более поздних стадиях выработки антител, тогда как давление и сочетание низкой температуры и давления вызвали бурный ответ, который был значительным. во всех интервалах отбора проб в эксперименте P-18.

Комбинируя молекулярную динамику с картированием эпитопа, стало возможным исследовать предполагаемые изменения, которые HHP мог вызвать в конформации белка и в доступной для растворителя области поверхности. Нативная форма белка, используемая здесь в качестве положительного контроля, обеспечила ландшафт эпитопа, на который свиньи ответили при трех выборках. Первоначально группа N показала сильный ответ антител на пятна B25 (197–212 аминокислот) и C1 (201–216 аминокислот) во время отбора проб D28 и D58. Эти пятна соответствуют N-концевой области VP2, информация, которая также присутствует в кристаллической структуре VP2.Эпитопы, расположенные в капсидном белке VP2 PPV, важны для генерации нейтрализующих антител против этого вируса с высоким потенциалом активации В-клеток. Эти исследования показывают, что N-конец VP2 является сильным кандидатом на В-клеточные эпитопы и должен быть включен в вакцины [46, 47]. Антитела, которые связывались с областью, состоящей из аминокислот 497-516, наблюдались вскоре после второй инокуляции, и титры (рассчитанные по интенсивности фосфатазных реакций) поддерживались на протяжении всего эксперимента.Иммунодоминантные области в VP2 принадлежат петлям и другим участкам на N- и C-концах [41, 46, 47]. Как показано на рис. B, d, f, h и j, области петель, отмеченные Pro ⁵⁰⁰ и Val ¹⁷⁵ , встречались в эпитопах, присутствующих в пяти группах, с чередованием этих областей в трех интервалах сбора сыворотки. .

Несмотря на то, что белки капсида находились под почти нейтральным отбором, несколько ключевых аминокислот оказались вариабельными (аминокислотные остатки 215, 228, 383, 414, 419 и 436), при этом большинство из них расположено в поверхностных петлях [ 6, 48].Zeeuw et al. [49] ранее показали, что переход штамма с авирулентного (143a) на вирулентный (27a) может напрямую зависеть от мутаций остатков VP2 378 и 383. Как и ожидалось, поверхностные аминокислоты в конфигурации VP2 являются гидрофильными и содержат большинство мутаций. идентифицировано Ren et al. [50], которые также обнаружили, что этот белок подвергается отрицательному отбору. Ответы антител против перекрывающихся пептидов VP1 не выявлялись до поздних моментов времени, а именно после вирусного заражения, когда аминокислоты с 5 по 96 вырабатывали значительное связывание, тем самым подтверждая предыдущие выводы относительно N-концевой иммуногенности VP1 PPV [3].

В отличие от этих результатов картирование эпитопа вакцины вызывало выраженные ответы против N-концевой области VP1 после D38 с умеренным связыванием с ранее упомянутыми областями VP2. HHP вызывал ответы, подобные ответам вакцины в N-концевой области VP1, а также для упомянутых ранее вариабельных областей VP2 при четвертой инокуляции перед контрольным заражением PPV. В нашем исследовании аминокислотные остатки (45, 217–219 и 556), соответствующие картированным эпитопам, включали некоторые из сайтов, описанных Streck et al [51]. Замена аминокислотных остатков в сайтах, расположенных в основном на поверхности PPV, является важно не только для понимания эволюционного механизма адаптивного ответа на организм хозяина, но и для определения возможных стратегий производства более эффективных вакцин против PPV.

