причины неисправности, алгорим снятия и установки
Стартер
Втягивающее реле – компонент стартера, электромагнитный включатель, который передаёт ток от аккумулятора на стартер.
Принцип работы втягивающего реле
Принцип работы втягивающего реле заключается в следующем: Повернув ключ зажигания, мы подаем слабый ток на втягивающее реле, которое, в свою очередь, замыкает пятаки, включается электродвигатель стартера. Если бы втягивающего реле не было бы, то ток, проходящий через аккумулятор спалил бы всё зажигание, всю контактную группу.
Где находится и сколько стоит втягивающее реле?
Втягивающее реле находится непосредственно на стартере. К нему подходят два провода: красный тонкий – от замка зажигания, толстый – от «+» аккумулятора.
Стоимость данного устройства составляет от 350р до 500р.
Признаки неисправности втягивающего реле
- Не крутит стартер.
- Стартер медленно крутит двигатель.
- После запуска двигателя стартер продолжает работать.
Не спешите сразу менять втягивающее, как правило, из большинства подобных проблем – втягивающее находится в рабочем состоянии. Поэтому предлагаю вам ознакомиться с другими возможными неисправностями по вашей проблеме:
Как снять втягивающее реле?
Стоит отметить, что при замене втягивающего не обязательно снимать стартер, но если помимо втягивающего, вы желаете проделать обслуживание стартера, то ознакомитесь: Как снять стартер?
Для замены втягивающего реле нам понадобятся:
Снятие втягивающего реле со стартера
- Гаечные ключи на «10» на «8».
- Плоская отвертка.
- Новое втягивающее.
- Снимаем минусовую клемму с аккумулятора ключом на «10».
- Находим втягивающее реле, и снимаем с него клемму красного провода.
- Затем ключом на «8» с задней части реле откручиваем две болта крепления тягового реле (показано на рисунке).
- Снимаем силовой провод втягивающего, снимаем реле.
Важно!!! Снимать реле нужно осторожно: проследите, чтобы сердечник остался внутри. Так же во втягивающем реле находится пружина – проследите, чтобы она не выпала.
Как установить втягивающее реле?
Новое втягивающее устанавливаем с новой пружиной, но без сердечника – т.к. оно осталось в стартере.
Про втягивающее реле стартера ВАЗ 2107
Современные автомобили оснащаются такой деталью, как стартер, главным предназначением которого уже никого не удивишь. До его изобретения для запуска автомобилей использовали специальный Г-образный рычаг. С помощью него, водитель стоя середи авто, вручную проворачивал коленвал, и происходил запуск двигателя. Этот рычаг для запуска называют “кривым стартером”. Сегодня же автомобиль ВАЗ 2107 оснащается электрическим стартером, позволяющим запускать двигатель поворотом ключа зажигания, сидя в салоне. Одним из его важнейших механизмов, является втягивающее реле, о назначении которого узнаем подробнее.
Основное назначение устройства
Втягивающее реле стартера ВАЗ-2107 хотя и имеет простейшую конструкцию, но при этом выполняет достаточно важную функцию. Основополагающим его назначением является перемещение шестерни стартера в зацепление с маховиком, а также одновременная подача напряжения на стартер. Выше на фото представлен вид данного устройства, который выполняет немаловажную функцию в современном автомобиле.
Располагается устройство на автомобиле ВАЗ-2107 непосредственно на самом стартере. Немаловажно отметить наличие на автомобиле ВАЗ 2107 такого устройства, как реле включения. Именно посредством этого реле осуществляется управление стартером. Располагается данное изделие, в зависимости от года выпуска “семерки”, в различных местах. Зачастую располагается оно на правом брызговике. Если не работает стартер, то проблему следует устранять первоначально именно с этого механизма, надо проверить присутствие напряжение на управляющем(самом тонком) проводе и клеммой, подходящем к реле.
Конструктивные особенности механизма и принцип работы
Втягивающее реле основывается на следующих механизмах:
- Контактная группа.
- Якорь.
- Магнит с обмотками.
- Возвратная пружина.
- Корпус.
Принцип работы устройства достаточно прост. На втягивающую обмотку подается напряжение, в результате чего возникает электрическое поле. Посредством этого поля происходит притягивание якоря к сердечнику. Сердечник, в свою очередь, способствует перемещению шестерни бендикса вперед. В этом положении шестерня входит в зацепление с зубьями маховика.
Когда сердечник доходит до конечной точки, то происходит замыкание контактов, через которые протекает электрический ток. Этот ток подается на обмотку магнита, посредством чего срабатывает приводной механизм вала механизма. Привод передается через шестерню на маховик, посредством чего происходит раскручивание последнего. Двигатель заводится, в результате чего ток не поступает на реле. Возвратная пружина возвращает вал с шестерней в изначальное положение. Ниже представлен вид шестерни рассматриваемого механизма.
Неисправности механизма
Устройство работает при каждом запуске мотора, поэтому в частых случаях может выходить из строя. К основным неисправностям механизма можно отнести следующие факторы:
- После запуска мотора не отключается стартер. Определить данную неисправность можно по жужжащему звуку.
- Наличие щелчка при повороте ключа в замке зажигания. Этот щелчок говорит о том, что устройство включилось, но стартер при этом не подает признаков жизни.
- Вращение стартера вхолостую после включения зажигания, но двигатель при этом не запускается.
Особенности замены
Если обнаруживается, что поломка заключается в неисправности втягивающего реле, то лучший способ ее устранения – это замена устройства. Ремонтировать изделие не имеет смысла, поэтому его можно заменить, как самостоятельно, так и совместно с основным устройством.
Чтобы убедиться в том, что причина неисправности заключается именно во втягивающем реле, необходимо его проверить. Но как проверить втягивающее реле стартера? Для этого необходимо выполнить следующие действия:
- Для начала проверить функционирование стартера. Если при повороте ключа в замке зажигания слышны щелчки, но при этом он не крутит, значит, поломка в нем.
- Проверить изделие можно путем замыкания его двух контактов, располагающихся на задней крышке устройства. Если при этом изделие не будет работать, значит, неисправно реле. Изделие требуется демонтировать с автомобиля и заменить.
- После демонтажа изделия следует подать на него питание напрямую от АКБ. Плюсовой контакт подается на втягивающее, а масса крепится к корпусу механизма. Если после подачи напряжения будет слышен щелчок, значит, устройство исправно. Отсутствие щелчка или медленное его срабатывание говорит о подгорании или окислении контактов.
- Можно воспользоваться мультиметром. Требуется проверить наличие свободного замыкания контактных болтов с пластиной. Удерживающая обмотка должна иметь сопротивление 75 Ом, а втягивающая – 55 Ом.
Если ослабли или окислились контакты на устройстве, то их можно зачистить. Если проблема в обмотках или корпусе, то изделие подлежит замене.
Для замены изделия на ВАЗ-2107 требуется выполнить следующие действия:
- Отключить клемму “минус” на АКБ.
- Очистить устройство от грязи.
- Отвинчивается контакт от болтового соединения устройства, после чего он извлекается.
- Отвинчиваются стяжные болты к “массе”, и извлекается деталь.
- С торцевой стороны требуется вывинтить гайки, разделяя деталь на две части.
- Теперь требуется демонтировать старый сердечник, заменяя его на новый.
Сборка устройства осуществляется в порядке обратном снятию. После замены агрегата необходимо проверить работоспособность механизма. Для этого необходимо сесть за руль и повернуть ключ в замке зажигания. Не забудьте накинуть клемму “минус” на аккумулятор.
Втягивающее реле ВАЗ 2109
просмотров 74 570 Google+Втягивающее реле для чего оно нужно?
Втягивающее реле ВАЗ 2109, как и втягивающее реле любого стартера служит для дистанционного включения электродвигателя стартера и ввода в зацепление бендикса с венцом маховика.
Втягивающее реле принцип работы.
Работа реле основана на работе электромагнита. На сердечник, выполненный в виде полой трубы, внутри которой перемещается якорь, намотана катушка. При проходе по катушке электрического тока в ней создаётся электромагнитное поле, под действием которой происходит перемещение якоря внутрь сердечника.
После отключения питания магнитное поле пропадает и якорь начинает свободно перемещаться в сердечнике.
Втягивающее реле устройство.Втягивающее реле ВАЗ-2109 состоит из электромагнита, намотанного из двух обмоток, якоря, контактов и возвратной пружины. Электромагнит состоит из двух катушек, втягивающей и удерживающей. Втягивающая катушка соединена с клеммой управления и с контактом идущим к электродвигателю. Удерживающая катушка соединяется с выводом управления и корпусом реле.
При подаче напряжения на контакт управления втягивающего реле по катушкам проходит электрический ток создавая в катушке электромагнитное поле, под действием которой происходит перемещение якоря, который сжимает возвратную пружину. Якорь так же перемещает бендикс, а в конце хода якорь перемещает шток который замыкает контакты соединяющие АБ с электродвигателем стартера.
При замыкании контактов на вывод втягивающей обмотки идущей к выводу электродвигателя подаётся «+» и по ней перестаёт проходить ток, магнитное поле создаваемое втягивающей обмоткой пропадает, но якорь остаётся во втянутом состоянии под действием магнитного поля удерживающей обмотки.
После пуска двигателя и отключение питания под воздействием возвратной пружины якорь возвращается в исходное положение, размыкая контакты и выводя из зацепления бендикс. Контакты втягивающего реле представляют собой болты закреплённые в текстолитовой крышке и пластины круглой или прямоугольной формы, которая замыкает болты при перемещении якоря.
Втягивающее реле порядок проверки.
Для проверки обмоток втягивающего реле необходимо проверить их сопротивление. Для проверки удерживающей катушки подключаем тестер в режиме омметра к выводу для подключения провода управления реле и корпусом. Для проверки втягивающей обмотки замеряем сопротивление между болтом подключения провода управления и болтом для подключения обмотки возбуждения электродвигателя стартера.
Alfa Romeo | Alfa 145 1.7 I.e. 16V, Alfa 146 1.6 I.e., Alfa 146 1.7 I.e. 16V, Alfa 33 1.5, Alfa 33 1.7 16V, Alfa 33 1.7 16V 4×4, Alfa 33 1.7 I.e., Alfa 33 1.7 I.e. 4×4, Alfa 33 1.8 TD, Arna 1.2, Arna 1.3 Ti, Arna 1.5 |
AUDI | 50 1.1, 50 1.3, 80 1.4, 80 1.6 E |
BEDFORD | Astra 1.6 Diesel |
FIAT | 124 2.0 2000, 124 2.0 2000 Spider Euro, 124 2.0 2000 Volumex, 127 1.3 Diesel, 127 1.3 Diesel Panorama, 131 1.6 1600, 131 1.6 1600 Panorama, 131 1.6 1600 Super, 131 1.6 Super Mirafiori, 131 2.0 2000 Racing, 131 2.0 2000 Super, 132 1.6 1600, 132 2.0 2000, 132 2.0 I.e. 2000, Argenta 1.6 1600, Argenta 1.6 I.e. 1600, Argenta 2.0 2000, Argenta 2.0 2000 Voluma, Argenta 2.0 I.e. 2000, Croma 2.0 I.e. Turbo, Duna 1.1, Fiorino 1.3 Diesel, Fiorino 1.7 Diesel, Premio 1.3, Regata 1.6, Regata 1.6 I.e., Regata 1.6 Super, Regata 1.7 Diesel, Ritmo 1.5 I.e., Ritmo 1.6, Ritmo 1.6 Bertone, Ritmo 1.7 Diesel, Ritmo 2.0 TC Abartln, Tipo 1.7 Diesel, Uno 1.4 TD, Uno 1.7 Diesel |
LADA | VAZ-2103 , VAZ-2106 Nova 1.7 1700, VAZ-2108 Samara 1.1 1100, VAZ-2108 Samara 1.3 1300, VAZ-2108 Samara 1.3 1300 Forma, VAZ-2108 , VAZ-2110 110 1.5, VAZ-2111 |
LANCIA | Delta 1.4 I.e., Delta 1.6 GT, Delta 1.6 I.e., Delta 1.6 I.e. GT, Delta 1.6 I.e. GT Super, Delta 1.6 Turbo HF, Delta 2.0 HF4WD, Gamma 2.5, Prisma 1.6, Prisma 1.6 I.e., Prisma 1.6 I.e. Super, Prisma 2.0 I.e. 4WD |
Opel | Ascona C 1.6 Diesel, Astra F 1.7 Diesel, Astra F 1.7 TD, Astra G 1.7 TD, Kadett D 1.6 Diesel, Kadett E 1.6 Diesel, Kadett E 1.6 Diesel Combo, Vectra A 1.7 Diesel |
RENAULT | Fuego 1.4, Fuego 1.6, Fuego 1.6 Turbo, R18 1.4, R18 1.6, R18 1.6 4×4, R18 1.6 TS, R18 1.6 Turbo, Trafic 1.6, Trafic 1.6 4×4 |
SEAT | Ibiza 1.2 I, Ibiza 1.5, Ibiza 1.5 I, Ibiza 1.7 Diesel, Malaga 1.2, Malaga 1.2 I, Malaga 1.5, Malaga 1.5 I, Malaga 1.7 Diesel, Ritmo 1.7 Diesel, Ronda 1.2, Ronda 1.5, Ronda 1.6, Ronda 1.7 Diesel |
Vauxhall | Astra D 1.6 Diesel, Astra E 1.6 Diesel, Astra F 1.7 Diesel, Astra F 1.7 TD, Astra G 1.7 TD, Astra MK II 1.7 Diesel, Astra MK III 1.7 Diesel, Astra MK III 1.7 TD, Astra van III 1.7 Diesel, Astra van III 1.7 TD, Astra van MK IV 1.7 TD, Belmont 1.6 Diesel, Belmont 1.7 Diesel, Cavalier 1.6 Diesel, Cavalier 1.6 Diesel 1600, Cavalier 1.7 Diesel |
VOLKSWAGEN | Derby 0.9, Derby 1.1, Eurovan 2.4, Eurovan 2.4 Camper, Eurovan 2.4 CL, Eurovan 2.4 CV, Eurovan 2.4 GL, Eurovan 2.4 GLS, Golf 1 1.1, Golf 1 1.3, Jetta 1.1, Passat 1.3, Polo 0.8, Polo 0.9, Polo 1.1, Rabbit 1.5, Santana 1.3, Scirocco 1.1, Scirocco 1.3, Transporter 1.9 TD, Transporter 2.4 Diesel, Transporter 2.4 Diesel Syncro, Transporter 2.5 |
VOLVO | 340 1.4, 343 1.4 |
Втягивающее реле стартера — назначение, проверка и ремонт
В морозную погоду нередки ситуации, когда при попытках завести автомобиль можно услышать лишь шум работы всего стартера или же отдельных его компонентов. Конечно, замена стартера могла бы решить проблему, однако часто неисправность касается лишь двух его компонентов – бендикса, втягивающего реле. Именно о втором компоненте мы и поговорим, заодно ответив на вопросы примерно такого содержания: как проверить втягивающее реле, как его отремонтировать и как подбирать новое реле в случае необходимости.
Немного теории
Вообще, современные стартеры оснащаются парой реле. Первое отвечает за включение агрегата. Оно находится непосредственно в моторном отсеке, причем в отдельных моделях автомобилей реле помещается еще и в отдельный корпус. Второе реле, называемое тяговым (втягивающим), устанавливают прямо на стартер. Функций у данного устройства несколько:
- Обеспечение синхронной работы узлов автомобильного стартера при запуске ДВС;
- Распределение эл. энергии между эл-магнитным реле и моторчиком стартера;
- Обеспечение совместной работы обгонной муфты и венца маховика (подвод шестерней) и, наоборот, отвод шестерней в нужный момент времени.
Вот как все устроено: когда в замке зажигания были замкнуты контакты, сразу же срабатывает обычное реле стартера, отвечающее за подачу напряжения от аккумулятора к т.н. втягивающую обмотку. В результате наводится магнитное поле, воздействующее на якорь реле, за счет тот попадает внутрь обмотки. Теперь осуществляется сразу 2 действия: начинает двигаться вилка стартера, помогая сдвинуться обгонной муфте, еще называемая бендиксом, а также замыкаются контакты установленного втягивающего реле. Проще говоря: стартер теперь соединен с маховиком, после чего он подключается к аккумулятору и за счет прохождения тока по цепи теперь может запуститься двигатель. Не забывайте, что работа систем сгорания без исправной работы электрических цепей авто невозможна.
Однако, и на этом еще не все. Теперь, когда стартер включается, за счет работы т.н. удерживающей катушки якорь удерживается в своем крайнем положении – в таком режиме работы втягивающее реле не потребляет много энергии. А если двигатель уже запущен, цепь стартера разрывается и происходит обесточивание реле. В автомобильных реле имеется пружина – именно она, стремясь сжаться, возвращает якорь в начальное положение. Следом свое положение меняет контактный диск и бендикс. Аккумулятор отключается. Далее реле уже никак не участвует в работе автомобиля вплоть до дальнейшего запуска двигателя.
Реле стартера: описание,назначение,устройство,ремонт,фото,видео
Движение любого автомобиля начинается с запуска двигателя. Если Вы хотите понимать принципы работы основных узлов авто, то рекомендуем начать изучение именно с системы пуска. Одно из самых уязвимых мест этой системы реле стартера. О такой детали слышали практически все, но далеко не многие понимают принцип ее работы. Прежде чем начать разговор о реле стартера, стоит заметить, что конструкция автомобиля имеет одновременно две детали с таким названием, только первая, отвечает за включение стартера, оно находится обычно в моторном отсеке, а вторая втягивающее реле стартера.
Содержание статьи
ЧТО ТАКОЕ РЕЛЕ СТАРТЁРА
Итак, начнём с азов. За стартёр отвечают сразу два реле. Первое установлено в отсеке двигателя. Конструкция может иметь собственный корпус или же устанавливаться в общий блок.
В рамках данной статьи нам будет намного интереснее второе реле, отвечающее за работу стартёра, а именно втягивающее. Оно выполняет такие функции:
- перераспределяет энергию между стартером и электромагнитным реле;
- подаёт шестерни бендикса;
- синхронизирует узлы стартера,
- возвращает шестерни в исходное положение после того, как вы заглушите двигатель.
В автомобильном мире у данного узла есть два названия: тяговое и втягивающее. Первое чаще всего употребляется в специализированной литературе, второе является народным.
Чтобы понять, для чего необходимо втягивающее реле стартёра рассмотрим схематично работу двигателя. Для запуска мотора нужно, чтобы коленчатый вал начал вращаться. Только после этого в камере сгорания возгорается топливно-воздушная смесь.
Обычно процесс запуска двигателя проходит в течение секунды. Роль реле в нём довольно проста. Благодаря ему происходит зацепление элементов шестерней между собой. Оно синхронизирует работу стартёра.Также данный узел убирает бендикс от маховика.
Основные компоненты и принцип работы системы пуска двигателя
Чтобы понять работу системы пуска, стоит рассмотреть сначала устройство стартера автомобиля. Назначение стартера заключается в осуществлении запуска двигателя. Устройство стартера у всех автомобилей идентично, отличаются только размерами или параметрами. Итак, конструкция состоит из таких обязательных элементов:
- Электрический мотор постоянного тока;
- Бендикс;
- Втягивающее реле стартера.
Главную роль здесь выполняет электрический мотор, а бендикс и реле стартера являются вспомогательными элементами. В состав электромотора входят стандартные элементы такие как статор, ротор, а также щеточный узел стартера. Бендикс, хоть самая малая деталь, но выполняет очень важную роль. Он необходим для передачи вращения от электродвигателя к зубчатому венцу маховика двигателя, тем самым обеспечивается запуск.
До 2000 года бендикс был расположен на одном валу с ротором, а потом появилось новая компоновка, где бендикс стал иметь свой отдельный вал и вращаться посредством редуктора.
Поэтому иногда мы слышим такое название как стартер редукторный. Втягивающее реле стартера более сложный элемент и выполняет сразу несколько функций:
- Перераспределение электроэнергии, подающейся от аккумулятора, между электрическим магнитом реле стартера и электромотором;
- Синхронизация работы всех узлов при запуске двигателя;
- Подача шестерни бендикса до зацепления с зубчатым венцом маховика;
- Возврат рабочей шестерни после запуска двигателя на исходную позицию.
Принцип работы стартера заключается в следующем: для того, чтобы запустить двигатель автомобиля в рабочий режим надо принудительным образом проводить вращение коленчатого вала до того времени, пока топливная смесь в цилиндрах не начнет гореть.
Обычно для запуска исправного двигателя необходимо довольно мало времени. Вот задачей втягивающего реле стартера и есть удерживать зацепление шестерни бендикса с маховиком и вращать коленвал равно до тех пор, пока пуск не произойдет. Ни больше и не меньше. Если продержать дольше, то можно поломать детали, а если меньше, то мотор не заведется.
ДИАГНОСТИКА И РЕМОНТ
ПРОВЕРЯЕМ СИСТЕМУ
Перед тем как проверить втягивающее реле, нужно протестировать сам стартер. Эта проверка позволит понять, что именно не работает в системе. Вставьте ключ в замок зажигания и поверните его.
Внимание!Если при этом слышны характерные щелчки, значит, со стартёром всё в порядке, а вот реле вышло из строя.
Дальше понадобится открыть капот и добраться до стартера. Вы должны точно убедиться, что дело именно в нём. Для этого перемкните два контакта. Они выполнены в форме двух медных болтов. Данные элементы конструкции крепятся сзади втягивающего реле (на корпусе). Если после проделанных вами манипуляций механизм будет крутиться, значит, проблема во втягивающем реле.
В некоторых автомобилях дотянуться до стартёра очень тяжело, а порой даже невозможно. В таком случае вам придётся частично разобрать систему и демонтировать само устройство.
Внимание!Во время проверки соблюдайте крайнюю внимательность. Механизм вращается с высокой скоростью. Если не будете осторожны, то можете получить травму.
После демонтажа стартера, положите его на землю. Рядом разместите аккумуляторную батарею. Соедините выводы двух устройств. При этом масса АКБ замыкается на массу стартера.
Когда провода будут подключены, втягивающее реле стартёра заработает. Вначале раздастся довольно громкий щелчок. Если срабатывание механизма проходит слишком медленно, обязательно проверьте контакты. Подобное положение может быть вызвано тем, что они подгорели.
Проверка втягивающего реле на снятом стартере
Проверку работоспособности реле удобнее производить на снятом стартере. Но перед демонтажем делают несколько операций, позволяющих выявить неполадку:
- Проверяют надежность крепления клемм, состояние АКБ, удаляют окислы с контактов и клемм аккумулятора.
- Убеждаются в надежности крепления проводки к стартеру гайками. Если заметна коррозия, контакты зачищают мелкой наждачной бумагой.
- Проверяют состояние реле включения стартера.
Стартер снимается после отсоединения подходящих к нему проводов и откручивания болтов крепления. В некоторых автомобилях на эту операцию уйдет много усилий, так как агрегат может располагаться в плохо доступном моторном отсеке.
После извлечения стартера, его очищают от грязи, обрабатывают наждачной бумагой окисленные контакты, и начинают проверку в следующем порядке:
- Агрегат размещают рядом с АКБ, от клемм которой идут провода с «крокодилами».
- Плюсовая и минусовая клеммы соединяются с соответствующими контактами на втягивающем устройстве.
- Свободным концом минусового провода касаются к корпусу стартера и наблюдают результат:
- Если произошел отчетливый щелчок в реле, значит оно работает;
- Если втягивающее не подает «признаков жизни», оно нуждается в замене или ремонте.
КАКИЕ ПОЛОМКИ МОГУТ БЫТЬ ВО ВТЯГИВАЮЩЕМ РЕЛЕ
Обычно вся проблема кроется именно в подгоревших контактах или их залипании, к другим неисправностям можно причислить:
- перегорание катушки,
- механические повреждения,
- естественный износ деталей.
В последнем случае втягивающее реле стартёра нужно будет заменить. Есть целый ряд признаков, которые с большой долей вероятности говорят, что проблема именно в этом узле, к ним причисляют:
- После запуска двигателя стартер продолжает работать. Об этом свидетельствует хорошо слышный жужжащий звук.
- При проворачивании ключа в замке слышно чёткое пощелкивание. Это значит, что основная система запускается, но стартёр при этом не работает.
- Когда вы поворачиваете ключ — стартёр работает вхолостую. Двигатель при этом остаётся неактивным.
Эти признаки с большой долей вероятности указывают что неисправность связана с втягивающим реле стартера.
КАК ПОДКЛЮЧИТЬ
Многие автомобилисты боятся, что после того, как осуществят ремонт втягивающего реле, не смогут его подключить. В действительности схема подключения довольно проста. Мало того, вы сами её составляете.
Чтобы осуществить обратный демонтаж нужно предварительно пометить отключённые клеммы. Это позволит вам всё правильно подключить после того, как ремонт будет закончен. Также перед установкой реле нужно зачистить контакты. Для обезжиривания используйте современную жидкость, продающуюся в автомобильных магазинах.
РЕМОНТ
Стоит признать, что на машинах одной серии втягивающие реле стартёров весьма похожи. Самой яркой в данном контексте является следующая автомобильная линейка:
- Ваз 2109,
- Ваз 2106,
- Ваз 2110.
В принципе все втягивающие реле стартеров имеют однотипную конструкцию. Соответственно и процесс ремонта у них похожий. В основном отличия кроются в системах крепежа. Также разную конструкцию могут иметь сердечники. Но общая схема очень похожа.
Итак, чтобы выполнить ремонт втягивающего реле стартера для начала его нужно демонтировать и разобрать. Здесь, собственно, и кроется главная проблема. В большинстве автомобилей эти узлы неразборные. Всё что остаётся водителю в таком случае — провести замену.
Очень важно сохранять чёткую последовательность при ремонте. В противном случае вы рискуете не просто нанести вред детали или другим системам, но и получить травму. Сам процесс состоит из таких этапов:
- Отключите питание от аккумуляторной батареи.
- Очистите деталь от пыли и грязи. В противном случае посторонние частички могут попасть внутрь узла, нанеся ему вред.
- Открутите гайку щёточного узла.
- Снимите контакт с болта.
- Открутите стяжные винты. Именно они соединяют реле с массой авто.
- Открутите торцы гаек.
- Разделите устройство напополам.
- Осуществите замену сердечника.
- Осуществите обратную сборку.
Перед тем как поставить устройство обратно в машину запустите его. Обратную установку нужно проводить только после предварительного тестирования. Когда всё будет собрано, сделайте несколько пробных запусков. Только после этого выезжайте на трассу.
ЧТО ЕЩЁ МОЖЕТ СЛОМАТЬСЯ
Большинство повреждений втягивающего реле связано с перегоранием определённых его элементов. Чаще всего перегорают электромагнитные схемы. Обмотки и контакты также подвержены подобной деструкции. В некоторых случаях причиной выхода из строя служит усталость металла.
Тем не менее проблемы с зажиганием далеко не всегда связаны со стартёром или втягивающим реле. Если ремонт не дал нужных результатов — проверьте электрическую цепь. Также посмотрите, какой заряд у аккумулятора.
Проверить и отремонтировать втягивающее реле под силу каждому автовладельцу. Сам процесс не занимает много времени, а его сложность в большинстве случаев зависит от того, насколько удобно расположен стартер.
Датчик дроссельной заслонки: предназначение,типы,виды,неисправности,фото
Датчик холостого хода: принцип действия,устройство,виды,фото,назначение
Датчик расхода воздуха: принцип работы,виды,неисправности,фото
Обратный клапан топливной системы:функции,виды,устройство и принцип действия
Подробнее об устройстве
Наверняка не каждый автолюбитель сразу же поймет все нюансы работы автомобильных реле. Мы постараемся немного упростить и разобрать важные моменты. Важно понимать, что реле – это устройство, предназначенное для замыкания или размыкание электрической цепи, в которую оно введено. Конкретно тяговое реле реагирует на электрические величины и не работает на принципах электромагнитизма. Обратите внимание на изображение ниже.
В простейшем втягивающем реле имеет корпус, якорь, пружина, контакты и магнит с парой обмоток (катушек). Первая катушка, называемая втягивающей, соединена с электродвигателем и клеммой управление, теперь временем как вторая (удерживающая катушка) имеет связь с корпусом и выводом управления.
При подаче постоянного тока к контакту управления в катушке наводится магнитное поле, оказывающее действие на якорь реле. Тот начинает движение и далее обеспечивает замыкание цепи между стартером и аккумулятором. Когда питание не подается, пружина возвращает якорь в его начальное положение – контакты тут же размыкаются. Свою работу бендикс прекращает.
Проверка со снятым стартером с помощью мультиметра
Данная проверка втягивающего реле позволяет очень точно выполнить внутреннюю диагностику и определить состояние обмоток и контактов. Демонтаж стартера в зависимости от марки автомобиля выполняют различными способами. Для ВАЗ 2110 эту процедуру осуществляют снизу из ямы. Перед отвинчиванием крепежа снимают провода (клеммы лучше пометить, чтобы не перепутать при сборке), возможно потребуется снять защиту картера.
Для начала подают напряжение с аккумулятора на корпус и клеммы реле, срабатывание сопровождается характерным щелчком и видимым перемещением штока. Дальнейшие проверки осуществляют с помощью мультиметра, который переводят в режим измерения сопротивления и выбирают диапазон 200 Ом.
Видео: Проверка стартера снятого с автомобиля
Сначала проверяют исправность втягивающей и удерживающей катушек. Для этого один из щупов подключают к массе, вторым последовательно касаются контактов. Показания прибора составляют 2 Ом. Отклонение показаний прибора от указанного значения – признак обрыва или короткого замыкания.Для проверки силовых контактов из корпуса реле вынимают сердечник и снимают возвратную пружину, после чего вставляют сердечник обратно. Шток сердечника с определенным усилием упирают в стол и заменяют сопротивление уже между контактами. Сопротивление составляет примерно 1,5 Ом.
Основные неисправности
Втягивающее реле хоть и устроено довольно просто, может пострадать от множества внешних и внутренних воздействий. Первое и самое очевидное: разрушение материалов, из которых реле состоит. Вторая и даже более распространенная проблема: выход реле из строя вследствие сгорания контактных пластин (часто их называет пятаками). Третье: сгорание обмотки (тоже весьма частая проблема). Почему горит втягивающее реле стартера? Самая частая причина неисправностей подобного характера кроется в электрохимических процессах, наблюдающихся в реле при попадании воды.
К признакам неисправностей имеющегося в автомобиле втягивающего реле агрегата можно отнести следующее:
- Стартер осуществляет работу даже после запуска ДВС. Выявить это можно по звуку;
- Стартер работает вхолостую. При этом ДВС не запускается;
- Стартер не начал работу после характерного щелчка, сигнализирующего о включении устройства.
Дабы снять подозрения со всех смежных с реле компонентов системы, проделайте следующее:
- Замкнуть контактные болты на тыльной части стартера, пользуясь куском провода. Ток будет идти в обход втягивающее реле;
- Провернуть ключ зажигания. Если стартер начал вращение, проблема точно не в нем, а в реле, силовые контакты которого подгорели;
- Послушать, как работает реле. После проворачивания ключа оно должно щелкать. Если при этом стартер не включился в работу, само реле исправно.
Проще говоря, реле может работать, а сам стартер не вращается, или же и стартер, и реле не работают вовсе. Нередки ситуации, когда реле исправно, но при его работе слышен стук. Причина кроется в плохом контакте между обмотками и «массой». Величина сопротивления исправной втягивающей обмотки составляет 0,55 Ом, тем временем как удерживающей обмотки чуть больше – 0,75 Ом. Сопротивления нужно измерить омметром. Если реальные показатели сопротивлений ниже указанных, можно говорить о произошедшем коротком замыкании в обмотках. Высокий показатель сопротивления говорит о плохом контакте или с клеммами, или с «массой». Для таких проверок лучше не пользоваться лампочкой, так как она будет гореть даже при коротком замыкании.
Также нельзя не рассказать об одной интересной неисправности, которая нехарактерна для правильно изготовленных втягивающих реле. Дело в том, что вывод одной из катушек может быть осуществлен неправильно – при работе катушке начинают компенсировать друг друга. В этом случае нужно покупать новое реле, хотя можно попробовать перепаять концы дефективной катушки.
Схема стартера для ВАЗ 2110, 2111, 2112
На автомобили ВАЗ-2110 устанавливались стартеры типа 57.3708 и имели следующие технические характеристики:
- Номинальная мощность 1,55 кВт
- Потребляемый ток при максимальной мощности не более 375 Ампер
- Потребляемый ток в заторможенном состоянии не более 700 Ампер
- Потребляемый ток в режиме холостого хода не более 80 Ампер
Полезное: Цветовая маркировка проводов однофазной сети
Схема подключения стартера на десятку приведена выше, вот ее расшифровка:
- АКБ
- генератор
- сам стартер
- замок зажигания
1 – вал привода; | 20 – контактные болты; |
2 – втулка передней крышки; | 21 – вывод «положительных» щеток; |
3 – ограничительное кольцо; | 22 – скоба; |
4 – шестерня с внутренним кольцом обгонной муфты; | 23 – щеткодержатель; |
5 – ролик обгонной муфты; | 24 – «положительная» щетка; |
6 – опора вала привода с вкладышем; | 25 – вал якоря; |
7 – ось планетарной шестерни; | 26 – стяжная шпилька; |
8 – прокладка; | 27 – задняя крышка с втулкой; |
9 – кронштейн рычага; | 28 – коллектор; |
10 – рычаг привода; | 29 – корпус; |
11 – передняя крышка; | 30 – постоянный магнит; |
12 – якорь реле; | 31 – сердечник якоря; |
13 – удерживающая обмотка; | 32 – опора вала якоря с вкладышем; |
14 – втягивающая обмотка; | 33 – планетарная шестерня; |
15 – тяговое реле; | 34 – центральная (ведущая) шестерня; |
16 – шток тягового реле; | 35 – водило; |
17 – сердечник тягового реле; | 36 – шестерня с внутренними зубьями; |
18 – контактная пластина; | 37 – кольцо отводки; |
19 – крышка тягового реле; | 38 – ступица с наружным кольцом обгонной муфты. |
Как отремонтировать втягивающее реле стартера
Бывает и так, что реле удается отремонтировать. Заметьте, что далеко не все из этих устройств являются разборными. Если у вас разборное, то все отлично. Но для начала реле нужно снять. Работа состоит из таких этапов:
- Отключить аккумуляторную батарею;
- Снять весь стартер с автомобиля;
- Тщательнейшим образом очистить стартер – грязь и пыль в ходе работы может попасть внутрь агрегата;
- Открутить гайки щеточного узла, после чего ослабить болт контакта втягивающего реле;
- Окрутить винты, фиксирующие реле;
- Заняться осмотром демонтированного реле.
Если реле разборное, то на его торцах будут видны гайки – их нужно открутить и разобрать устройство. Заметьте, что крышка некоторых реле не снимается без предварительной распайки контактов. Имеет смысл вне зависимости от характера неисправности зачистить все токоведущие части (обратите внимание на цвет материалов в местах пригорания). Эксперты рекомендуют при любом ремонте менять сердечник реле на новый. Также может потребоваться замена контактов. Если возвратная пружина была деформирована или ослаблена, ее придется заменить. Если была обнаружена проблема с компенсирующимися катушками, описанная выше, потребуется пайка. При обратной сборке и установке реле уделите особое внимание силе затяжки клемм.