Обработка PPV HHP при 25 ° C и –18 ° C не подавляла антигенность, но вызывала появление нескольких других эпитопов за счет воздействия на части капсида. Хотя HHP не влияет напрямую на третичную структуру белков, воздействие различных частей белков, включая гидрофобные области, в ответ на эти условия может объяснить появление новых эпитопов [52]. Прямое сравнение вторичных структур кристаллической структуры VP2, полученных после моделирования экспериментальных условий методом молекулярной динамики в течение 20 нс, также показало небольшие изменения исходной конфигурации (SF 2ary), в основном из-за переключений между гибкими областями (наиболее частые обнаруженные взаимопревращения были от катушки к изгибу, поверните к 3-спирали и альфа-спирали, чтобы превратиться в 3-спираль).И наоборот, HPP и низкотемпературные HPP создали более стабильные вторичные конструкции по сравнению с моделированием без ограничений по давлению или температуре. Моделирование HHP и низкотемпературного HHP показало небольшие колебания во время производственного цикла, и только N-концевой участок структуры VP2 1K3V показал изменения в конфигурации (аминокислоты 40–90). По сравнению с молекулярной динамикой нативного VP2, моделирование HHP имеет тенденцию производить фиксированные повороты, где взаимное преобразование между изгибами и поворотами регистрировалось (аминокислоты 45–55), тогда как низкотемпературное HHP фиксировало эту область в конфигурации с 3 спиралями.Область из аминокислот 75–85 колебалась между конфигурациями альфа-спираль / виток / 3-спираль в естественном моделировании, но затем область была зафиксирована как альфа-спиральная структура в прогоне HHP и варьировалась между поворотами и изгибами при низкой температуре. HHP run. Взаимодействия, устанавливаемые системой белок-растворитель в HHP, более благоприятны, и из-за небольших деформаций внутренних связей энергии взаимодействия белок-белок также увеличиваются (графики полной энергии). Сеть H-связей также поддерживается HHP, как ранее сообщалось для SOD, лизоцима и BPTI, результаты для сети H-связей капсидных белков были увеличены во время моделирования и были значительными по сравнению с N-состоянием.Необходимы дополнительные исследования, чтобы оценить, можно ли получить возможные корреляции из моделирования МД и предполагаемых иммунологических ответов. Важным ограничением нашего исследования является моделирование отдельных белков в воде. Особый интерес представляет полноатомное моделирование полных вирусных капсидов в воде, подвергнутой процессам HHP и холодной денатурации, которые расширяются в этой области по мере появления вычислительной мощности.

Предыдущие сообщения идентифицировали важные структурные изменения глобулярных белков после воздействия HHP с увеличением неупорядоченных структур и поворотов, а также уменьшением β-листов и α-спиралей [13].Эти данные предполагают, что влияние давления на кинетику возникает из-за большего положительного активационного объема для сворачивания, чем для разворачивания; это, в свою очередь, приводит к значительному замедлению скорости складывания с увеличением давления. Для вирусных капсидов с HHP, D’Andrea et al [53] отметили, что лечение усиливало вирулицидный эффект на вирус гепатита А, вирус без оболочки, что указывает на то, что эффективность лечения зависит от конформации капсида. Эти авторы предположили корреляцию между зрелыми и незрелыми капсидами, при этом доступность иммунодоминантного сайта около пятикратной оси, возможно, объясняет чувствительность вируса к инактивации HPP [53].

В современных методах производства вакцин используются опасные химические вещества, которые могут представлять опасность для реципиентов вакцины. Эффективность HHP для инактивации различных патогенных микроорганизмов пищевого происхождения хорошо известна, и было продемонстрировано, что некоторые из этих микроорганизмов сохраняют иммуногенные свойства, это открытие предполагает, что HHP может найти применение при разработке вакцин. Действительно, давление может привести к инактивации вируса при сохранении иммуногенных свойств [11, 12, 14, 21].Силы, управляющие сборкой и разборкой вирусов, зависят как от микроокружения, так и от сети белок-белковых взаимодействий, продуцируемых их генетическими кодами [54]. Вклад исследований динамики автосборки капсида in vitro и in silico предоставил интересную информацию о поведении таких ансамблей. Как показано Silva et al. [14] и протестировано in silico в ряде условий [55–57], использование методов HHP изменяет распределение сил в вирусном капсиде, чтобы обеспечить энергетически совместимую структуру; Это лечение дает ощутимый результат, так как эпитопы, обнаруженные этим методом, представляют большой интерес как для диагностики, так и для фундаментальных исследований.

Необходимы дополнительные исследования, чтобы понять влияние селективного давления на структурные конформации и корреляцию метода HHP в выявлении различных эпитопов. Недавняя работа Letko et al. [58] обратились к фундаментальным вопросам по этому поводу, проведя серийные пассажи вируса при выборе новой рецепторной адаптации, экспрессируемой на клетке-мишени; этот подход позволил идентифицировать ключевые структурные аспекты вирусного кода, которые позволили рецептору адаптироваться к новому рецептору.Методы моделирования in silico предоставляют хорошие модели для процессов в этом масштабе и позволяют проводить важные сравнения с экспериментальными подходами, при этом полностью атомное моделирование полных вирусных капсидов становится вычислительно выполнимым для большинства лабораторий [59]. Последние авторы также предположили, что динамическая сеть водородных связей потенциально может играть роль в ионной селективности внутри капсида. Влияние HHP на структуру белка все чаще изучается in silico по мере того, как вычислительная мощность и ресурсы становятся все более доступными; такой анализ существенно продвинул наше понимание влияния каждого экспериментального условия на его цель.Сжимаемость белка была протестирована in silico в нескольких конфигурациях. Войчита [60] сообщил о влиянии давления на глобулярные белки путем измерения изменений общего объема белка и изменения объема на остаток после пикосекундных воздействий. Полученные данные свидетельствуют о том, что объем белка был значительно сжат во время экспериментов с HHP in silico, и что этот эффект был в основном из-за разницы между радиусами SASA и VdW. Вторичные структуры также внесли свой вклад в полученные результаты, при этом сжимаемость α-спиралей уступает сжимаемости β-листов.Напротив, Vahidi et al. [61] обнаружили, что in silico HHP не может модифицировать вторичные структуры, такие как β-бочки, что согласуется с предыдущими открытиями для петель и спиральных структур.