Эксперты не рекомендуют смазывать втягивающее реле стартера, а вот обгонную муфту (бендикс) смазывать можно. При этом не рекомендуется использовать графитную смазку, так как она боится высоких температур, воды, а также довольно быстро высыхает.
Признаки и причины выхода из строя реле
Самым первым симптомом поломки тягового реле – невозможность запустить двигатель. При этом могут быть слышны странные звуки, исходящие от пускового механизма. Чтобы выявить поломку стартера, не нужно быть профессиональным механиком. При повороте ключа машина либо не заведется, либо на это уйдет несколько попыток. Иногда бывает так, что двигатель уже работает, ключ отпущен, но колесико бендикса не отсоединяется от зубчатого венца.
Стартер ВАЗ 2106 втягивающий
Стартер — электромеханический двигатель постоянного тока, на котором установлена электромагнитная тяга рыбы.
На автомобили ВАЗ 2106 предполагается установка стартеров двух марок: на ранних моделях машина стояла СТ-221, а на окнах более поздних выпусков — 35.3708. По моим техническим характеристикам они практически одинаковы, поэтому оба взаимозаменяемы.
Стартер СТ-221 с цилиндрическим коллектором отличается от стартера 35.3708 с конструкцией задней и перемотки стартера, который состоит из двух пар катушек (двух параллельных и двух последовательных). А пускатель 35.3708 в обмоточной конструкции включает один шунтирующий и один беговой.
Признаки и причины Неисправности ВАЗ 2106
Иногда при включении стартера не срабатывает тяговое реле, а сам якорь не вращается . :
- баррачлит или «деревня» Аккумулятор;
- слабый контакт клемм АКБ, в результате окисления гайки или плохой затяжки контактов наконечников;
- короткое замыкание в обмотке втягивающего реле;
- отсоединил провод тягового реле или выключателя зажигания;
- Неисправность контактной части Замок зажигания.
Иногда при включении зажигания тяга копает, якорь вращается или очень медленно вращается . Помимо проблем с АКБ, перечисленных выше:
- неисправность стартера или обмотки якоря, возможный обрыв или замыкание;
- дефект или износ щеток, прожигающий коллектор щеток;
- закрытие щеток в щеткодержателе на «массе».
Когда возможен неестественный шум при пуске стартера , причинами этого могут быть:
- чрезмерный износ втулок подшипников или шейки якорного вала;
- ослаблено крепление стартера или сломана защитная крышка привода;
- при установке стартера произошла поломка;
- сломались или вышли из строя зубья ведущей шестерни или винт маховика;
- Муфта на пазах вала якоря и неработоспособность шестерни происходит от зацепления маховика.
При запуске двигателя время работы стартера не должно превышать 5-7 секунд, повторный запуск должен производиться через 20-30 секунд. Если после трех подходов запуск двигателя не происходит, то следует поискать причину в системе или зажигании двигателя.
Непрерывный I. Длительная работа Стартер может привести к перегреву его обмоток и выходу из строя.
После запуска двигателя срочно выключите стартер, иначе длительное вращение ведущей шестерни маховика может вызвать обгонную муфту стартера.
Если произошла поломка тягового реле, замыкание между витками, сгорел якорный коллектор или прицепное реле, то стартер лучше заменить на новый.
Перед снятием стартера убедитесь, что поломки не вызваны другими причинами, такими как: разряд аккумулятора, окисление проводов, клемм, нарушение контактов электрических цепей и т. Д.
Открутите нижний болт крепления стартер будет удобнее, имея лифт, яму или домкрат с упорами.
Для замены стартера потребуются следующие инструменты:
- ключи на «8», «13»;
- трещотка с комплектом насадок «на 13», «на 14», «на 15»;
- домкрат;
- новый стартер ВАЗ 2106.
Цена стартера ВАЗ 4700 руб. Его аналог от UniPoint с артикулом STRL021 — 4400 руб.
Стоимость актуальна для Москвы и области на лето 2017 года.
Стартер ВАЗ 2106 — очень важный механизм, так как без него водитель не сможет завести свою машину.Следовательно, за драйверами нужно следить за работоспособностью этого устройства.
Какая конструкция у шестеренчатого редуктора стартера?
На ВАЗ 2106, выпускавшуюся после 1980-х годов, установлен стартер с торцевым коллектором модели 35.3708. Еще один редукторный механизм устанавливался на более ранние автомобили Волжского завода — СТ-221, оснащенный коллектором цилиндрической формы. Устройство у них примерно одинаковое, поэтому они полностью взаимозаменяемы.
Разница между этими стартерами следующая: 35.3708 имеет три серийные и одну шунтирующую катушку, а старая модель имеет две катушки указанных типов.
Рассмотрим устройство интересующих нас механизмов подробнее на примере модели 35.3708. Шестерня шестерни стартера состоит из следующих основных частей:
- обмотка возбуждения (т.е. статор) и корпус;
- электропривод с якорем;
- три специальных крышки; Электромагнитное реле прицепа
- с двумя обмотками (одна втягивающая, другая удерживающая).
При помощи болтов корпус стартера крепится к одному блоку с тремя крышками. Якорь интересующего нас механизма имеет стержень, коллектор и вал. Последний из этих элементов совершает вращение в металлокерамических втулках (конструктивно предусмотрено две). Эти втулки запрессовывают в крышки и обязательно пропитывают смазкой. Привод стартера расположен на конце вала. Он включает в себя шестерню и муфту роликовой конструкции, которая необходима для передачи на маховик крутящего момента.
На передней крышке есть реле, состоящее из прыны, нескольких фланцев и сердечника. При включении коробки передач одновременно происходят два процесса: якорь втягивается, и зубчатый привод входит в зацепление с маховиком; Специальная пластина-контакт закрывает болты. Результатом этих процессов является запуск питания обмоток рассматриваемого устройства. Как видим, схема включения и запуска у «шестерки» довольно проста.
Основные неисправности стартера и их причины
То, что описываемый механизм ВАЗ 2106 требует ремонта, обычно сигнализирует о следующих неисправностях:
Также снятие и разборка стартера необходимы в тех случаях, когда он не прокручивается с вращающимся якорем (требуется замена буферной пружины, оси рычага запуска сцепления или другого ее элемента), водитель слышит сильный шум при работе механизма (замене шестерен или втулок), после запуска двигателя стартер не выключается. Последняя ситуация Это вызвано перекосом стартера, поломкой возвратной пружины, заклиниванием рукоятки привода или реле.
Стартер ВАЗ 2106 — как его снятие и замена?
Схема демонтажа старого устройства и подключения нового не требует моторного наконечника приложения спецназа. Снять коробку передач сможет любой, кто «вооружится» необходимым инструментом (отвертки, оправка, несколько ключей — на 10, 8 и 13, молоток, плоскогубцы), внимательно посмотрите видео этого процесса (многим автолюбителям достаточно изучить фото операции так что разборка механизма «без суки и задоринки»).
Схема такой разборки и подключения рабочего устройства проста. Сначала снимаем воздушный фильтр (точнее его корпус). Для этого воспользуемся ключом на 13. Им откручиваем все три болта, которыми фильтр крепится к корпусу КПП. После этого от стартера складываем провода и демонтируем его. Теперь можно переходить к разборке механизма в следующей последовательности.
Стартер на ВАЗ 2106, как и на всех других автомобилях, устройство довольно сложное, поэтому выход из строя одного из его компонентов может привести к полной неработоспособности самого устройства.Очень часто владельцы стараются не ремонтировать при какой-либо поломке, а сразу покупать новый стартер, хотя на самом деле достаточно заменить одну из деталей, и она будет служить по-прежнему.
Обслуживание втягивающего реле — Чиста Пины
Одним из симптомов перегоревшей пятерки втягивающего механизма является проблема с запуском двигателя на горячем, то есть на холоде мотор может нормально запускаться, а на прогретом двигателе уже отказывается крутить стартер.
Эта процедура очень проста, и лучше всего ее выполнять, когда устройство снято с автомобиля.Для этого вам понадобится следующий инструмент:
- Звуковой сигнал к 13
- Головка глубокая для 8
- Гороток или дребезжащая ручка
Сначала необходимо снять втягивающее устройство, а затем открутить три гайки, которые наглядно показаны на фото ниже:
Затем можно прижать болты к болтам так, чтобы они вылезли наружу:
Затем вы можете снять крышку, что наглядно показано ниже на картинке.Только учтите, что он снимается не до конца, так как держит тонкую проводку, поэтому будьте осторожны, не прилагайте лишних усилий:
В центре, как видно на верхнем фото, находится медная пластина. Надо как-то чистить тонкую наждачную бумагу. Но это не все. Теперь берем ключ на 13 и откручиваем две гайки, чтобы снять те самые фиги:
После чего S. inner Их можно вынуть:
Также оба этих Пятака надо зачистить наждачной бумагой до блеска.Вот результат проделанной работы:
А теперь можно установить все на прежнее место в обратном порядке.
Замена щеток стартера на ВАЗ 2106
В зависимости от конструкции устройства щетки могут закрываться либо крышкой, либо так называемой скобкой (фиксатором), как это было на моем аппарате от 2101. В любом случае сложностей добраться до них не возникнет. В первом случае вам нужно будет открутить два болта на крышке, а во втором только один, который стягивает хомут, как показано на фото ниже:
При откручивании болта сам хомут раскачивается и мы получаем доступ к щеткам:
Теперь крестовой отверткой откручиваем болт крепления щетки из любого окна (всего щёток 4 шт):
Затем нужно отогнуть пружину, прижимающую щетку, и снять ее рукой, или поддеть тонкой отверткой, если есть тугая:
И так ухаживает за отходом с места приземления:
Такая же операция проделывается с остальными 3 щетками, которые демонтируются аналогично.Установка проходит в обратном порядке.
Как разобрать стартер ВАЗ 2106 своими руками
Ключом на 10 или головкой откручиваем две гайки на крышке:
После этого снимаем крышку со шпильками, как показано на фото:
После этого можно снимать обмотку вместе с корпусом, так как больше она ничего не держит:
Как видно выше, стартер разобран на две части: обмотку с корпусом и ротор.Для замены обмотки вам понадобится ударная или механическая отвертка под ключ, чтобы открутить болты с четырех сторон корпуса, как наглядно показано ниже:
После этого обмотка снимается без проблем:
Для снятия анкера необходимо отогнуть отвертку с пластиковым держателем, удерживающим его в зацеплении:
После этого снимает без проблем:
А для снятия муфты привода нужно тонкой отверткой сделать стопорное кольцо:
И легко снимаем муфту:
Вот весь процесс, который мне пришлось проделать, чтобы разобрать стартер на автомобиле ВАЗ 2106.Взял инструмент ниже на фото:
Собирайте и заменяйте все производимые нами детали в обратном порядке.
Часто владельцы классических моделей отечественных автомобилей сталкиваются с тем, что стартер ВАЗ 2106 не работает. Рассмотрим самые частые проблемы и способы их устранения.
Водители классических вазов часто сталкиваются с различными неисправностями в процессе эксплуатации автомобиля. О достоинствах и недостатках российских автомобилей можно говорить бесконечно, однако ремонтировать их приходится часто.Тем не менее, благодаря простому и понятному устройству наши автомобили имеют хорошую ремонтопригодность.
Итак, разберем конкретный случай.
ВАЗ 2106 не заводится из-за недостаточного начального усилия стартера. Возможно, вчера классика успешно выполнила свою задачу, но стартер перестал крутить коленвал, а сегодня автомобиль отказал.
Конечно, лучше, если причина в недостаточном заряде аккумуляторной батареи, но если электроприборы исправно работают, фары горят, а коленвал не крутится, стоит оперативно приступить к диагностике.
Стартер всех классических моделей отечественного производителя имеет единое устройство, в связи с чем можно выделить его уязвимые места и общие неисправности. Рассмотрим популярные проблемы стартера ВАЗ 2106, для того, чтобы верно определить причину поломки своими руками.
1. Неисправность первого типа — устройство сработало, но реле втягивающего устройства не выполняет свою функцию.
Причины преуммирования:
- Низкий заряд аккумулятора.
- Окисление проводов или контактов на корпусе аккумулятора.
- Недостаточная фиксация концовок.
- Нарушение герметичности проводов.
- Нарушение функции якоря.
2. При включении стартера ВАЗ 2106 якорь втягивающего механизма вращается с малой скоростью.
Предполагаемые причины поломки:
- Недостаточный заряд аккумулятора.
- Окисление контактов или концов проводов.
- Недостаточная фиксация реле.
- Узел экстремального износа со щетками.
- Нарушение конструкции обмотки.
3. Якорь вращается, но коленчатый вал стоит на месте.
Источники проблем:
- Муфта холостого хода.
- Поломка пружины в буфере.
- Нарушение оси струны.
4. Элемент системы зажигания срабатывает после запуска моторной системы.
- Нарушение хода привода.
- Остроконечные контакты втягивающего реле.
- Нет реакции возвратной пружины.
- Нарушение положения элемента.
5. Дополнительная звуковая поддержка рассматриваемого элемента.
Как правило, причинами шума являются:
- Втулки предельного износа.
- Плохое закрепление элемента зажигания и как следствие — возникновение вибрации.
- Нарушение конструкции шестерни.
Причин может быть несколько. Прежде всего, вы должны увидеть заряд аккумулятора. Ведь наиболее вероятной причиной является ее плохая зарядка, которая зависит от работы электросистемы автомобиля и, особенно, от хорошей работы стартера, читайте:
Ну, чтобы определить необходимость ремонта стартера ВАЗ 2106, нужно знать возможные причины поломок.
Стартерное устройство ВАЗ 2106.
- крышка передняя
- сальник
- обгонная муфта с шестеренчатым приводом
- рычаг приводной
- перегородка
- шарнир Шпилька.
- реле тягового стартера
- регулировочные шайбы
- крышка вала якоря
- стопорная шайба
- задняя крышка стартера
- щеткодержатель
- корпус со статором
- якорь стартера
- привод рычага оси
- стопорное кольцо
- уплотнительное кольцо
- Кольцо ограничительное Шесть тактное
Наиболее частые неисправности.
В целом установленный на ВАЗ 2106 стартер мало чем отличается от стандартных моделей стартера. Поэтому основные проблемы у них тоже практически одинаковые. Вот список поломок стартера, с которыми довольно часто сталкиваются автолюбители:
1. Реле втягивающего устройства не срабатывает и заедает при включении стартера.
- ослабление затяжки наконечника, т.к. заряд АКБ на нуле;
- короткое замыкание в обмотке реле или замыкание на массу,
- выстрел якоря в реле,
- обрыв провода в реле.
Решение — очистить оксидные наконечники аккумулятора или проводов.
2. Если включить стартер, втягивающее реле сработает правильно, а якорь совершает вращательные движения очень медленно или вращение вообще отсутствует.
Это может произойти из-за:
- почти разряженного аккумулятора;
- возможен обрыв проводов в реле или обрыв в обмотке реле;
- цепи в коллекторе, а именно между его пластинами;
- окисление наконечников вывода аккумулятора или проводов.
Решение — проверить износ щеток и зажима болтов на реле.
3. При запуске стартера якорь вращается, но коленчатый вал не крутит.
В такой ситуации проверьте буферную пружину и свободный ход муфты — она может проскальзывать или неисправен рычаг ее включения.
4. После установки станка стартер все равно продолжает работать.
При этом должно быть видно, не прикрывается ли втягивающее реле или рычаг привода, слились контакты реле, проверить работу возвратной пружины на переключателе замка зажигания и посмотреть, не прикрывается ли сам стартер был перекручен.
5. Громкий шум стартера.
Причиной такого шума может быть поломка зубьев шестерни и сильный износ втулок. Проверить само крепление стартера.
Ремонт стартера ВАЗ 2106, инструкция.
Для начала необходимо снять втягивающее устройство стартера, очистить от всевозможных загрязнений, разобрать и промыть все механизмы. Детали после стирки нужно хорошо просушить. После приступаем к детальному осмотру и замерам.
Вооружившись эмерсами, снимите все петли на подвижных механизмах стартера. Если износ все же можно удалить, то воспользуйтесь установкой прокладки или рулона. Хотя лучше, конечно, изношенные вещи заменить.
Заменяем плохую изоляцию и коллекторы. Если пластины коллектора были изношены, их тоже стоит заменить, если нет, то трогать нельзя.
Если есть повреждение на потоке — его можно протолкнуть установкой записи или просто сделать новый поток.
Проверить втулки стартера ВАЗ 2106 на износ и отсутствие повреждений. Делаем это с помощью замера зазора роликов, который не должен быть больше 0,2 миллиметра.
Обмотка также должна быть проверена. Для этого необходимо разобрать корпус стартера и вывернуть винты с клемм крепления наконечников. Снимаем катушки, хорошо их просушиваем и пропитываем изоляционным лаком. Всю поврежденную изоляцию необходимо заменить на новую. Если обнаруживаем окисленные контакты — очищаем их.
После проведения полного осмотра и ремонта стартера ВАЗ 2106 , Последние собирать в обратном порядке. Также рекомендую ознакомиться с моей статьей под названием: «.
Эффективность свободного и инкапсулированного бромелайна in vitro
Sci Rep. 2021; 11: 10195.
, 1 , 2 , 1 , 3 , 4 , 4 , 4 и 4Janaína
1 Артем Атаиде Аспирантура по медицинским наукам, факультет медицинских наук, Школа медицинских наук, Университет Кампинаса (UNICAMP), улица Тессалия Виейра-де-Камарго, 126, Cidade Universitária «Zeferino Vaz», Кампинас, SP 13083-887 БразилияLetícia Caramori Cefali
2 Аспирантура по бионаукам и технологии биоактивных продуктов, Институт биологии, Университет Кампинаса (UNICAMP), Кампинас, Бразилия
Мариана Чеккетто Фигейредо
1 Аспирантура по медицинским наукам, Факультет медицинских наук, Школа медицинских наук Университета Кампинаса (UNICAMP), улица Тессалия Виейра де Камарго, 126, Cidade Universitária «Zeferino Vaz», Кампинас, SP 13083-887 Бразилия
Лусия Элейн де Оливейра Брага
3 Программа аспирантуры по одонтологии, Школа одонтологии Пирасикабы, Университет Кампинаса (UNICAMP), Пирасикаба, Бразилия
Ана Лусия Таска Гойс Руис
4 Факультет фармацевтических наук Университета Кампинас (UNICAMP), улица Candido Portinari, 200, Cidade Universitária ″ Zeferino Vaz ″, Campinas, 13083-871 SP Brazil
Mary Ann Foglio
4 Факультет фармацевтических наук Университета Кампинас (UNICAMP), улица Candido Portinari , 200, Cidade Universitária ″ Zeferino Vaz ″, Campinas, 13083-871 SP Brazil
Laura Oliveira-Nascimento
4 Факультет фармацевтических наук, Университет Кампинаса (UNICAMP), улица Кандидо Портинари, 200, Cidade ″ Zeferino Universitária Vaz ″, Campinas, 13083-871 SP Brazil
Priscila Gava Mazzola
4 Факультет фармацевтических наук, Университет Кампины s (UNICAMP), улица Кандидо Портинари, 200, Cidade Universitária ″ Zeferino Vaz ″, Кампинас, 13083-871 SP Бразилия
1 Программа повышения квалификации медицинских наук, Факультет медицинских наук, Школа медицинских наук, Университет Кампинаса ( UNICAMP), Tessália Vieira de Camargo Street, 126, Cidade Universitária «Zeferino Vaz», Campinas, SP 13083-887 Brazil
2 Программа для аспирантов в области биологических наук и технологии биоактивных продуктов, Институт биологии Университета Кампинаса (UNICAMP) , Кампинас, Бразилия
3 Аспирантура по одонтологии, Школа одонтологии в Пирасикабе, Университет Кампинаса (UNICAMP), Пирасикаба, Бразилия
4 Факультет фармацевтических наук, Университет Кампинаса (UNICAMP), улица Кандидо Портинари , 200, Cidade Universitária ″ Zeferino Vaz ″, Campinas, 13083-871 SP Brazil
Автор, ответственный за переписку.Поступило 18.03.2021 г .; Принято 2021 апр.
Открытый доступ Эта статья находится под международной лицензией Creative Commons Attribution 4.0, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или любом формате при условии, что вы надлежащим образом укажете оригинал Автор (ы) и источник предоставляют ссылку на лицензию Creative Commons и указывают, были ли внесены изменения. Изображения или другие сторонние материалы в этой статье включены в лицензию Creative Commons для статьи, если иное не указано в кредитной линии для материала.Если материал не включен в лицензию Creative Commons для статьи и ваше предполагаемое использование не разрешено законом или превышает разрешенное использование, вам необходимо получить разрешение непосредственно от правообладателя. Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Эта статья цитируется в других статьях PMC.Abstract
На протяжении веков бромелайн использовался для лечения ряда заболеваний, хотя механизм его действия до конца не изучен.Его терапевтические преимущества включают ферментативную очистку некротических тканей язв и ожоговых ран, а также противовоспалительные, противоопухолевые и антиоксидантные свойства. Однако протеаза нестабильна и со временем подвержена самогидролизу. Чтобы преодолеть проблемы стабильности бромелаина, в предыдущем исследовании были сформулированы наночастицы хитозан-бромелаин (C-B-NP). Мы оценили оптимизированную наноформулу на антиоксидантную активность in vitro, антипролиферативную активность клеток и миграцию / пролиферацию клеток в анализе царапин, сравнивая ее со свободным бромелайном.Антиоксидантная активность свободного бромелаина зависела от концентрации и времени; после инкапсуляции уровень активности упал, вероятно, из-за медленного высвобождения белка из наночастиц. Антипролиферативная активность in vitro наблюдалась в шести линиях опухолевых клеток в отношении свободного белка через 48 часов лечения (глиома, молочная железа, яичники, простата, аденокарцинома толстой кишки и хронический миелоидный лейкоз), но не в отношении клеток кератиноцитов, что позволяет использовать его в качестве активного местного лечения . В свою очередь, C-B-NP ингибировал только одну клеточную линию (хронический миелоидный лейкоз) и требовал более высоких концентраций для ингибирования.После 144-часовой обработки клеток глиомы C-B-NP ингибирование роста было эквивалентно ингибированию, вызываемому свободным белком. Этот последний результат подтвердил кинетику замедленного высвобождения оптимизированного состава и целостность бромелаина. Наконец, скретч-анализ с клетками кератиноцитов показал, что C-B-NP достиг более 90% ретракции раны через 24 часа по сравнению с отсутствием ретракции со свободным бромелайном. Следовательно, наноинкапсуляция бромелаина с хитозаном придает препарату физическую защиту, замедленное высвобождение и активность ретракции ран, свойства, которые благоприятствуют препаратам для местного применения с модифицированным высвобождением.Кроме того, многообещающие результаты с клеточной линией глиомы указывают на дальнейшие исследования C-B-NP для противоопухолевого лечения.
Тематические термины: Доставка лекарств, наночастицы
Введение
Ананас обыкновенный Ananas comosus L. веками использовался в медицине коренными жителями Центральной и Южной Америки для лечения ряда заболеваний, в основном пищеварительной. расстройства и заживление ран 1 , 2 . Его лечебные свойства приписываются бромелайну, смеси протеаз и непротеазных компонентов, включая другие ферменты (фосфатазы, глюкозидазы, пероксидазы и целлюлазы), гликопротеины и углеводы 3 .
В нескольких исследованиях утверждается, что бромелайн имеет широкий спектр медицинских применений, таких как ингибирование агрегации тромбоцитов, фибринолиза, модуляция иммунных и воспалительных реакций, антиоксидантная, антибактериальная и противогрибковая активность, повышенное всасывание других лекарств, санация кожи, помощь пищеварению, улучшенное заживление ран и антиканцерогенное действие 4 — 9 . Бромелайн продается как пищевая добавка в магазинах здоровья в Соединенных Штатах и Европе и показан для укрепления здоровья пищеварительной системы, а также как средство для лечения ран и противовоспалительное средство 10 , 11 .Особое внимание было уделено антиоксиданту бромелаина 12 и антипролиферативной активности 1 — 3 , 10 , 13 — 15 и его ранозаживляющим свойствам 5 , 17 .
Системы доставки лекарств меняют методы лечения болезней, и в этой области появились нанотехнологии. Эти системы доставки направлены на повышение эффективности лекарств за счет увеличения биодоступности активных лекарств и уменьшения их побочных эффектов 13 .Кроме того, системы наночастиц предлагают другие преимущества в виде расширения терапевтического воздействия лекарств на участки-мишени и повышения стабильности лекарственного средства против химического и ферментативного разложения 18 .
Терапевтические белки представляют собой особую проблему для лекарственной терапии, в первую очередь из-за их иммуногенности и воспалительного потенциала, а также физической и химической деградации 19 , 20 . Следовательно, нанотехнология для доставки белковых лекарств кажется правдоподобной стратегией для производства безопасных и эффективных терапевтических белковых препаратов и стабилизации белковых лекарств от денатурации путем ферментативного расщепления, тем самым увеличивая их биофармацевтические применения 21 — 24 .
Хитозан — это природный полисахарид, получаемый в результате деацетилирования хитина, которого очень много. Хитозан обладает благоприятными характеристиками, такими как биосовместимость, биоразлагаемость и мукоадгезия, несмотря на ускорение заживления ран, что делает его полезным в фармацевтической промышленности, особенно в системах доставки лекарств 25 . Для получения наночастиц хитозана использовалось несколько различных методов, но часто отдается предпочтение ионотропному гелеобразованию, так как это простой, мягкий и контролируемый процесс 26 .Кроме того, бромелайн уже успешно инкапсулирован в наночастицы хитозана нашей группой 27 , 28 .
Учитывая, что наноинкапсуляция изменяет стабильность белков и другие параметры, в этом исследовании была проведена серия анализов in vitro для изучения активности бромелаина in vitro до и после процесса наноинкапсулирования. Наша цель состояла в том, чтобы оценить поддержание активности бромелайна после процессов инкапсуляции, сравнивая эффективность свободного и инкапсулированного бромелайна в серии действий in vitro, т.е.е., антиоксидантная активность, антипролиферативные эффекты на опухолевые и неопухолевые клеточные линии, а также миграция и пролиферация кератиноцитов в царапинном анализе. После того, как хитозан приобрел хорошо известные и зарегистрированные свойства, были также изучены C-NP, чтобы выяснить, можно ли приписать наблюдаемые эффекты бромелайну или хитозану.
Результаты
Наночастицы хитозана и хитозана-бромелаина
Наночастицы хитозана (C-NP) и хитозана-бромелаина (C-B-NP) были успешно получены и охарактеризованы методом динамического светорассеяния (рис.). Включение бромелайна способствовало уменьшению среднего размера частиц (118,9 ± 2,3) и небольшому увеличению индекса полидисперсности (0,260 ± 0,015) по сравнению с пустыми наночастицами хитозана (254,5 ± 1,4 и 0,222 ± 0,004 соответственно). Дзета-потенциал также изменился при инкапсуляции белка с 32,7 ± 1,2 (C-NP) до 21,1 ± 2,2 (C-B-NP).
Распределение интенсивности C-NP и C-B-NP по размерам при динамическом рассеянии света. Результат представлен в виде средних данных трех измерений и создан авторами с помощью программного обеспечения Zetasizer (версия 8.01.4906, Malvern Panalytical).
Антиоксидантная активность in vitro
В этом исследовании антиоксидантная активность суспензий свободного бромелаина, C-NP и CB-NP оценивалась с использованием 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (DPPH, рис. A) и 2, Радикалы 2-азино-бис-3-этилбензотиазолин-6 сульфоновой кислоты (ABTS, рис. B). Свободный бромелайн показал более высокую антиоксидантную активность против DPPH, чем C-B-NP. C-B-NP показал до 40% ингибирования DPPH, что эквивалентно почти половине эффективности свободного бромелаина (89%). Такое снижение может быть связано с недоступным количеством бромелаина.Ингибирование инкапсулированным активным веществом увеличивалось до 57% через 24 часа, вероятно, в результате действия свободного или связанного с поверхностью бромелаина.
Антиоксидантная активность с использованием радикалов ( A ) 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH) и ( B ) 2,2-азино-бис-3-этилбензотиазолин-6-сульфоновой кислоты (ABTS). Бром, раствор бромелаина, Chi-Brom NP, наночастицы хитозан-бромелаина. Графики были созданы авторами с использованием средних данных со стандартным отклонением (n = 3) из анализа антиоксидантов с использованием программного обеспечения Origin (версия 8.1.34.90, OriginLab Corporation).
Что касается радикала ABTS, свободный бромелайн показал значительную антиоксидантную активность сразу после 24 часов инкубации, которая возрастала с увеличением концентрации и достигала 88% ингибирования радикалов. Инкапсулированный белок ингибировал радикалы ABTS только в течение 24 часов, но без концентрации, зависящей от концентрации, и до 20% ингибирования. Примечательно, что для 50% -ного ингибирования ABTS через 24 часа требуется гораздо больше бромелаина (50% об. / Об.), Чем для ингибирования DPPH (между 12.5 и 6,25%). Следовательно, количество доступного белка в инкапсулированном составе может быть недостаточным для выявления зависимого от концентрации паттерна.
Антипролиферативный анализ in vitro
Состоит из смеси протеаз вместе с некоторыми другими ферментами и белками, есть некоторые свидетельства потенциальных преимуществ бромелайна при лечении рака. 29 . В нашем исследовании мы оцениваем антипролиферативный эффект свободного и наноинкапсулированного коммерческого бромелаина на панели из восьми линий опухолевых клеток человека различного гистологического или генетического происхождения и одной линии неопухолевых клеток человека (таблица, рис.). Выраженный как концентрация бромелаина, необходимая для подавления 50% роста клеток (GI 50 ), свободный бромелайн показал слабые антипролиферативные эффекты против U251 (глиобластома, GI 50 = 44,9 мг / мл) и K562 (лейкемия, GI 50). = 60,7 мг / мл) клеточных линий. Более того, все три образца (свободный и нанокапсулированный бромелайн, кроме пустых наночастиц хитозана) не влияли на пролиферацию иммортализованных кератиноцитов (HaCaT, GI 50 > 250 мг / мл) (таблица).
Таблица 1
Антипролиферативный эффект in vitro, выраженный как концентрация, необходимая для 50% ингибирования роста клеток (GI 50 , мкг / мл) доксорубицина (положительный контроль), раствора свободного бромелаина, наночастиц хитозана-бромелаина (CB- NP) и наночастицы хитозана (C-NP) после 48-часовой выдержки.
Клеточные линии b | GI 50 a | |||
---|---|---|---|---|
Доксорубицин c | Бромелайн c | 2 NP NP 905|||
U251 | <0.025 | 44,9 * | > 250 | 250 |
MCF7 | <0,025 | 160,0 ± 63,2 | > 250 | > 250 |
95792 | 9092 9057 0,057 0,057 0,079 | > 250 | > 250 | |
NCI-ADR / RES | 0,24 ± 0,06 | > 250 | > 250 | > 250 |
NCI-h560 2 | <0,092 | > 250 | > 250 | |
PC-3 | 0.23 * | 139,5 ± 129,7 | > 250 | > 250 |
HT29 | 0,13 ± 0,06 | 220,4 ± 1,3 | > 250 | > 250 |
9091 0,01 * | 204,4 ± 124,5 | > 250 | ||
HaCaT | <0,025 | > 250 | > 250 | > 250 |
Антипролиферативная активность 605 9060- Наночастицы бромелаина ( B ), наночастицы хитозана ( C ) и доксорубицин ( D ) после 48-часовой экспозиции.Графики были созданы авторами с использованием средних данных со стандартным отклонением (n = 3) из антипролиферативного анализа с использованием программного обеспечения Origin (версия 8.1.34.90, OriginLab Corporation).
Мы также оценили антипролиферативную активность после 144 часов лечения в клеточных линиях U251 (глиобластома) и HaCaT (иммортализованные кератиноциты). Первая была наиболее чувствительной к бромелайну клеточной линией в первом эксперименте по антипролиферативной активности, в то время как вторая клеточная линия была репрезентативной для кожи.Как показано в таблице и на фиг., Антипролиферативные эффекты свободного и наноинкапсулированного бромелаина против клеток U251 зависели от времени. Более того, более длительное воздействие позволило высвободить бромелайн из наночастиц хитозана, что привело к аналогичному антипролиферативному эффекту. Кроме того, как и в первом антипролиферативном эксперименте, пустые наночастицы хитозана не влияли на пролиферацию клеток.
Таблица 2
Зависящий от времени антипролиферативный эффект in vitro, выраженный как концентрация, необходимая для индукции общего ингибирования роста клеток (TGI, мкг / мл), доксорубицина (положительный контроль), раствора свободного бромелаина, наночастиц хитозана-бромелаина (CB- NP) и наночастицы хитозана (C-NP).
Клеточные линии b | TGI a | |||
---|---|---|---|---|
U251 | HaCaT | |||
48 c | 14417 905 907 905 | |||
Доксорубицин d | 0,26 ± 0,09 | 0,09 ± 0,08 | 0,09 ± 0,01 | 0,11 ± 0,06 |
Бромелайн 92 25 | > 250 | 119,3 ± 21,4 | ||
CB-NP d | > 250 | 0,25 | > 250 | > 250 |
C-NP 92 | > 250 | > 250 | > 250 |
Антипролиферативная активность раствора свободного бромелаина ( A ), наночастиц хитозан-бромелаина ( B ), наночастиц хитозана ( C ) D ), после 144 ч экспозиции.Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение; n = 3. Графики были созданы авторами с использованием средних данных со стандартным отклонением (n = 3) из антипролиферативного анализа с использованием программного обеспечения Origin (версия 8.1.34.90, OriginLab Corporation).
Анализ царапин in vitro
Основываясь на наблюдаемых антипролиферативных эффектах на иммортализованные кератиноциты, мы оценили влияние свободного и наноинкапсулированного бромелаина вместе с пустыми наночастицами хитозана на пролиферацию и миграцию HaCaT с использованием анализа царапин in vitro.Учитывая три оцененных времени конечных точек (9, 18 и 24 часа), добавление фетальной бычьей сыворотки ускоряло ретракцию раны после 9 и 18 часов воздействия по сравнению с необработанными клетками (рис.). Что касается лечения, свободный бромелайн снижал миграцию и пролиферацию клеток ( p <0,001) через 18 и 24 часа по сравнению с необработанными клетками.
Репрезентативные микрофотографии клеток HaCaT (неопухолевых кератиноцитов человека), обработанных 250 мкг / мл контролей и образцов в течение 0, 9 и 18 часов (A), и процент ретракции царапин для контролей и образцов при ретракции царапин во время периода анализа (B ). FBS фетальная бычья сыворотка, НЧ Chi-Brom, наночастиц хитозан-бромелаин, НЧ Chi, наночастиц хитозана. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение; n = 4. Буквы представляют статистическую значимость при сравнении обработок в один и тот же момент времени с помощью теста Тьюки: a p <0,05 при сравнении царапающей среды + FBS и царапающей среды; b p <0,001 при сравнении скретч-среды + FBS и бромелаина; c p <0.001, сравнивающий бромелайн с другими препаратами. Репрезентативные микрофотографии были выбраны из микрофотографий, сделанных авторами во время царапин in vitro. Эти микрофотографии использовались для расчета площади раны и процента закрытия раны во время анализа, который использовался авторами для создания графика.