Инактивированные или ослабленные штаммы PPV для производства вакцины могут быть полезны для борьбы с этим вирусом у свиней. В этом контексте картирование эпитопов иммуногенных белков PPV имеет решающее значение для оценки иммунного распознавания таких вирусных препаратов с потенциальным использованием в приготовлении вакцины, как показано здесь для иммунизации свиней.В данном случае комбинация HHP и картирования эпитопов обеспечила более широкую, более детальную перспективу эпитопного ландшафта, стимулируемого каждым препаратом. Эта информация может потенциально использоваться для отслеживания стад свиней, вакцинированных HHP, в качестве первого сценария или, наоборот, использоваться в качестве комбинированной альтернативы для прикрытия иммунного ответа против вируса. Взятые вместе, наши результаты дают подробное представление об иммунной системе свиней, когда животных стимулируют той же молекулярной конфигурацией антигена, структура которого может быть изменена давлением и температурой.Эти данные также улучшают наше понимание сайт-направленной продукции антител с течением времени и предполагаемой иммунологической динамики отбора антител до и после заражения антигеном.

Вертикальные направляющие оси Патенты и заявки на патенты (класс 415 / 4.4)

Номер патента: 8882441

Abstract: Портативный, избирательно развертываемый источник питания и устройство для хранения включает в себя раму, пол, прикрепляемый к раме и имеющий расположенный на ней продольно проходящий направляющий элемент, а также узел мачты, имеющий первый конец, шарнирно соединенный с элементом трактора, скользящим вдоль направляющий элемент и второй конец, противоположный первому концу, и ветряная турбина, принимаемая на втором конце сборки мачты.Опора шарнирно соединена как с рамой, так и с частью узла мачты и проходит между ними, так что при смещении элемента трактора вдоль направляющего элемента опора вызывает перемещение узла мачты между втянутым и развернутым положениями. Чтобы облегчить транспортировку и перемещение источника питания и устройства хранения, рама, пол, мачта в сборе, ветряная турбина и опора сконфигурированы так, чтобы образовывать единый блок, и их можно вместе принимать в транспортном контейнере.

Тип: Грант

Зарегистрирован: 5 июля 2011 г.

Дата патента: 11 ноября 2014 г.

Цессионарий: ATOPIA Research

Изобретателей: Джейн Харрисон, Дэвид Тернбулл, Дуг Кинг

Внутрилагаличный транспорт и цилиарная динамика

% PDF-1.4 % 138 0 объект > эндобдж 137 0 объект > поток 2017-02-18T12: 32: 20 + 05: 30Arbortext Advanced Print Publisher 9.1.520 / W2021-04-16T22: 50: 45-07: 002021-04-16T22: 50: 45-07: 00Acrobat Distiller 8.1.0 ( Windows) application / pdf