Кроме того, как пустые наночастицы хитозана (C-NP), так и нанокапсулированный бромелаин (C-B-NP) показали профиль ретракции царапины, подобный тому, который наблюдается для необработанных клеток. Только на 18-часовой конечной точке C-B-NP частично увеличивал ретракцию царапины, показывая незначительные различия по сравнению как с необработанными, так и с клетками, обработанными 5% FBS.
Обсуждение
Характеристики C-B-NP соответствовали нашим ранее опубликованным данным 27 , 28 . Снижение дзета-потенциала может быть связано с отрицательным зарядом поверхности бромелаина при pH 5,0 30 , который способствует электростатическому взаимодействию между хитозаном и бромелайном с последующим уменьшением свободных положительных групп хитозана. Несмотря на увеличение PDI, наблюдаемого в C-B-NP по сравнению с C-NP, обе наночастицы можно считать умеренно полидисперсными (значения PDI между 0.1 и 0,4 31 ). Эффективность инкапсуляции C-B-NP соответствовала ранее опубликованным результатам 27 , 28 . Кинетика высвобождения белка не проводилась из-за ранее сообщенной нестабильности в соответствующей физиологической среде с течением времени другими авторами и нашей группой 28 . В этом же исследовании , , 28, , , ПЭМ-характеристика NP была проведена и опубликована. Под наблюдением ПЭМ частицы имели сферическую форму с небольшими частицами, агрегированными в агломераты размером 100 нм.
Антиоксидантная активность против радикалов DPPH и ABTS зависела от концентрации и времени инкубации. Бромелайн ранее был протестирован против DPPH, и наши результаты для 30-минутной реакции (0 ч) были аналогичны ранее сообщенным, что подтверждает воспроизводимость теста 12 , 32 . Снижение антиоксидантной активности инкапсулированного бромелаина подтверждает его высокую скорость инкапсуляции и вероятную кинетику замедленного высвобождения. Белки могут проявлять антиоксидантные свойства за счет физического взаимодействия с металлами, свободными радикалами и другими молекулами, а также за счет химического окисления их структуры, помимо других специфических механизмов 33 .Взаимодействие бромелаин-хитозан, о чем свидетельствуют изменения дзета-потенциала, вероятно, ослабляет свободные сайты связывания, которые в противном случае способствовали бы антиоксидантной активности.
Различные эксперименты продемонстрировали, что цитотоксические эффекты наночастиц бромелаина положительно коррелировали со временем инкубации, поскольку увеличение времени воздействия приводило к более интенсивному эффекту. Принимая во внимание сложный химический состав бромелайна, есть некоторые сообщения о корреляции фармакологической эффективности в качестве противоопухолевых и / или иммуногенных агентов с протеолитической активностью бромелаина 6 .
Противораковый механизм действия бромелаина был исследован на различных линиях опухолевых клеток. Бромелайн увеличивает количество активных форм кислорода и уровни супероксида, что приводит к высокой индукции аутофагии в клетках колоректального рака. Повышение количества апоптотических белков, запускающих каспазозависимые и независимые пути апоптоза, также наблюдалось в клетках аденокарциномы толстой кишки человека 34 . Сообщалось о снижении экспрессии поверхностного маркера CD44, участвующего в пролиферации и миграции опухоли, после лечения бромелайном клеток лейкемии, меланомы и глиомы 35 , 36 .Это снижение объяснялось протеолитической активностью бромелаина, расщеплением рецепторов клеток и приводило к снижению клеточной инвазии, миграции и адгезии в клетках глиомы 36 . Расщепление трансмембранных белков также может вмешиваться во внутриклеточный процесс передачи сигналов 36 , 37 .
Хотя свободный бромелайн не влиял на пролиферацию иммортализованных кератиноцитов после 48 часов воздействия (тест на антипролиферативную активность), он подавлял миграцию и пролиферацию того же штамма кератиноцитов в скретч-модели.Это можно объяснить отсутствием фетальной бычьей сыворотки (FBS). FBS содержит различные вещества, которые действуют как индукторы миграции и пролиферации клеток. Поэтому экспериментальная модель царапины была стандартизирована с уменьшением и / или полным подавлением сыворотки, по крайней мере, в период обработки клеток исследуемыми образцами. Следствием отказа от FBS является снижение концентрации белков, присутствующих в культуральной среде. Таким образом, протеолитическое действие бромелайна могло влиять на клетки более непосредственно, чем в условиях культивирования со средой с добавлением 5% FBS.О подобном эффекте сообщили Schulz et al. 38 при сравнении эффекта состава, содержащего бромелайн, на жизнеспособность человеческих фибробластов и кератиноцитов (первичные культуры) в полной культуральной среде или в фосфатно-солевом буфере (PBS). Замена культуральной среды на PBS усилила цитотоксический эффект бромелаина на обе оцениваемые клетки.
Тем не менее, другие исследования показали, что различные препараты бромелаина могут вызывать остановку клеточного цикла в фазе G0 (покой), что объясняет ингибирование пролиферации клеток 39 .Эти результаты подтверждают понимание того, что заживляющий эффект бромелайна при уходе за ранами в основном обусловлен его очищающим действием, которое удаляет клеточный дебрис и некротические ткани in vivo, в соответствии с другими исследованиями 6 , 38 , 40 , 41 .
Будучи промисорным биополимером по многим причинам, полимеры хитозана были описаны как промоторы заживления ран, стимулирующие пролиферацию фибробластов и синтез коллагена IV типа 32 , 42 , 43 .Более того, этот фармакологический эффект может регулироваться сортом полимера, степенью N-деацетилирования и присутствием других лигандов 42 , 44 . В нашем исследовании, хотя наночастицы хитозана не увеличивали миграцию или пролиферацию клеток, они смогли избежать ингибирующего действия свободного бромелаина (рис.).
Заключение
Данные, полученные в использованных моделях in vitro, позволяют предположить, что система наноинкапсулирования позволяет пролонгировать высвобождение бромелаина, что приводит к антиоксидантным и антипролиферативным эффектам в зависимости от времени воздействия.Через 48 часов свободный бромелайн оказывал антипролиферативное действие против шести линий опухолевых клеток. Напротив, C-B-NP ингибировал пролиферацию только линии клеток хронического миелоидного лейкоза, и для этого эффекта требовалась более высокая концентрация, чем у свободного бромелаина. После 144 ч обработки свободный бромелайн и C-B-NP полностью подавляли рост клеток глиомы, подтверждая целостность бромелаина и кинетику замедленного высвобождения. Во время антипролиферативного анализа свободный и инкапсулированный бромелайн не подавлял рост клеток кератиноцитов, что позволяло использовать их местно.Наконец, в анализе царапин C-B-NP способствовал более чем 90% ретракции раны через 24 часа, в отличие от свободного бромелаина, который не вызывал ретракции раны. Хитозан, используемый в качестве материала стенок в наноинкапсулировании, также добавил к окончательному составу свойство ретракции ран. Следовательно, наноинкапсуляция бромелаина с хитозаном придает препарату физическую защиту, замедленное высвобождение и активность ретракции ран, свойства, которые благоприятствуют препаратам для местного применения с модифицированным высвобождением. Кроме того, многообещающие результаты с клеточной линией глиомы указывают на дальнейшие исследования C-B-NP для противоопухолевого лечения.
Материалы и методы
Материалы
Бромелайн, экстрагированный из стебля ананаса (каталожный номер B4882), низкомолекулярный хитозан (каталожный номер 448869), азоказеин (каталожный номер A2765) и реагент Брэдфорда (каталожный номер B6916) были приобретены у Sigma- Олдрич (Сан-Паулу, Бразилия). Все остальные реагенты были аналитической чистоты.
Состав и характеристика наночастиц хитозана и хитозана-бромелаина
C-B-NP получали методом ионотропного гелеобразования, как описано ранее 27 , 28 .Вкратце, раствор TPP (0,5 мг / мл в дистиллированной воде, профильтрованный через 0,22 мкм, 3 мл) добавляли по каплям к раствору низкомолекулярного хитозана (2,5 мг / мл в 1% (об. / Об.) Уксусной кислоте при pH 5,0, и фильтровали при 0,45 мкм, 2 мл). Сразу после этого добавляли 1 мл отфильтрованного с размером пор 0,22 мкм раствора бромелаина (10 мг / мл) или воды и перемешивали при перемешивании магнитной мешалкой (Fisatom, Mod 753E, Сан-Паулу, Бразилия) при 350 об / мин в течение 40 минут с получением хитозан-бромелаина ( CB-NP) или наночастицы хитозана (C-NP) соответственно.
Физико-химические параметры среднего размера частиц, индекса полидисперсности и дзета-потенциала определяли с использованием прибора Zetasizer Nano ZS90 (Malvern Instruments, Malvern, UK) без предварительного разбавления.
Антиоксидантная активность in vitro
Антиоксидантная активность оценивалась с использованием 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (DPPH) и 2,2-азино-бис-3-этилбензотиазолин-6 сульфоновой кислоты (ABTS) 45 — 47 . Пять различных концентраций образцов были приготовлены путем разбавления тестируемых образцов (раствор бромелаина, хитозан-бромелаин и наночастицы хитозана) в дистиллированной воде для получения конечных концентраций 6.25%, 12,5%, 25%, 50% и 100% (об. / Об.). Обычно 2,5 мл образца смешивали с 2,5 мл раствора радикала DPPH, инкубировали в течение 30 минут и считывали при 531 нм. Для анализа ABTS 30 мкл образца смешивали с 3 мл раствора радикала ABTS, встряхивали в течение 6 минут и считывали при 734 нм. После первого измерения образцы были герметично закрыты и защищены от света, и через 24 часа была проведена повторная проверка оптической плотности. В качестве отрицательного антиоксидантного контроля использовали воду. C-NP представляют небольшое ингибирование DPPH и ABTS; таким образом, его абсорбция учитывалась и выводилась из абсорбции C-B-NP.Способность к связыванию свободных радикалов была рассчитана по отношению к поглощению раствора радикалов водой следующим образом:
% ингибирования = Abscontrol-AbssampleAbscontrol × 100
1
Анализы in vitro
Клеточные линии
Панель из восьми Были протестированы линии опухолевых клеток человека: U251 (глиома), MCF-7 (молочная железа), OVCAR-03 (яичник), NCI-ADR / RES (яичник, экспрессирующий фенотип множественной лекарственной устойчивости), NCI-h560 (легкое, немелкое). клетки), PC-3 (простата), HT-29 (аденокарцинома толстой кишки) и K-562 (хронический миелоидный лейкоз).Эти клетки были любезно предоставлены Центром исследований и разработок рака имени Фредерика (Национальный институт рака, Фредерик, Массачусетс, США). Линия неопухолевых клеток человека HaCat (кератиноциты) была предоставлена доктором Рикардо Делла Колетта (Университет Кампинас-UNICAMP, Бразилия). Для всех экспериментов использовали все клеточные линии между пассажами 5 и 12.
Исходные культуры выращивали в 5 мл RPMI-1640 с добавлением 5% фетальной бычьей сыворотки (RPMI / FBS 5%) и 1% смеси пенициллин: стрептомицин. (1000 Ед / мл: 1000 мкг / мл) (полная среда) при 37 ° C и 5% CO 2 .Для скретч-анализа образцы разводили в RPMI-1640 с добавлением 0,2% фетальной бычьей сыворотки и 1% смеси пенициллин-стрептомицин (1000 Ед / мл: 1000 мкг / мл) (скребковая среда).
Подготовка образца
Исходные растворы бромелаина, CB-NP и C-NP (5 мг / мл) готовили в воде, а затем последовательно разбавляли полной (антипролиферативный анализ) или царапающей (анализ царапиной) средой до достижения конечной концентрации 0,25. , 2,5, 25 и 250 мкг / мл (антипролиферативный анализ) и 250 мкг / мл (царапающий анализ).Доксорубицин (0,025, 0,25, 2,5 и 25 мкг / мл) использовали в качестве положительного контроля ингибирования пролиферации культивируемых клеток, а полную среду использовали в качестве положительного контроля для ретракции раны в анализах царапин.
Антипролиферативный анализ
Клетки в 96-луночных планшетах (100 мкл клеток / лунка) подвергали воздействию образцов различных концентраций (0,25, 2,5, 25 и 250 мкг / мл) в трех экземплярах с последующей инкубацией в течение 48 или 144 часов. ч при 37 ° C и 5% CO 2 . Клетки из планшетов без (планшеты T0) или с добавлением образцов (планшеты T1) фиксировали 50% трихлоруксусной кислотой (50 мкл / лунку), а пролиферацию клеток определяли количественным определением белка сульфородамином B при 540 нм 48 — 50 .Значения GI 50 (концентрация, которая ингибирует 50% рост клеток или цитостатический эффект) определяли посредством сигмоидальной регрессии с использованием программного обеспечения Origin (версия 8.0, OriginLab Corporation, США).
Анализ царапин
Для анализа царапин клетки HaCaT суспендировали в полной среде, распределяли по 12-луночным планшетам и инкубировали не менее 24 ч при 37 ° C и 5% CO. 2 . После достижения слияния рану наносили по прямой линии в каждую лунку с помощью стерильного наконечника пипетки p200 с последующим удалением среды.После промывания каждой лунки скретч-средой (1 мл / лунка) для удаления дебриса клетки обрабатывали скребковой средой (необработанной), обрабатывали полной средой (5,0% фетальной телячьей сыворотки, положительный контроль) или образцы, разбавленные в скребковой среде. Степень закрытия раны наблюдали с помощью обращенно-фазового микроскопа Leika, оснащенного цифровой камерой Optikam B3 (Optika, Италия), в 0, 9, 18 и 24 часа 51 , 52 . Образцы были протестированы в двух экземплярах, и из каждой лунки было получено по два изображения.Изображения, полученные для каждого образца в разное время, были количественно проанализированы с использованием программного обеспечения для анализа ImageJ 1.8.0, бесплатной программы обработки и анализа изображений. Для всех обработок в момент времени 0 поцарапанная область считалась равной 100%, и, таким образом, ретракция раны принималась равной 0%. В моменты времени, отличные от 0, процент ретракции раны рассчитывали согласно формуле. ( 2 ).
% ретракции раны = A0-AtA0 × 100
2
, где A 0 — начальная область ранения, полученная сразу после царапины, а A t — площадь раны при t часов (9 ч, 18 ч. или через 24 ч) после царапания клеточного слоя.
Статистический анализ
Результаты выражены в виде среднего значения ± стандартное отклонение. Программное обеспечение Zetasizer (версия 8.01.4906, Malvern Panalytical) использовалось для сбора и анализа данных динамического светорассеяния. Программное обеспечение ImageJ 1.8.0 использовалось для количественного анализа поцарапанной области в анализе царапин. Статистический анализ скретч-анализа был выполнен с помощью смешанного дисперсионного анализа (ANOVA), в котором независимой переменной было примененное лечение, а зависимой переменной было закрытие раны в три разных периода времени (9, 18 или 24 часа), за которым следовало лечение. Тест Тьюки, сравнивающий лечение одновременно.Данные были проанализированы с использованием IBM SPSS Statistics версии 24 и Origin (версия 8.1.34.90, OriginLab Corporation, США), и p <0,05 считалось значимым.
Благодарности
Автор выражает признательность FAPESP (2015 / 15068-5, 2016 / 03444-5), CNPq (404229 / 2016-6, 301436 / 2017-7) и FAEPEX за финансовую поддержку.
Вклад авторов
J.A.A. и П.Г.М. задуманная идея исследования и дизайн исследования. J.A.A. провели исследования, проанализировали полученные данные и написали основной текст рукописи.L.C.C., M.C.F. и L.E.d.O.B. провели и проанализировали клеточные анализы in vitro. A.L.T.G.R. и M.A.F. структурированные анализы клеток in vitro. L.O.N. и П.Г.М. руководил всеми исследовательскими экспериментами и анализировал результаты с J.A.A. Все авторы критически рассмотрели рукопись.
Конкурирующие интересы
Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.
Сноски
Примечание издателя
Springer Nature сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий на опубликованных картах и принадлежностей организаций.
Ссылки
1. Gani MBA, et al. Антипролиферативная активность свежих ананасовых соков in vitro в отношении клеточных линий рака яичников и толстой кишки. Int. J. Pept. Res. Ther. 2015; 21: 353–364. DOI: 10.1007 / s10989-015-9462-z. [CrossRef] [Google Scholar] 2. Амини А. и др. Цитотоксические эффекты бромелайна в клеточных линиях карциномы желудочно-кишечного тракта человека (MKN45, KATO-III, HT29-5F12 и HT29-5M21). Onco Targets Ther. 2013; 6: 403–409. DOI: 10.2147 / OTT.S43072. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3.Чоботова К., Верналлис А.Б., Маджид ФАА. Активность и потенциал бромелайна как противоракового агента: текущие данные и перспективы. Cancer Lett. 2010. 290: 148–156. DOI: 10.1016 / j.canlet.2009.08.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Бала М. и др. Производство бромелайна: современные тенденции и перспективы. Arch. Sci. 2012; 65: 369–399. [Google Scholar] 5. de Lencastre Novaes LC, et al. Стабильность, очистка и применение бромелайна: обзор. Biotechnol. Прог. 2016; 32: 5–13. DOI: 10.1002 / btpr.2190. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Maurer HR. Бромелайн: биохимия, фармакология и медицина. Клетка. Мол. Life Sci. CMLS. 2001; 58: 1234–1245. DOI: 10.1007 / PL00000936. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Мухаммад З.А., Ахмад Т. Терапевтическое использование бромелайна, извлеченного из ананаса, в хирургической помощи — обзор. JPMA J. Pak. Med. Доц. 2017; 67: 121–125. [PubMed] [Google Scholar] 8. Рамли АНМ, Азнан ТНТ, Иллиас Р.М. Бромелайн: от производства до реализации. J. Sci. Продовольственное сельское хозяйство. 2017; 97: 1386–1395.DOI: 10.1002 / jsfa.8122. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Датта С., Бхаттачарья Д. Ферментативные, антимикробные исследования и исследования токсичности водного экстракта кроны листьев ананаса Ananas comosus (ананас). J. Ethnopharmacol. 2013; 150: 451–457. DOI: 10.1016 / j.jep.2013.08.024. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Романо Б. и др. Химиопрофилактическое действие бромелаина из стебля ананаса ( Ananas comosus L.) на канцерогенез толстой кишки связано с антипролиферативными и проапоптотическими эффектами.Мол. Nutr. Food Res. 2014; 58: 457–465. DOI: 10.1002 / mnfr.201300345. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Taussig SJ, Batkin S. Бромелайн, ферментный комплекс ананаса ( Ananas comosus ) и его клиническое применение. Обновление. J. Ethnopharmacol. 1988; 22: 191–203. DOI: 10.1016 / 0378-8741 (88)-4. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Manosroi A, Chankhampan C, Pattamapun K, Manosroi W, Manosroi J. Антиоксидантная и желатинолитическая активность папаина из латекса папайи и бромелайна из плодов ананаса.Чиангмай J. Sci. 2014; 41: 635–648. [Google Scholar] 13. Bhatnagar P, Pant AB, Shukla Y, Panda A, Gupta KC. Наночастицы сополимера PLGA с привитой гиалуроновой кислотой усиливают адресную доставку бромелайна при асцитной карциноме Эрлиха. Евро. J. Pharm. Биофарм выкл. J. Arbeitsgemeinschaft Pharmazeutische Verfahrenstechnik e.V. 2016; 105: 176–192. DOI: 10.1016 / j.ejpb.2016.06.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Бхатнагар П. и др. Противораковая активность наночастиц бромелаина при пероральном приеме.J. Biomed. Nanotechnol. 2014; 10: 3558–3575. DOI: 10.1166 / jbn.2014.1997. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Oliveira CP, et al. Многостенные нанокапсулы с липидным ядром, функционализированные бромелайном: состав, химическая структура и антипролиферативный эффект против клеток рака груди человека (MCF-7) Pharm. Res. 2017; 34: 438–452. DOI: 10.1007 / s11095-016-2074-2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Монография по бромелайну. Альтерн. Med. Преподобный J. Clin. Ther. 2010. 15: 361–368. [PubMed] [Google Scholar] 17.Ataide JA и др. Натуральные активные вещества для заживления ран: обзор. Фитотэр. Res. 2018; 32: 11. DOI: 10.1002 / ptr.6102. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Хамиди М., Азади А., Рафией П. Наночастицы гидрогеля в доставке лекарств. Adv. Препарат Делив. Ред. 2008; 60: 1638–1649. DOI: 10.1016 / j.addr.2008.08.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 19. de Pachioni-Vasconcelos JA, et al. Наноструктуры для доставки белковых лекарств. Биоматер. Sci. 2016; 4: 205–218. DOI: 10.1039 / C5BM00360A. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20.Мао С., Сан В., Киссель Т. Составы на основе хитозана для доставки ДНК и миРНК. Adv. Препарат Делив. Ред. 2010; 62: 12–27. DOI: 10.1016 / j.addr.2009.08.004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Антосова З., Мацкова М., Краль В., Мацек Т. Терапевтическое применение пептидов и белков: навсегда парентерально? Trends Biotechnol. 2009. 27: 628–635. DOI: 10.1016 / j.tibtech.2009.07.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Balcão VM, et al. Наноинкапсуляция бычьего лактоферрина для пищевых и биофармацевтических применений.Пищевой Hydrocoll. 2013. 32: 425–431. DOI: 10.1016 / j.foodhyd.2013.02.004. [CrossRef] [Google Scholar] 23. Prego C, et al. Нанокапсулы хитозан – ПЭГ как новые носители для пероральной доставки пептидов: влияние степени пегилирования хитозана. J. Control. Выпускать. 2006; 111: 299–308. DOI: 10.1016 / j.jconrel.2005.12.015. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Атаиде Дж. А., Жериос Э. Ф., Маццола П. Г., Соуто Э. Б. Наночастицы, содержащие бромелайн: всесторонний обзор современного состояния. Adv. Коллоидный интерфейс Sci. 2018; 254: 48–55.DOI: 10.1016 / j.cis.2018.03.006. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. Sinha VR и др. Микросферы хитозана как потенциальный носитель лекарств. Int. J. Pharm. 2004. 274: 1–33. DOI: 10.1016 / j.ijpharm.2003.12.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 26. О’Каллаган КАМ, Керри JP. Приготовление наночастиц хитозана с низкой и средней молекулярной массой и их антимикробная оценка против группы микроорганизмов, включая культуры, полученные из сыра. Контроль пищевых продуктов. 2016; 69: 256–261. DOI: 10.1016 / j.foodcont.2016.05.005. [CrossRef] [Google Scholar] 27. Ataide JA и др. Влияние источников полисахаридов на физико-химические свойства наночастиц бромелаин-хитозан. Полимеры. DOI 2019: 10.3390 / polym11101681. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28. Ataide JA и др. Лиофилизированные наночастицы хитозана для стабилизации и доставки бромелаина. J. Drug Deliv. Sci. Technol. DOI 2020: 10.1016 / j.jddst.2020.102225. [CrossRef] [Google Scholar] 29. Talib WH, Alsalahat I, Daoud S, Abutayeh RF, Mahmod AI.Натуральные продукты растительного происхождения в исследованиях рака: экстракция, механизм действия и состав лекарственного средства. Молекулы (Базель, Швейцария) 2020; 25: 5319. DOI: 10,3390 / молекулы25225319. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Hebbar UH, Sumana B, Hemavathi AB, Raghavarao KSMS. Разделение и очистка бромелайна с помощью обратной мицеллярной экстракции в сочетании с ультрафильтрацией и сравнительными исследованиями с другими методами. Food Bioprocess Technol. 2012; 5: 1010–1018. DOI: 10.1007 / s11947-010-0395-4.[CrossRef] [Google Scholar] 31. Бхаттачарджи С. DLS и дзета-потенциал — что это такое, а что нет? J. Control. Выпускать. 2016; 235: 337–351. DOI: 10.1016 / j.jconrel.2016.06.017. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Феличе Ф и др. Влияние различных производных хитозана на анализ царапин in vitro: сравнительное исследование. Int. J. Biol. Макромол. 2015; 76: 236–241. DOI: 10.1016 / j.ijbiomac.2015.02.041. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Элиас Р.Дж., Келлерби СС, Деккер Е.А. Антиоксидантная активность белков и пептидов.Крит. Rev. Food Sci. Nutr. 2008. 48: 430–441. DOI: 10.1080 / 104083425615. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Чанг Т-С и др. Бромелайн подавляет способность клеток колоректального рака к пролиферации за счет активации производства АФК и аутофагии. PLoS ONE. 2019; 14: e0210274. DOI: 10.1371 / journal.pone.0210274. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Mohamed SIA, Jantan I, Haque MA. Встречающиеся в природе иммуномодуляторы с противоопухолевой активностью: понимание механизмов их действия.Int. Иммунофармакол. 2017; 50: 291–304. DOI: 10.1016 / j.intimp.2017.07.010. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Хамфрис MJ. К структурной модели интегрина. Biochem. Soc. Symp. 1999; 65: 63–78. [PubMed] [Google Scholar] 38. Schulz A, Fuchs PC, Oplaender C, Valdez LB, Schiefer JL. Влияние ферментативной очистки на основе бромелайна на клетки кожи. J. Burn Care Res. 2018; 39: 527–535. DOI: 10.1093 / jbcr / irx011. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Айхеле К., Бубель М., Деубель Дж., Похлеманн Т., Оберрингер М.Бромелайн подавляет дифференцировку миофибробластов в анализе заживления ран in vitro. Наунин Шмидебергс Арка. Pharmacol. 2013; 386: 853–863. DOI: 10.1007 / s00210-013-0890-z. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Wu R, et al. Обзор антиоксидантных пептидов, полученных из морских ресурсов: источники, характеристики, очистка и методы оценки. Прил. Biochem. Biotechnol. 2015; 176: 1815–1833. DOI: 10.1007 / s12010-015-1689-9. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Певица AJ и др.Быстрая и селективная ферментативная обработка ожогов свиного гребня с помощью бромелайновой дебразы: сохранение острой фазы неповрежденной ткани и зоны застоя. J. Burn Care Res. Выключенный. Publ. Являюсь. Burn Assoc. 2010. 31: 304–309. DOI: 10.1097 / BCR.0b013e3181d0f4d4. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 42. Сингх С., Янг А., Макнот С.-Е. Физиология заживления ран. Surg. Заразить. (Larchmt.) 2017; 35: 473–477. DOI: 10.1016 / j.mpsur.2017.06.004. [CrossRef] [Google Scholar] 43. Дай Т., Танака М., Хуанг И-И, Хамблин МР.Препараты хитозана для лечения ран и ожогов: антимикробное и ранозаживляющее действие. Эксперт Преподобный Anti-Infect. Ther. 2011; 9: 857–879. DOI: 10.1586 / eri.11.59. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44. Howling GI, et al. Влияние хитина и хитозана на пролиферацию фибробластов и кератиноцитов кожи человека in vitro. Биоматериалы. 2001; 22: 2959–2966. DOI: 10.1016 / S0142-9612 (01) 00042-4. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Нил SH, Khobragade CN, Park SW. Оптимизированные и сравнительные анализы антиоксидантов и их применение в анализе растительных и синтетических лекарств в качестве антиоксидантов.Mini-Rev. Med. Chem. 2012; 12: 1007–1014. DOI: 10,2174 / 138955712802762310. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46. Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C. Использование метода свободных радикалов для оценки антиоксидантной активности. LWT Food Sci. Technol. 1995; 28: 25–30. DOI: 10.1016 / S0023-6438 (95) 80008-5. [CrossRef] [Google Scholar] 47. Re R и др. Антиоксидантная активность с использованием улучшенного анализа обесцвечивания катион-радикала ABTS. Свободный Радич. Биол. Med. 1999; 26: 1231–1237. DOI: 10.1016 / S0891-5849 (98) 00315-3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48.Монахи А. и др. Возможность проведения скрининга противоопухолевых лекарств с высоким потоком с использованием разнообразной панели культивируемых линий опухолевых клеток человека. J. Natl. Cancer Inst. 1991; 83: 757–766. DOI: 10.1093 / jnci / 83.11.757. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Nunes JHB, et al. Синтез, характеристика и биологические анализы in vitro комплекса серебра (I) с 5-фторурацилом: стратегия преодоления опухолевых клеток с множественной лекарственной устойчивостью. J. Fluor. Chem. 2017; 195: 93–101. DOI: 10.1016 / j.jfluchem.2017.01.016. [CrossRef] [Google Scholar] 50.Bachiega P, et al. Антиоксидантная и антипролиферативная активность на разных стадиях созревания брокколи ( Brassica oleracea Italica), биообогащенная селеном. Food Chem. 2016; 190: 771–776. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2015.06.024. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 51. Лян Ц.-К, Парк А.Ю., Гуань Ж.-Л. Скрип-анализ in vitro: удобный и недорогой метод анализа миграции клеток in vitro. Nat. Protoc. 2007; 2: 329. DOI: 10.1038 / nprot.2007.30. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52.Todaro GJ, Lazar GK, Green H. Инициирование клеточного деления в линии клеток млекопитающих с контактным ингибированием. J. Cell. Комп. Physiol. 1965; 66: 325–333. DOI: 10.1002 / jcp.1030660310. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Функциональные возможности ПУЛЬТ ДИСТАНЦИОННОГО УПРАВЛЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТЬ УСТАНОВКИ И ОБОГРЕВАТЕЛЬ Конструкция и конструкция ЦВЕТА Проглатывание инородных тел (ИК) является обычным явлением и редко имеет последствия для пациента, но иногда может вызвать перфорацию желудочно-кишечного тракта и привести к разрушительным последствиям, если его не распознать. Таким образом, перфорация кишечника при любом ее наличии требует немедленного хирургического вмешательства. 89-летняя женщина с ущемленной послеоперационной грыжей, визуализация которой соответствовала кишечной окклюзии и перфорации внутри грыжевого мешка, проходила лечение в нашей больнице.Выполнена сегментарная энтерэктомия и прямая коррекция грыжевого дефекта. Перфорация на границе брыжейки из-за FB, которая, казалось, была зубочисткой, была обнаружена в хирургическом образце. Через девять месяцев после операции у пациента не было жалоб, прошло адекватное заживление и не было признаков рецидива грыжи. Насколько нам известно, это первый случай перфорации кишечника при ущемленной послеоперационной грыже из-за проглатывания FB, о котором сообщалось в литературе. Случайное или намеренное проглатывание инородных тел (FB) — довольно распространенное явление. Большинство случаев являются случайными [1, 2], и действительно, в> 75% случаев они устраняются спонтанно [3]. Распространенными факторами риска приема ФБ является использование зубных протезов или зубных протезов, большинство из которых — кости, рыбьи кости и зубочистки [1, 4]. Перфорация кишечника, по-видимому, наблюдается редко и встречается менее чем в 1% случаев [5], но всякий раз, когда она присутствует, они требуют срочного лечения.Насколько нам известно, в литературе ранее не сообщалось о случаях перфорации кишечника при ущемленной послеоперационной грыже из-за проглатывания FB. Здесь сообщается о редком случае сдерживаемой перфорации кишечника в мешочке ущемленной послеоперационной грыжи из-за проглатывания FB, который, по-видимому, был зубочисткой. 89-летняя женщина, частично зависимая, в анамнезе имела гипертонию, сахарный диабет 2 типа, патологическое ожирение III класса (индекс массы тела 43 кг / м 2 ), хроническую обструктивную болезнь легких, синдром обструктивного апноэ во сне и В нашей больнице наблюдалась нестратифицированная сердечная недостаточность.Пациент был доставлен в отделение неотложной помощи из-за общей боли в животе, тошноты и рвоты с 24-часовым развитием и жалоб на отсутствие газов или испражнений в течение последних 48 часов. При медицинском осмотре у нее были обнаружены признаки обезвоживания, артериальное давление составляло 106/47 мм рт. Ст., Частота сердечных сокращений 106 ударов в минуту и температура тела 37 ° C. При осмотре живота был обнаружен шрам от среднего разреза пуповины и пупка. Наблюдалась невправимая пупочная грыжа с кожной эритемой, болью и защитой (рис.1). Рисунок 1 Введенная послеоперационная грыжа. Рисунок 1 Введенная послеоперационная грыжа. Были начаты жидкостные реанимационные мероприятия, мониторинг диуреза и обезболивание. Аналитически, у нее был лейкоцитоз 227000 / мкл с нейтрофилией 89%, повышенный уровень С-реактивного белка 27,1 мг / дл и острое повреждение почек с креатинином 1,8 мг / дл и мочевиной 96 мг / дл. Анализ газов артериальной крови не показал ацидоза, дыхательной недостаточности или гиперлактатемии.Компьютерная томография (КТ) выявила пупочную грыжу, содержащую петлю тонкой кишки, показала уплотнение грыжевого жира и также присутствовали пузырьки внепросветного газа (рис. 2). Также было идентифицировано изображение высокой плотности и нитевидной морфологии, совместимое с FB (рис. 3). Изображения соответствовали расширению проксимальных петель кишечника, что свидетельствовало об окклюзии кишечника. Рисунок 2 КТ брюшной полости: содержимое грыжи, состоящее из петли кишечника и уплотнения брыжейки пузырьками газа. Рисунок 2 КТ брюшной полости: содержимое грыжи, состоящее из петли кишечника и уплотнения брыжейки пузырьками газа. Рисунок 3 КТ брюшной полости: изображение высокой плотности и нитевидной морфологии, совместимое с FB. Рисунок 3 КТ брюшной полости: изображение высокой плотности и нитевидной морфологии, совместимое с FB. Пациент поступил в операционную для проведения исследовательской лапаротомии.Во время операции была подтверждена ущемленная грыжа, размер шеи которой составлял около 3 см. Удалось визуализировать петлю тонкой кишки, что свидетельствовало о значительном утолщении кишечной стенки, а также о локальном абсцессе, содержащемся в прилегающей брыжейке, без свободной внутрибрюшной жидкости. Хирургическое вмешательство — сегментарная энтерэктомия с первичным анастомозом, а также прямая коррекция грыжевого дефекта. В связи с наличием у пациента сопутствующих заболеваний операция проводилась под непрерывной спинномозговой анестезией.В оперативном препарате зафиксировано заметное утолщение брыжейки (рис. 4) и перфорация брыжеечного края петли, вызванная нитевидным ФБ длиной ~ 3,5 мм, совместимым с зубочисткой (рис. 5). Рисунок 4 Образец после открытой энтерэктомии, в котором определяется выраженное утолщение брыжейки. Рисунок 4 Образец после открытой энтерэктомии, в котором определяется выраженное утолщение брыжейки. Рисунок 5 Образец после открытой энтерэктомии, в котором перфорация определяется на брыжеечной стороне стенки кишечника с помощью FB. Рисунок 5 Образец после открытой энтерэктомии, в котором перфорация определяется на брыжеечной стороне стенки кишечника с помощью FB. Послеоперационный период протекал без осложнений; пациент завершил 7-дневный цикл пиперациллина и тазобактама и был выписан на седьмой послеоперационный день.Гистопатологическая оценка хирургического образца выявила сегмент тонкой кишки с воспалительным инфильтратом брыжейки и очагами нагноения, связанными с небольшой областью непрерывного раствора кишечной стенки на границе брыжейки и связанными с ней очагами перитонита. Через девять месяцев после операции пациент без жалоб, с адекватным заживлением и без признаков рецидива грыжи. Был проведен поиск в PubMed с использованием терминов MeSH «перфорация кишечника», «инородные тела», «послеоперационная грыжа».Случаев перфорации кишечника при послеоперационных грыжах, вызванных приемом ФБ, выявить не удалось. Действительно, только два сообщения о случаях перфорации кишечника при обнаруженной послеоперационной грыже были вызваны эндоскопически установленным билиарным стентом [6, 7]. Проглатывание FB, хотя и является обычным явлением, редко имеет последствия для пациента. Основным фактором риска, по-видимому, является необходимость использования зубных протезов или зубных протезов [2, 4], как это было в случае с этим пациентом. Группы повышенного риска — это дети, пожилые люди, заключенные, пациенты с пониженной остротой зрения, злоупотребляющие алкоголем и психические заболевания [3, 8].Согласно литературным данным, большая часть проглоченных ФБ — это кости, рыбьи кости и зубочистки [1, 4]. Перфорация кишечника, вызванная FB, может иметь широкий спектр клинических проявлений. Боль в животе, локализованная или генерализованная, является наиболее частым симптомом [8]. Наиболее частыми участками перфорации являются терминальная часть подвздошной кишки и ректосигмоидный переход [1–4], вероятно, из-за размера просвета терминальной подвздошной кишки и илеоцекального клапана, а также из-за угла ректосигмоидного перехода. Эти состояния, которые также присутствуют в петлях грыжи, могут оправдать перфорацию в представленном случае.КТ — наиболее чувствительное и специфическое исследование для диагностики наличия и локализации перфорации кишечника [9, 10]; однако диагноз перфорации ФБ обычно устанавливается во время операции [2, 11]. Заболеваемость, описанная при перфорациях ФБ, составляет ~ 35%, а летальность редка [12]. При отсутствии осложнений эндоскопическое удаление является лечением первой линии, а у бессимптомных пациентов может быть достаточно бдительности. При возникновении осложнений, например, перфорации, хирургическое лечение обязательно.Варианты хирургического вмешательства могут варьироваться от первичного закрытия пораженного отверстия до сегментарной резекции с первичным анастомозом или без него, в зависимости от расположения, размера перфорации и тяжести перитонита. В заключение следует отметить, что проглатывание FB довольно распространено и редко вызывает перфорацию желудочно-кишечного тракта. Подозрение, особенно у пациентов с факторами риска, может позволить поставить своевременный диагноз и ограничить последствия для пациента. р.В.П. участвовал в разработке концепции этой статьи, изучал литературу и написал рукопись. C.F., A.M., G.G., D.M. и J.P.S. внес особый вклад в концепцию и рецензирование статьи. Эта рукопись соответствует правилам нашего институционального комитета по этике. Письменное информированное согласие было получено от пациента. Не объявлено. Pinero Madrona A Fernández Hernández JA Carrasco Prats M Riquelme Riquelme J Parrila 9. Перфорация кишечника инородными телами евро J Surg 2000 166 307 9 Rodríguez-Hermosa JI Codina-Cazador A Sirvent JM Martín A Gironès Jirones Jirones Jirones JM Перфорация желудочно-кишечного тракта, вызванная попаданием внутрь инородных тел, подвергшихся хирургическому лечению Colorectal Dis 2008 10 701 7 Величков NG Grigorov GI Losanoff JE Kjossev KT Grzałka VAZ
Термостатическая головка VAZ Smart с дистанционным управлением предлагает 5 настроек температуры в помещении от 15 до 28 ° C и 7-дневный график работы. Полная функциональность головки доступна через приложение TERMA Smart control.Устройство имеет встроенный датчик температуры, но в составе системы Smart также работает с датчиком внешней температуры и влажности и датчиком открывания окна.