Intraflagellar Transport and Cily Dynamics

uuid: 9c44d3aa-d86a-4477-a82b-95493dd59cc9uuid: f1a7f60a-1dd1-11b2-0a00-6a0018b2b2ff конечный поток эндобдж 133 0 объект > эндобдж 135 0 объект > эндобдж 2 0 obj > эндобдж 97 0 объект > эндобдж 96 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / Properties >>> / Rotate 0 / Type / Page >> эндобдж 104 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / Properties >>> / Rotate 0 / Type / Page >> эндобдж 111 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / Properties >>> / Rotate 0 / Type / Page >> эндобдж 176 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 190 0 объект [195 0 196 0 197 0 ₽] эндобдж 191 0 объект > поток q 300 0 0 75 156 657 см / Im0 Do Q BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 205.27596 579,99988 тм (2017; DOI: 10.1101 / cshperspect.a021998) Tj / T1_1 1 Тс -14.116 0 Тд (Cold Spring Harb Perspect Biol \ 240) Tj / T1_2 1 Тс 0 1 ТД (\ 240) Tj / T1_0 1 Тс 0 1.00001 TD (Хироаки Исикава и Уоллес Ф. Маршалл) Tj / T1_2 1 Тс 0 1 ТД (\ 240) Tj 15 0 0 15 50 624 тм (Внутрилагеллярный транспорт и цилиарная динамика) Tj ET 50 568 кв.м. 562 568 л 0 0 мес. S BT ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 554 тм (Сюжетная коллекция) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 227.80988 554 тм () Tj 0 0 1 рг -7.78099 0 Тд (Цитоскелет) Tj ET 50 545 кв.м. 562 545 л 0 0 мес. S BT ET BT 0 г / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 518.99997 Тм (Белки) Tj Т * (Микротрубочки и связанные с микротрубочками) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 60 509 тм (Холли В. Гудсон и Эрин М. Джонассон) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 308 518,99997 тм (Эволюционная перспектива) Tj Т * (Обзор цитоскелета) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 318 509 тм (Томас Д. Поллард и Роберт Д. Голдман) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 495 тм (Моторные белки) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 60 485 тм (Х. Ли Суини и Эрика Л.Ф. Хольцбаур) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 308 495 тм (Кератиновые промежуточные нити типов I и II) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 318 474.99997 Тм (Кван и др.) Tj Т * (Джастин Т. Джейкоб, Пьер А. Куломб, Раймонд) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 461 тм (Управляемый миозином внутриклеточный транспорт) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 60 451 тм (Маргарет А. Титус) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 308 461 тм (Сокращение мышц) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 318 451 тм (Х. Ли Суини и Дэвид В. Хаммерс) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 437 тм (Актиновый цитоскелет и подвижность на основе актина) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 60 427 тм (Татьяна Свиткина) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 308 416.99994 Тм (Периферин) Tj Т * (Фибриллярный кислый белок \ (GFAP \), виментин и) Tj 0 1.00001 TD (Промежуточные нити типа III Desmin, Glial) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 318 407 тм (Элли М. Хол и Яссеми Капетанаки) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 382,99997 тм (Клетки) Tj 0 1 ТД (Механические свойства цитоскелета и) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 60 362,99997 тм (Вайц) Ти Т * (Адриан Ф. Пегораро, Пол Джанми и Дэвид А.) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 308 393 тм (Цитокинез у Metazoa и Fungi) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 318 383 тм (Майкл Глотцер) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 338.99997 Тм (Подвижность во время регенерации и заживления ран) Tj Т * (Промежуточные волокна и регуляция клетки) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 60 329 тм (Фанг Ченг и Джон Эрикссон) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 308 338,99997 тм (Моторы) Tj Т * (Цилиарная подвижность: регуляция аксонемального динеина) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 318 318,99997 тм (Э. Портер) Tj Т * (Расагнья Вишванадха, Уинфилд С. Сейл и Мэри) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 305 тм (Промежуточные нити и плазменная мембрана) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 60 284.99997 Тм (Хармон и др.) Tj Т * (Джонатан К.Р. Джонс, Чен Юань Кам, Роберт М.) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 308 284,99994 тм (Соседние клетки) Tj Т * (Взаимодействие с внеклеточным матриксом и) Tj 0 1.00001 TD (Адгезионные модули на основе актина опосредуют клетки) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 318 264,99997 тм (Нельсон и др.) Tj 0 1 ТД (Алексия И. Бачир, Алан Рик Хорвиц, У. Джеймс) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 50 251 тм (Внутриклеточная подвижность промежуточных волокон) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 60 230.99997 Тм (Виндоффер) Tj Т * (Рудольф Э. Лейбе, Марчин Мох и Рейнхард) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 308 240,99997 тм (Привязка и организация органелл) Tj Т * (Транспорт и распределение на основе микротрубочек) Tj ET BT / T1_1 1 Тс 10 0 0 10 318 231 тм (Кари Барлан и Владимир Иванович Гельфанд) Tj ET BT 0 0 1 рг / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 242,84967 112 тм (http://cshperspectives.cshlp.org/cgi/collection/) Tj 0 г -19.28497 0 Тд (Дополнительные статьи в этом сборнике см.) Tj ET 50 96 кв.м. 562 96 л 0 0 мес. S BT ET BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 52 74 тм (Copyright \ 251 2017 Лаборатория Колд Спринг Харбор Пресс; все права защищены \ rved) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 8 0 0 8 270.87201 754 тм (16 апреля 2021 г. — опубликовано издательством Cold Spring Harbor Laboratory Press) Tj 0 0 1 рг -14.