Устройством можно управлять удаленно с помощью бесплатного приложения TERMA Smart control (Android / iOS), установленного на любом портативном устройстве (например, смартфоне или планшете), которое позволяет подключаться к сети Wi-Fi. С одного мобильного устройства мы можем управлять любым количеством устройств серии Smart как локально из дома, так и извне через Интернет.Система Smart состоит только из нагревательных приборов и датчиков, дополнительный модуль управления не требуется.
Головка оснащена функцией АНТИФРОСТ, которая активируется автоматически, когда температура окружающей среды опускается до прибл. 6 ° C, чтобы не допустить замерзания радиатора. Также в случае критически низкого уровня заряда аккумулятора головка открывает клапан в аварийном режиме, чтобы избежать случайного замерзания системы. Устройство сигнализирует о тревожных состояниях непосредственно на интерфейсе и через управляющее приложение.
5-сегментный светодиодный индикатор показывает текущую установленную рабочую температуру и сигнализирует об активных дополнительных функциях. Панель управления адаптируется к монтажному положению головы (вертикальное или горизонтальное). Гнездо для зарядки аккумулятора спрятано под передней крышкой. Функция втягивания толкающего вала обеспечивает удобную установку и снятие головки. Готов к установке на клапан с резьбой M30x1,5 (переходники для Danfoss RA, RAV, RAVL, M28x1.5 клапанов и клапаны Giacomini и Caleffi доступны как отдельные аксессуары).
Основной корпус с панелью управления белого или черного цвета. Декоративные боковые панели в следующих цветах: белый, серебристый, хромированный и черный. Устройство также доступно в любом цвете по шкале RAL и в специальных цветах Terma (латунь и золото) при минимальном заказе от 100 штук каждого цвета. Перфорация кишечника при ущемленной послеоперационной грыже вследствие проглоченного инородного тела.Отчет о редком случае | Журнал хирургических историй болезни
Аннотация
ВВЕДЕНИЕ
ДЕЛО
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЗНОС АВТОРОВ
ЗАЯВЛЕНИЕ ОБ ЭТИКЕ
ЗАЯВЛЕНИЕ О КОНФЛИКТЕ ИНТЕРЕСОВ
Список литературы
1.
Попавшие внутрь инородные тела желудочно-кишечного тракта: ретроспективный анализ 542 случаев
.World J Surg
1996
;20
:1001
—5
.4.Goh
BK
,Chow
PK
,Quah
HM
,Ong
HS
,Eu
KW
,Ooi LL
, и др., и др.Перфорация желудочно-кишечного тракта вследствие попадания инородных тел
.World J Surg
2006
;30
:372
—7
.5.Mc
PR
,Karlan
M
,Williams
RD
.Перфорация кишечника инородным телом
.Am J Surg
1957
;94
:564
—6
,6.Akimboye
F
,Lloyd
T
,Hobson
S
,Garcea
G
.Миграция эндоскопического билиарного стента и перфорация тонкой кишки внутри послеоперационной грыжи
.Surg Laparosc Endosc Percutan Tech
2006
;16
:39
—40
.7.Mastorakos
DP
,Milman
PJ
,Cohen
R
,Goldenberg
SP
.Необычное осложнение билиарного стента — перфорация тонкой кишки ущемленного грыжевого мешка
.Am J Gastroenterol
1998
;93
:2533
—5
.8.Maleki
M
,Evans
WE
.Перфорация кишечного тракта инородным телом. Отчет о 12 случаях и обзор литературы
.Arch Surg
1970
;101
:475
—7
.9.Hainaux
B
,Agneessens
E
,Bertinotti
R
,De Maertelaer
V
,Rubesova
E 9000lluto al.
et al.Точность MDCT в прогнозировании места перфорации желудочно-кишечного тракта
.AJR Am J Roentgenol
2006
;187
:1179
—83
.10.Coulier
B
,Tancredi
MH
,Ramboux
A
.Спиральная компьютерная томография и мультидетекторная компьютерная томография для диагностики перфорации тонкой кишки, вызванной попаданием внутрь инородных тел
.евро Радиол
2004
;14
:1918
—25
.11.Syrakos
T
,Zacharakis
E
,Antonitsis
P
,Zacharakis
E
,Spanos
C
et al.
C
et al.
C
et al.
Хирургическое вмешательство по поводу инородных тел желудочно-кишечного тракта у взрослых: серия клинических случаев
.Med Princ Pract
2008
;17
:276
—9
.12.Chen
Q
,Huang
Y
,Wu
Y
,Zhao
K
,Zhu
B
,He
T.
Сравнительное исследование перфорации тонкой кишки вследствие инородного тела и других нетравматических причин
.Ulus Travma Acil Cerrahi Derg
2015
;21
:107
—12
.Опубликовано Oxford University Press и JSCR Publishing Ltd. © Автор (ы) 2021.
Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http: // creativecommons.org / licenses / by / 4.0 /), что разрешает неограниченное повторное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.Watson частично опровергает иски Бриттана о жестоком обращении с детьми | Леон Бриттан
Том Уотсон, заместитель лидера лейбористской партии, выступил с частичным опровержением своих обвинений в сексуальном насилии над детьми против бывшего министра внутренних дел от консерваторов Леона Бриттана.
Ватсон сказал в пятницу, что после его смерти в январе ему не следовало писать, что лорд Бриттан был «настолько близок ко злу, насколько это возможно для любого человека».Он сказал, что фраза, произнесенная предполагаемой жертвой жестокого обращения с детьми, была эмоциональной, и ему не следовало ее использовать.
Однако Уотсон отказался извиниться за то, что попросил полицию начать новое расследование в отношении Бриттана, заявив, что его долг — передать в полицию обвинения в сексуальном насилии над детьми.
Он указал, что его вопросы в парламенте о сети педофилов привели к осуждению, и настаивал на том, что «все время моей мотивацией было помогать жертвам как можно лучше».
Он сказал, что слышал, по его мнению, убедительные доказательства от предполагаемой жертвы жестокого обращения с детьми в отношении Бриттана, и считает своим долгом передать доказательства в полицию и Королевскую прокуратуру, чтобы вынести решение после изучения всех имеющиеся доказательства.
Бриттан был оправдан полицией по обвинению в изнасиловании женщины, но его имя также было передано полиции как одно из ряда высокопоставленных фигур, участвовавших в Вестминстерском детском секс-ринге.Авторитетность одного из ключевых свидетелей в отношении этих утверждений была серьезно поставлена под сомнение в программе BBC Panorama на этой неделе.
Лидер лейбористов Джереми Корбин защищал своего заместителя, говоря: «Он проделывает отличную работу, разоблачающую ужасные действия, и его следует поздравить с этим».
В блоге Huffington Post Уотсон добавил: «В прошлом я говорил, что прошу прощения за горе, которое пережила семья Леона Бриттана, когда они оплакивали его. Я все еще остаюсь.Но я хотел, чтобы предъявленные к нему иски были расследованы должным образом.
«Любой, кому будут представлены свидетельства такого рода, стоит перед выбором: передать их властям и убедить их провести расследование или проигнорировать их. Я выбрал первый вариант. Я чувствовал, что это мой долг ».
Брат Бриттана, сэр Сэмюэл Бриттан, 83 года, призвал Уотсона извиниться непосредственно перед его невесткой леди Дианой за то, что она ошибочно обвинила ее покойного мужа в изнасиловании и жестоком обращении с детьми. Он утверждал, что Уотсон нанес ущерб репутации Бриттана «непростительными» оскорблениями.
Сэмюэл Бриттан, бывший руководитель и обозреватель Financial Times на пенсии, сказал: «Он должен извиниться перед моей невесткой за необоснованные обвинения против моего брата. И ему также следует извиниться публично ».
Он осудил полицию за их «возмутительное обращение» с его братом, добавив: «Я воспитывался с людьми, которые говорили, что английская полиция прекрасна. Не уверен, что смогу повторить это сейчас ».
После того, как Бриттан умер в январе, Уотсон написал статью, описывающую, как его сверстник был «обвинен в изнасиловании нескольких детей», и неоднократные обвинения, по его словам, исходили от жертв, что Бриттан «настолько близок к злу, насколько это возможно для любого человека».
В статье в Daily Mirror Уотсон написал: «Не мне судить, правдивы ли претензии, выдвинутые против Бриттана. Полиция должна расследовать эти заявления, поскольку они продолжают это делать. Но я верю, что люди, с которыми я разговаривал, искренни ».
На протяжении своей жизни Бриттан постоянно отрицал обвинения в сексуальном насилии над детьми.
Уотсон был центральной фигурой в заявлении о существовании сети педофилов и сыграл ключевую роль в возобновлении дела об изнасиловании против Бриттана после того, как оно было закрыто из-за отсутствия доказательств.
Покойный сверстник был допрошен в условиях осторожности, когда он был неизлечимо болен раком прошлым летом, но полиция пришла к выводу, что в утверждении нет ничего, что могло бы заслуживать дальнейших действий.
Однако Бриттан не был проинформирован полицией об их решении перед смертью, а его вдове сообщили об этом только на прошлой неделе.
Недостаток силовика подверг критике Борис Джонсон. Мэр Лондона сказал Daily Telegraph: «Я приветствую тот факт, что теперь Метрополитен извинился перед леди Бриттан.Ясно, что задержка с сообщением ей об отсутствии дела для ответа совершенно неприемлема, и я поднял этот вопрос перед комиссаром ».
В ответ Скотланд-Ярд сообщил, что предоставит Джонсону подробный ответ на следующей неделе. В заявлении Метрополитена говорится: «Столичная полицейская служба готовит подробный ответ на запрос мэра Лондона с объяснением задержки с информированием вдовы мужчины в возрасте 70 лет, обвиняемого в изнасиловании, о том, что не было достаточных доказательств для того, чтобы приступить к расследованию. заряд.
«MPS ожидает, что этот ответ будет передан ему на следующей неделе после того, как будут рассмотрены все материалы».
Бывший канцлер консерваторов Норман Ламонт, писавший в Daily Telegraph, также напал на полицию. «После смерти лорда Бриттана полиция провела обыск в двух его домах, в то время как его вдова все еще разбирала его вещи, некоторые из которых были увезены. Как и в случае с Клиффом Ричардом… Журналисты BBC рассказывали людям, что их предупредила полиция.
«Перед смертью лорда Бриттана полиция, ссылаясь на обвинение в изнасиловании, предложила ему принять участие в опознании.Это кажется без сатиры. Как мог известный публичный человек, которого уже назвал и опознал его обвинитель, с пользой принять участие в такой шараде? »
Он сказал, что несколько раз навещал Бриттана перед смертью и «видел страдания человека под тенью самых гнусных обвинений. Это было чрезвычайно болезненное время для его жены ».
Уотсон, депутат от лейбористской партии Вест-Бромвич-Ист, избранный заместителем лидера в прошлом месяце, имеет опыт решения непопулярных вопросов, но ему придется решить, соблюдает ли он в данном случае правильный баланс между правами предполагаемые жертвы и обвиняемые.
В той же статье Mirror он выделил обвинения, написав: «Я разговаривал с теми, кто утверждал, что он злоупотреблял ими. Так что эти утверждения пришли ко мне из первых рук, а не из-за инсинуаций или намеков ».
Скотланд-Ярд расследовал обвинения против Бриттана со стороны женщины, известной как «Джейн», которые впервые всплыли в 2012 году, но после консультации с Королевской прокуратурой решила не продолжать расследование, и Бриттан был проинформирован о том, что он был в ясности.
В мае 2014 года Уотсон написал в Met и Элисон Сондерс, директору прокуратуры, с жалобой на то, что расследование было прекращено без допроса Бриттана.
В четверг вечером Кейт Ваз, председатель специального комитета по внутренним делам, написал в Метрополитен, требуя ответов по этому делу и спрашивая, почему полиция оказалась неспособной признать ошибку.
Название: | Ретракция зародышевой полосы как ориентир в метаболизме глюкозы при эмбриогенезе Aedes aegypti |
Авторы: | Vital Rezende, Gustavo Lazzaro Abreu, Leonardo Moraes, Jorge Lemos, Francisco J.A. Ваз младший, Итабахара да Силва Логулло, Карлос |
Место работы: | Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. Centro de Biociências e Biotcenologia. Laboratório de Biotecnologia. Laboratório de Química e Função de Proteínas. Кампус-душ-Гойтаказес, Род-Джерси, Бразилия. Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Fisiologia e Controle de Ártropodes Vetores. Рио-де-Жанейро, RJ, Бразилия / Институт биологии до Exército. Laboratório de Entomologia.Рио-де-Жанейро, RJ, Бразилия. Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. Centro de Biociências e Biotecnologia. Laboratório de Biotecnologia. Laboratório de Química e Função de Proteínas. Кампус-душ-Гойтаказес, Род-Джерси, Бразилия. Федеральный университет Рио-де-Жанейро. Instituto de Bioquímica Médica. Núcleo em Ecologia e Desenvolvimento Sócio-Ambiental de Macaé. Macaé, RJ, Brasil Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. Centro de Biociências e Biotecnologia.Laboratório de Biotecnologia. Laboratório de Química e Função de Proteínas. Кампус-душ-Гойтаказес, Род-Джерси, Бразилия. Федеральный университет ду Риу-Гранди-ду-Сул. Faculdade de Veterinária. Порту-Алегри, РС, Бразилия / Центр биотехнологии ду Эстаду-ду-Риу-Гранди-ду-Сул. Порту-Алегри, РС, Бразилия. Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. Centro de Biociências e Biotecnologia. Laboratório de Biotecnologia. Laboratório de Química e Função de Proteínas. Кампус-душ-Гойтаказес, Род-Джерси, Бразилия. |
Резюме: | Предпосылки: Комар A. aegypti является переносчиком денге и других вирусов. Необходимы новые методы борьбы с переносчиками болезней, которые могут быть реализованы за счет лучшего понимания жизненного цикла этого насекомого. Эмбриогенез — часть жизненного цикла A. aegypty, который плохо изучен. У насекомых в целом и у комаров в частности энергетический обмен хорошо изучен во время оогенеза, когда ооцит демонстрирует быстрый рост, накапливая углеводы, липиды и белки, которые удовлетворяют регуляторные и метаболические потребности развивающегося эмбриона.С другой стороны, события, связанные с энергетическим метаболизмом во время эмбриогенеза A. aegypti, неизвестны. Результаты: метаболизм глюкозы был исследован на протяжении эмбрионального развития Aedes aegypti (Diptera). Как формирование клеточной бластодермы (CBf, 5 ч после откладки яиц — HAE), так и ретракция зародышевой полосы (GBr, 24 HAE) могут считаться ориентирами в отношении назначения глюкозо-6-фосфата (G6P). Мы наблюдали высокий уровень активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (G6PDH) в самом начале эмбриогенеза, которая, тем не менее, снизилась до 5 HAE.Эта активность коррелирует с потребностью в предшественниках нуклеотидов, генерируемых пентозофосфатным путем (PPP), ключевым ферментом из которых является G6PDH. Мы предполагаем синхронность метаболизма яиц с распределением углеводов на основании снижения уровня активности фосфоенолпируваткарбоксикиназы (PEPCK) и наблюдаемого повышения содержания белка до 24 HAE. Одновременно наблюдалось повышение уровней активности гексокиназы (HK) и пируваткиназы (PK), и PEPCK достиг пика около 48 HAE.Активность киназы гликогенсинтазы (GSK3) также отслеживалась, и было показано, что она обратно коррелирует с распределением гликогена во время эмбриогенеза. Выводы: результаты, представленные здесь, подтверждают гипотезу, что метаболическая судьба глюкозы изменяется в соответствии с стадиями развития эмбриона. Втягивание зародышевой полосы — это момент, который был охарактеризован как веха в метаболизме глюкозы во время эмбриогенеза Aedes aegypti. Более того, результаты также подтверждают роль GSK3 в балансе / распределении гликогена во время морфологических модификаций. |
Ключевые слова: | Aedes aegypti эмбриогенез метаболизм глюкозы ретракция зародышевой полосы |
ключевые слова: | Aedes aegypti embriogênese метаболизм 9109 9107 9092 9107 9107 |
Издатель: | BMC |
Образец цитирования: | VITAL, Wagner; и другие. Втягивание зародышевой полосы как ориентир в метаболизме глюкозы во время эмбриогенеза Aedes aegypti.BMC Development Biology, v.10, n.25, 12p, 2010. |
ISSN: | 1471-213X |
Авторские права: | открытый доступ |
Имеется в коллекциях: | IOC — Artigos de Periódicos |
Заявления о значимости PNAS Plus | PNAS
Наносферные белки арабиногалактана являются ключевым компонентом высокопрочного адгезива, выделяемого английским плющом
Yujian Huang, Yongzhong Wang, Li Tan, Leming Sun, Jennifer Petrosino, Mei-Zhen Cui, Feng Hao и Mingjun Zhang
Несмотря на значительный прогресс, достигнутый в изучении молекулярной основы множественных адгезионных явлений в животном мире, исключительные адгезионные свойства вьющихся растений, таких как английский плющ, все еще плохо изучены.В этом исследовании было установлено, что сфероидальные наночастицы, наблюдаемые в слизи, выделяемой английским плющом, преимущественно состоят из белков арабиногалактана (AGP). Выясняется роль этих богатых AGP наночастиц в создании сильной адгезионной прочности. Вызванные Ca 2+ электростатические взаимодействия между уроновыми кислотами в составе AGP и пектином после отверждения могут быть использованы в качестве руководящих принципов при разработке и производстве новых синтетических клеев, а адгезивный композит на основе плюща может служить шаблоном для вдохновляющих идей. разработка разнообразных адгезионных биоматериалов.(См. Стр. E3193 – E3202.)
Поиск сверхтвердости в твердом теле
4 He с использованием многомодовых крутильных осцилляторовАнна Эяль, Сяо Ми, Артем В. Таланов и Джон Д. Реппи
Концепция сверхтвердое состояние в твердом теле 4 Впервые он был предложен в 1968 году, однако экспериментальные доказательства существования этого нового состояния материи были представлены только в 2004 году. Возможное открытие долгожданного сверхтвердого состояния вызвало много шума и, однако, сопровождалось экспериментальными и теоретическими работами, которые предполагали, что первоначальная интерпретация не была удовлетворительной.Теперь ясно, что многие из первоначально наблюдаемых сигналов можно объяснить изменениями модуля сдвига твердого тела в экспериментальных ячейках. В описанных здесь экспериментах мы использовали экспериментальную технику, которая позволяет различать эффекты модуля сдвига и эффекты возможного сверхтвердого состояния. (См. Стр. E3203 – E3212.)
О-связанная
N -ацетилглюкозаминтрансфераза (OGT) взаимодействует с гистоновым шаперонным комплексом HIRA и регулирует сборку нуклеосом и клеточное старениеJong-Sun Lee и Zhiguo Zhang Nucleos
Assembly регулируется на нескольких уровнях, влияя на отдельные клеточные процессы.Мутации в факторах, участвующих в сборке нуклеосом, таких как шапероны гистонов и варианты гистонов, приводят к нестабильности генома и дефектам экспрессии генов, которые, в свою очередь, способствуют развитию заболеваний человека, включая рак и старение. Следовательно, важно определить, как регулируется сборка нуклеосом h4.3. Наши результаты демонстрируют роль O-связанной трансферазы N -acetylglucosamine (GlcNAc) в регуляции депонирования / обмена h4.3 и устанавливают O-GlcNAc-модификацию HIRA как ранее не идентифицированный механизм, регулирующий сборку нуклеосом h4.3 и клеточное старение. (См. Стр. E3213 – E3220.)
Мультисамблевые марковские модели молекулярной термодинамики и кинетики
Хао Ву, Фабиан Пол, Кристоф Вемайер и Франк Ноэ
Моделирование молекулярной динамики может обеспечить механическое понимание биомолекулярных процессов. Однако прямое моделирование медленных переходов, таких как конформационные переходы белка или диссоциация белок-лиганд, невозможно с общедоступными вычислительными ресурсами. Две типичные стратегии: ( i ) проведение больших ансамблей коротких симуляций и оценка долгосрочной кинетики с помощью модели марковского состояния, и ( ii ) ускорение редких событий с помощью потенциалов смещения или более высоких температур и оценка несмещенной термодинамики с помощью оценщики переназначения.В этой работе мы представляем метод анализа взвешивания на основе переходов (TRAM), статистически оптимальный подход, который объединяет лучшее из обоих миров и оценивает мультисамблевую марковскую модель (MEMM) с полной термодинамической и кинетической информацией на всех моделируемых ансамблях. (См. Стр. E3221 – E3230.)
Структурные перестройки, индуцированные β1-субъединицей, Ca
2+ — и потенциал-активированный канал K + (BK)Хуан П. Кастильо, Хорхе Э. Санчес- Родригес, Х.Кларк Хайд, Кристиан А. Зельзер, Даниэль Агуайо, Ромина В. Сепульведа, Луис Ю. П. Лук, Стивен Б. Х. Кент, Фернандо Д. Гонсалес-Нило, Франсиско Безанилья и Рамон Латорре
Ca 2+ с большой проводимостью и напряжение -активированные каналы K + (BK) играют множество физиологических ролей, начиная от поддержания тонуса гладких мышц и заканчивая модуляцией толерантности к алкоголю. В большинстве случаев эта физиологическая универсальность BK-канала обусловлена ассоциацией порообразующей α-субъединицы с β-субъединицами.Поэтому важно знать, каковы структурные последствия этой ассоциации. Здесь, используя резонансный перенос энергии на основе лантаноидов, мы смогли определить внеклеточное положение трансмембранных сегментов S0 – S2 с β1-субъединицей и без нее, а также положение двух трансмембранных сегментов субъединицы β1 в α / β1-субъединице. сложный. Мы пришли к выводу, что β1 вызывает перестройку области датчика напряжения BK. (См. Стр. E3231 – E3239.)
Оксилипины, производные от CYP450, способствуют разрешению воспалительного процесса
Derek W.Гилрой, Мэтью Л. Эдин, Рул PH Де Майер, Джонас Бистром, Жюстин Ньюсон, Фред Б. Лих, Мелани Стейблс, Дэррил С. Зельдин и Дэвид Бишоп-Бейли
Известно, что ряд липидных медиаторов способствуют разрешению воспалительного процесса. . Метаболиты жирных кислот ферментов цитохрома P450 (CYP) обнаруживаются в изобилии; однако их роль в разрешении воспалительного процесса неизвестна. Таргетная липидомика показала, что CYP450-эпокси-оксилипины присутствовали во время острого воспаления и разрешения воспалительного процесса.Используя мышей, у которых отсутствует растворимая эпоксидгидролаза, основной путь метаболизма медиаторов жирных кислот, производных CYP450, и ингибирование эпоксигеназы CYP450, особенно во время разрешения, мы показали, что липиды, полученные из CYP450, резко ограничивают накопление воспалительных моноцитов во время разрешения. Более того, все исследованные клетки линии моноцитов показали резкое изменение фенотипа их прорезолюции после ингибирования эпоксигеназы. Эти данные демонстрируют, что путь CYP450-эпокси-оксилипины играет решающую роль в привлечении клонов моноцитов и активности разрешения во время разрешения воспаления.(См. Стр. E3240 – E3249.)
Гормон роста разрешает опухолевый рост толстой кишки
Вера Чеснокова, Светлана Зонис, Цуйки Чжоу, Мария Виктория Рекуврё, Анат Бен-Шломо, Такако Араки, Роберт Барретт, Майкл Воркман, Воркман, , Владимир А. Любимов, Магдалена Ухарт и Шломо Мелмед
Избыток гормона роста (GH) при акромегалии связан с увеличением полипов толстой кишки и раком, тогда как у низкорослых людей с мутацией рецептора GH рак не развивается.Введение блокатора рецепторов GH пациентам с акромегалией индуцировало p53 толстой кишки. Напротив, р53 подавляется GH в клетках толстой кишки, in vivo в ткани толстой кишки и в индуцированных плюрипотентных стволовых клетках кишечных органоидов. Избыток GH ведет к выживанию клеток с подавлением аденоматозного полипоза кишечной палочки, накоплением ядерного β-катенина и увеличением факторов эпителиально-мезенхимального перехода. Поскольку локально экспрессируемый GH является обильным в условиях, предрасполагающих к раку толстой кишки, GH, по-видимому, является молекулярным компонентом среды, допускающей рост опухолей толстой кишки.Эти результаты объясняют защитные эффекты дефицита GH против развития новообразований. (См. Стр. E3250 – E3259.)
Coxiella burnetii эффекторный CvpB модулирует метаболизм фосфоинозитидов для оптимального развития вакуолейЭрик Мартинес, Джули Алломберт, Франк Кантет, Анисса Лакхани, Нареш Яндрапилли, Нареш Яндрапалли, Фавар, Дельфин Мурио и Маттео Бонацци
Биогенез репликативной вакуоли является важным этапом инфицирования Coxiella burnetii и включает захват нескольких путей переноса через мембрану хозяина.Здесь мы описываем вакуолярный белок B Coxiella (CvpB) как эффектор Coxiella , который взаимодействует с фосфоинозитидами на мембранах клеток-хозяев и управляет метаболизмом фосфатидилинозитол-3-фосфата [PI (3) P] для оптимального метаболизма Coxiella -CCV ) разработка. Это достигается путем нарушения активности фосфатидилинозитол-5-киназы PIKfyve, что приводит к обогащению PI (3) P на мембранах CCV, что необходимо для механизма аутофагии, чтобы опосредовать гомотипное слияние CCV.Важность этого процесса подчеркивается гомотипическим дефектом слияния между CCV в клетках, инфицированных мутантами CvpB Coxiella , что приводит к ослабленной вирулентности в модели насекомых Galleria mellonella . (См. Стр. E3260 – E3269.)
Тяжелая форма малярии у взрослых связана со специфическими типами адгезии PfEMP1 и высокой биомассой паразитов
Мария Бернабеу, Самуэль А. Данцигер, Марион Аврил, Марина Ваз, Прасад Х. Бабар, Эндрю Дж. Бразье , Терстон Херрикс, Дженнифер Н.Маки, Лигия Перейра, Анджали Маскареньяс, Эдвин Гомес, Лаура Чери, Джон Д. Эйчисон, Прадипсин К. Ратод и Джозеф Д. Смит
Клинические проявления тяжелой малярии у детей и взрослых различаются, но факторы, приводящие к этим различиям остаются малоизученными. Здесь мы исследовали факторы вирулентности паразитов у взрослых пациентов в Индии и показали, что специфические паразиты, связывающие рецептор эндотелиального протеина C (EPCR), связаны с тяжелой малярией у взрослых и действуют вместе с биомассой паразита при госпитализации пациентов и тяжести заболевания.Мы обнаружили существенные отличия в активности связывания EPCR от тяжелых изолятов малярии. Однако даже паразитарные домены, которые частично препятствовали взаимодействию между EPCR и его лиганд-активированным протеином C, были достаточными, чтобы вмешиваться в защитную активность активированного протеина C-барьера в эндотелиальных клетках головного мозга человека. Таким образом, восстановление функций EPCR может быть ключевой целью для дополнительного лечения малярией. (См. Стр. E3270 – E3279.)
Активные дендриты регулируют воздействие глиотрансмиссии на пирамидные нейроны гиппокампа крысы
Суфьян Ашхад и Ришикеш Нараянан
Глиальные клетки в головном мозге активно взаимодействуют с нейронами посредством высвобождения передающих молекул нейронов. отклонения напряжения, тем самым играя жизненно важную роль в обработке информации нейронов.Хотя значительная часть обработки информации в нейронах осуществляется при их ветвлении дендритов, влияние глиотрансмиссии на нейрональные дендриты не было нанесено на карту. Здесь мы показываем, что глиотрансмиссия, действуя через дифференциально локализованные медленные рецепторы, приводит к поразительно большим отклонениям напряжения в нейрональных дендритах, причем сила и распространение этих отклонений критически регулируются дендритными ионными каналами. Наши результаты добавляют существенно сложное измерение взаимодействиям нейронов с глией, демонстрируя, что нейрональные дендриты и их потенциал-зависимые каналы играют активную роль в регулировании воздействия таких взаимодействий.(См. Стр. E3280 – E3289.)
Осморегуляторный транспортер инозита SMIT1 модулирует электрическую активность, регулируя уровни PI (4,5) P
2Gucan Dai, Haijie Yu, Martin Kruse, Alexis Traynor-Kaplan и Bertil Hille
Клетки, живущие в различных средах, развивают способы адаптации к измененным внеклеточным условиям. Во время гипертонического стресса экспрессия некоторых переносчиков осмолита человека увеличивается, тем самым накапливая больше осмолитов и повышая внутриклеточную осмолярность.Мы сосредоточились на одном из этих осмолитов, мио-инозитоле, который также является предшественником мембранных фосфоинозитидных липидов. Мы обнаружили, что внутриклеточное накопление мио-инозитола через его переносчик SMIT1 способно увеличивать уровни фосфоинозитидов и тем самым модулировать активность фосфоинозитид-зависимых ионных каналов. Мы предоставляем доказательства ранее не идентифицированной связи между внеклеточными осмотическими изменениями и электрическими свойствами возбудимых клеток. Наши результаты могут помочь выяснить механизмы, лежащие в основе нескольких заболеваний, характеризующихся либо нарушением уровня мио-инозитола, либо повышенным внеклеточным тонусом.(См. Стр. E3290 – E3299.)
Комбинаторные эффекты одорантов на поведение мышей
Луис Р. Сараива, Кунио Кондо, Сяолань Е, Кён Хе Юн, Маркус Эрнандес и Линда Б. Бак
Обнаружение запаха в нос мыши опосредован ~ 1000 различных рецепторов запаха (OR) и 14 следовых амино-ассоциированных рецепторов (TAAR). Различные комбинации ИЛИ вызывают разное восприятие запаха. Однако некоторые TAAR связаны с врожденным притяжением или отвращением к запахам, что позволяет предположить, что они передают сигнал через жесткие нейронные цепи, устойчивые к входам комбинаторных рецепторов.Вопреки этому прогнозу, мы обнаружили, что разные лиганды для данного TAAR могут быть привлекательными или отталкивающими, или вместо этого нейтральными. Кроме того, некоторые привлекательные и неприятные запахи блокируют поведенческие эффекты друг друга. Блокирование запаха может происходить без антагонизма рецепторов в носу и может потребовать сенсорного ввода от одного рецептора. Таким образом, врожденное поведение, вызванное запахом, может зависеть от контекста и модулироваться взаимодействием в мозге сигналов, поступающих от различных рецепторов. (См. Стр. E3300 – E3306.)
Нейрональный путь восприятия энергии способствует энергетическому балансу путем регулирования толерантности к болезням
Ран Шен, Бяо Ван, Мария Г. Гирибальди, Джанель Эйрес, Джон Б. Томас и Марк Монмини
Коактиватор Drosophila , регулируемая сАМР транскрипция коактиватор (Crtc) функционирует в нейронах, способствуя энергетическому балансу. Мы обнаружили, что Crtc и его связывающий партнер связывающий белок цАМФ (CREB) поддерживают метаболический гомеостаз, стимулируя экспрессию нейропептида-Y-подобного нейропептида короткого нейропептида F (sNPF).Потеря sNPF нарушает целостность эпителия кишечника и увеличивает экспрессию генов иммунного ответа, что приводит к снижению запасов триглицеридов и гликогена.